单体一叶萩碱的分离纯化方法技术

本发明专利技术提供了一种高纯度单体一叶萩碱的分离纯化方法，包括以下步骤：S1)将一叶萩用醇提取，得到提取液；S2)将所述提取液经反相聚合物色谱填料吸附后，洗脱，得到洗脱液；S3)将所述洗脱液经硅胶柱层析色谱纯化后，得到纯化洗脱液；S4)将所述纯化洗脱液重结晶，得到高纯度单体一叶萩碱。与现有技术相比，本发明专利技术工艺简单，成本低，且可直接得到一叶萩碱无需经碱化处理，使产品收率与纯度均较高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于中药提取
，尤其涉及一种高纯度单体一叶萩碱的分离纯化方法。
技术介绍
一叶萩，也称叶底珠，为大戟科植物。一叶萩的叶及花具有祛风活血、补肾强筋之功效，主治面神经麻痹、小儿麻痹后遗症、眩晕、耳聋、神经衰弱、嗜睡症、阳痿等。该品种在我国资源十分丰富，其根、叶和嫩枝中均含有多种生物碱，主要生物碱有一叶萩碱、二氢一叶萩碱、别一叶萩碱、右旋别一叶萩碱、右旋一叶萩碱、一叶萩亭宁、一叶萩醇碱A、B、C等，其中以一叶萩碱含量最高。一叶萩碱和它的衍生物具有兴奋中枢神经、增强心肌收缩、升高血压等作用，临床用硝酸一叶萩碱治疗面神经麻痹、小儿麻痹骶神经炎和股外侧神经炎感染引起的多发性神经炎，成为神经科疾患的常用药物。一叶萩碱为叔胺碱如式(I)所示(pKa7.2)，具有生物碱的一般通性，因此现有一叶萩碱的提取分离利用生物碱盐易溶于水、游离生物碱易溶于有机溶剂的性质，将原料用酸水提取，提取液过强酸型的阳离子交换树脂使生物碱被树脂吸附，然后，碱化树脂使生物碱游离，石油醚提取，回收溶剂即可得到生物碱。但此方法的提取效率较低。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术要解决的技术问题在于提供一种产率较高的高纯度单体一叶萩碱的分离纯化方法。本专利技术提供了一种高纯度单体一叶萩碱的分离纯化方法，包括以下步骤：S1)将一叶萩用醇提取，得到提取液；S2)将所述提取液经反相聚合物色谱填料吸附后，洗脱，得到洗脱液；S3)将所述洗脱液经硅胶柱层析色谱纯化后，得到纯化洗脱液；S4)将所述纯化洗脱液重结晶，得到一叶萩碱。优选的，所述提取的温度为70℃～90℃；所述提取的时间为1～2h。优选的，所述提取的次数为3～8次。优选的，所述反相聚合物色谱填料为大孔树脂填料或NM系列色谱填料。优选的，所述步骤S2)具体为：将所述提取液经反相聚合物色谱填料吸附后，依次用水、30％～50％的醇溶液洗涤，然后用70％～90％的乙醇洗脱，得到洗脱液。优选的，所述步骤S3)具体为：将洗脱液减压浓缩后，用硅胶拌样，得到过柱原料；用有机溶剂与醇溶剂对过柱原料进行梯度洗脱，得到纯化洗脱液；所述有机溶剂为二氯甲烷或乙酸乙酯。优选的，所述硅胶的目数为60～80目。优选的，所述梯度洗脱具体为：100％有机溶剂；待杂质基本除净后，有机溶剂与醇溶剂的体积比为(40～60)：1，得到纯化洗脱液；所述有机溶剂为二氯甲烷或乙酸乙酯。优选的，所述步骤S4)具体为：将所述纯化洗脱液减压浓缩后，用醇水溶液重结晶，得到一叶萩碱。优选的，所述醇水溶液中醇溶剂与水的体积比为(1：2)～(4：5)。本专利技术提供了一种高纯度单体一叶萩碱的分离纯化方法，包括以下步骤：S1)将一叶萩用醇提取，得到提取液；S2)将所述提取液经反相聚合物色谱填料吸附后，洗脱，得到洗脱液；S3)将所述洗脱液经硅胶柱层析色谱纯化后，得到纯化洗脱液；S4)将所述纯化洗脱液重结晶，得到高纯度单体一叶萩碱。与现有技术相比，本专利技术工艺简单，成本低，且可直接得到一叶萩碱无需经碱化处理，使产品收率与纯度均较高。附图说明图1为原料一叶萩的HPLC谱图；图2为本专利技术实施例1中得到的一叶萩碱的HPLC谱图；图3为本专利技术实施例2中得到的一叶萩碱的HPLC谱图；图4为本专利技术实施例3中得到的一叶萩碱的HPLC谱图；图5为本专利技术实施例4中得到的一叶萩碱的HPLC谱图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术提供了一种高纯度单体一叶萩碱的分离纯化方法，包括以下步骤：S1)将一叶萩用醇提取，得到提取液；S2)将所述提取液经反相聚合物色谱填料吸附后，洗脱，得到洗脱液；S3)将所述洗脱液经硅胶柱层析色谱纯化后，得到纯化洗脱液；S4)将所述纯化洗脱液重结晶，得到高纯度单体一叶萩碱。按照本专利技术，优选先将一叶萩粉碎，然后再用醇提取，得到提取液；所述粉碎的程度优选为2～5mm的段；所述醇为本领域技术人员熟知的醇即可，并无特殊的限制，本专利技术中优选为乙醇和/或甲醇，更优选为体积分数为95％的乙醇和/或体积分数为95％的甲醇；所述一叶萩与醇的质量体积比优选为1g:(3～5)ml；所述提取的温度优选为70℃～90℃，更优选为75℃～85℃，再优选为80℃；所述提取的时间优选为1～2h；为提高提取产率，优选提取3～8次，更优选提取4～6次，最优选提取5次，将各次的提取液合并。在本专利技术中，优选先将提取液浓缩；所述浓缩的方法为本领域技术人员熟知的方法即可，并无特殊的限制，本专利技术优选采用减压浓缩；所述浓缩的温度优选为50℃～70℃，更优选为55℃～65℃，再优选为60℃；所述浓缩优选至无醇溶剂为止。浓缩后，用反向聚合物色谱填料吸附；所述反向聚合物色谱填料为本领域技术人员熟知的反向聚合物色谱填料即可，并无特殊的限制，本专利技术中优选为大孔树脂填料或NM系列色谱填料；所述大孔树脂为本领域技术人员熟知的大孔树脂即可，并无特殊的限制，本专利技术中优选为AB-8大孔树脂或D-101大孔树脂；所述NM系列色谱填料为本领域技术人员熟知的NM系列色谱填料即可，并无特殊的限制，本专利技术中优选为NM100-反向聚合物色谱填料。吸附后，优选依次用水、30％～50％的醇溶液洗涤，然后用70％～90％的乙醇洗脱，得到洗脱液；所述醇溶液为本领域技术人员熟知的醇溶液即可，并无特殊的限制，本专利技术中优选为甲醇溶液和/或乙醇溶液。其中，在本专利技术中如无特殊说明百分数均为体积百分数，如30％～50％的醇溶液为醇体积分数为30％～50％的醇溶液。将所述洗脱液用硅胶柱层析色谱纯化，具体优选按照以下步骤进行：将洗脱液减压浓缩后，用硅胶拌样，得到过柱原料；用有机溶剂与醇溶剂对过柱原料进行梯度洗脱，得到纯化洗脱液；所述有机溶剂为二氯甲烷或乙酸乙酯；所述醇溶剂为本领域技术人员熟知的醇溶剂即可，并无特殊的限制，本专利技术中优选为甲醇。。在本专利技术中，优选将洗脱液减压浓缩至浸膏，然后再用硅胶拌样，得到过柱原料；所述减压浓缩的温度优选为50℃～70℃，更优选为55℃～65℃，再优选为60℃；所述硅胶的目数优选为60～80目；所述浸膏与硅胶的质量比优选为1：(2～4)。用有机溶剂与醇溶剂对过柱原料进行梯度洗脱；所述梯度洗脱的程序优选具体为：100％有机溶剂；待杂质基本除净后，有机溶剂与醇溶剂的体积比为(40～60)：1，优选为(45～55)：1，再优选为50：1，得到纯化洗脱液；所述有机溶剂为二氯甲烷或乙酸乙酯。得到洗脱液后，优选继续进行洗脱，有机溶剂与醇溶剂的体积比为30：1，本段含有少量产品后段，最后有机溶剂与醇溶剂的比例为10：1洗脱，至色带全部洗完，把柱内试剂全部压干，洗脱完成。将所述纯化洗脱液结晶；所述结晶的方法为本领域技术人员熟知的方法即可，并无特殊限制，本专利技术优选将所述纯化洗脱液减压浓缩后，用醇水溶液重结晶，得到一叶萩碱；所述减压浓缩的温度优选为50℃～70℃，更优选为55℃～65℃，再优选为60℃；所述减压浓缩优选至无有机溶剂；所述醇水溶液中醇溶剂与水的体积比优选为(1：2)～(4：5)；所述醇溶剂为本领域技术人本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高纯度单体一叶萩碱的分离纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：S1)将一叶萩用醇提取，得到提取液；S2)将所述提取液经反相聚合物色谱填料吸附后，洗脱，得到洗脱液；S3)将所述洗脱液经硅胶柱层析色谱纯化后，得到纯化洗脱液；S4)将所述纯化洗脱液重结晶，得到高纯度单体一叶萩碱。

【技术特征摘要】
1.一种高纯度单体一叶萩碱的分离纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：S1)将一叶萩用醇提取，得到提取液；S2)将所述提取液经反相聚合物色谱填料吸附后，洗脱，得到洗脱液；S3)将所述洗脱液经硅胶柱层析色谱纯化后，得到纯化洗脱液；S4)将所述纯化洗脱液重结晶，得到高纯度单体一叶萩碱。2.根据权利要求1所述的分离纯化方法，其特征在于，所述提取的温度为70℃～90℃；所述提取的时间为1～2h。3.根据权利要求1所述的分离纯化方法，其特征在于，所述提取的次数为3～8次。4.根据权利要求1所述的分离纯化方法，其特征在于，所述反相聚合物色谱填料为大孔树脂填料或NM系列色谱填料。5.根据权利要求1所述的分离纯化方法，其特征在于，所述步骤S2)具体为：将所述提取液经反相聚合物色谱填料吸附后，依次用水、30％～50％的醇溶液洗涤，然后用70％～90％的乙醇洗...

【专利技术属性】
技术研发人员：董维珍，常建红，寇俊闯，
申请(专利权)人：成都瑞芬思生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51