一种鳞翅目环氧烯烃同分异构体的分离制备方法技术

本发明专利技术属于半制备HPLC分离纯化技术领域，具体涉及一种鳞翅目环氧烯烃同分异构体的分离制备方法，包括以下步骤：1）半制备液相色谱的准备；2）流动相的配制；3）流动相参数设定；4）样品分离制备。本发明专利技术可有效分离人工合成的C

【技术实现步骤摘要】
一种鳞翅目环氧烯烃同分异构体的分离制备方法
本专利技术属于半制备HPLC分离纯化
，具体涉及一种鳞翅目环氧烯烃同分异构体的分离制备方法。
技术介绍
昆虫性信息素，又称性外激素，是由同种昆虫的某一性别个体的特殊分泌器官分泌于体外，能被同种异性个体的感受器所接受，并引起异性个体产生一定的行为反应或生理效应（如觅偶、定向求偶、交配等）的微量化学物质。昆虫性信息素作为上世纪60年代化学生态学的重要发现，因其具有高效、环保、专一性强等优点，受到各国科学家的肯定，被认为是“生物合理农药”。目前报道已鉴定的600多种鳞翅目昆虫性信息素根据化学结构特点基本可归纳为3大类型。类型1的性信息素为C10-C18的不饱和长碳链结构，碳链末端具有羟基、甲酰基、乙酰基等官能团，常见于草螟科、卷蛾科和夜蛾科等蛾类的性信息素成分。类型2的性信息素为C17-C23的烯烃及其环氧衍生物，此类性信息素化学结构相对复杂，多见于尺蠖科、毒蛾科和灯蛾科。类型3的性信息素主要特点是长碳链的中间碳位具有甲基等化学结构，此类化学结构信息素相对较为少见。目前鳞翅目类型2性信息素人工合成方法主要以亚麻酸或亚油酸为底物合成相应的三烯或双烯，然后以所得烯烃氧化而来。由于在三烯或双烯的双键均为随机氧化，因此环氧烯烃产物为等量同分异构混合物，如顺-3,6,9-十八碳三烯氧化后的产物为等量的顺-6,9-环氧-3,4-十八碳二烯、顺-3,9-环氧-6,7-十八碳二烯和顺-3,6-环氧-9,10-十八碳二烯。在性信息素的应用研究中发现，部分鳞翅目昆虫的环氧烯烃同分异构体存在抑制性信息素活性的现象，因此迫切需要开发一种能有效分离制备环氧烯烃同分异构体的方法。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术所要解决的技术问题是提供一种鳞翅目环氧烯烃同分异构体的分离制备方法，本专利技术可有效分离人工合成的C17-C23的环氧烯烃同分异构混合物，具有制备量大、纯度高的特点。为解决上述技术问题，本专利技术提供一种鳞翅目环氧烯烃同分异构体的分离制备方法，包括以下步骤：1）半制备液相色谱的准备：依次连接四源梯度模块、自动进样器、检测器和馏分收集器，安装超纯硅胶正相制备色谱柱，所述超纯硅胶正相制备色谱柱参数为：颗粒度粒径5-10微米、色谱柱直径10-50毫米、色谱柱柱长50-250毫米；2）流动相的配制：分别量取正己烷50-99体积份和四氢呋喃0.25-20体积份，将四氢呋喃加入正己烷中，混合，置于超声波器内超声5分钟；3）将步骤2）中配制的流动相连接入半制备液相色谱，设定半制备液相色谱检测器的检测波长为190-280纳米，流动相流速为0.5-10升/分钟；4）将待分离的鳞翅目环氧烯烃同分异构体混合物样品置于自动进样器内，设置进样量及运行时间，即可在馏分收集器中收集同分异构体馏分。进一步的，所述超纯硅胶正相制备色谱柱参数为：颗粒度粒径10微米、色谱柱直径30-50毫米和色谱柱柱长100-250毫米；所述流动相中正己烷为75-99体积份、四氢呋喃为10-20体积份；所述半制备液相色谱检测器的检测波长为235-280纳米，流动相流速为5-10升/分钟。进一步的，所述超纯硅胶正相制备色谱柱参数为：颗粒度粒径5微米、色谱柱直径10-30毫米和色谱柱柱长50-100毫米；所述流动相中正己烷为50-75体积份、四氢呋喃为0.25-10体积份；所述半制备液相色谱检测器的检测波长为190-235纳米，流动相流速为0.5-5升/分钟。进一步的，所述超纯硅胶正相制备色谱柱参数为：颗粒度粒径5微米、色谱柱直径20-40毫米和色谱柱柱长70-150毫米；所述流动相中正己烷为60-80体积份、四氢呋喃为5-15体积份；所述半制备液相色谱检测器的检测波长为220-250纳米，流动相流速为2-8升/分钟。本专利技术有益效果：本专利技术可提供一种能有效分离，且具备一定剂量规模的鳞翅目环氧烯烃同分异构体。本专利技术以半制备液相色谱为分离仪器，通过选择合适的制备柱和流动相，在特定的流动相流速和波长检测器下对人工合成的C17-C23的环氧烯烃同分异构混合物达到有效分离，相对于以往的其它分离方法，本专利技术具有制备量大、纯度高的特点。纯化后的鳞翅目环氧烯烃可用于制作性信息素诱芯，应用于鳞翅目昆虫的种群监测以及防治，并且无污染、环境友好。此外，本专利技术还可为鳞翅目昆虫性信息素的产业化应用提供技术支持，具有广阔的应用前景。附图说明图1为人工合成灰茶尺蠖性信息素环氧烯烃同分异构体混合物分离图；图2为顺-6,9-环氧-3,4-十八碳二烯的质谱图；图3为顺-3,9-环氧-6,7-十八碳二烯的质谱图；图4为顺-3,6-环氧-9,10-十八碳二烯的质谱图。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步具体说明。本专利技术中所述实施例仅用于说明解释本专利技术而不对本专利技术的范围构成限制。实施例1:一种鳞翅目环氧烯烃同分异构体的分离制备方法，其特征在于包括以下步骤：1）半制备液相色谱的准备：依次连接四源梯度模块、自动进样器、检测器和馏分收集器，安装超纯硅胶正相制备色谱柱，所述超纯硅胶正相制备色谱柱参数为：颗粒度粒径5微米、色谱柱直径10毫米、色谱柱柱长50毫米；2）流动相的配制：分别量取正己烷50体积份和四氢呋喃0.25体积份，将四氢呋喃加入正己烷中，混合，置于超声波器内超声5分钟；3）将步骤2）中配制的流动相连接入半制备液相色谱，设定半制备液相色谱检测器的检测波长为190纳米，流动相流速为0.5升/分钟；4）将待分离的鳞翅目环氧烯烃同分异构体混合物样品置于自动进样器内，设置进样量及运行时间，即可在馏分收集器中收集同分异构体馏分。实施例2：一种鳞翅目环氧烯烃同分异构体的分离制备方法，其特征在于包括以下步骤：1）半制备液相色谱的准备：依次连接四源梯度模块、自动进样器、检测器和馏分收集器，安装超纯硅胶正相制备色谱柱，所述超纯硅胶正相制备色谱柱参数为：颗粒度粒径5微米、色谱柱直径19毫米、色谱柱柱长75毫米；2）流动相的配制：分别量取正己烷60体积份和四氢呋喃5体积份，将四氢呋喃加入正己烷中，混合，置于超声波器内超声5分钟；3）将步骤2）中配制的流动相连接入半制备液相色谱，设定半制备液相色谱检测器的检测波长为200纳米，流动相流速为1升/分钟；4）将待分离的鳞翅目环氧烯烃同分异构体混合物样品置于自动进样器内，设置进样量及运行时间，即可在馏分收集器中收集同分异构体馏分。实施例3：一种鳞翅目环氧烯烃同分异构体的分离制备方法，其特征在于包括以下步骤：1）半制备液相色谱的准备：依次连接四源梯度模块、自动进样器、检测器和馏分收集器，安装超纯硅胶正相制备色谱柱，所述超纯硅胶正相制备色谱柱参数为：颗粒度粒径5微米、色谱柱直径30毫米、色谱柱柱长100毫米；2）流动相的配制：分别量取正己烷75体积份和四氢呋喃10体积份，将四氢呋喃加入正己烷中，混合，置于超声波器内超声5分钟；3）将步骤2）中配制的流动相连接入半制备液相色谱，设定半制备液相色谱检测器的检测波长为215纳米，流动相流速为3升/分钟；4）将待分离的鳞翅目环氧烯烃同分异构体混合物样品置于自动进样器内，设置进样量及运行时间，即可在馏分收集器中收集同分异构体馏分。实施例4一种鳞翅目环氧烯烃同分异构体的分离制备方法，其特征在于包括以下本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鳞翅目环氧烯烃同分异构体的分离制备方法，其特征在于包括以下步骤：1）半制备液相色谱的准备：依次连接四源梯度模块、自动进样器、检测器和馏分收集器，安装超纯硅胶正相制备色谱柱，所述超纯硅胶正相制备色谱柱参数为：颗粒度粒径5‑10微米、色谱柱直径10‑50毫米和色谱柱柱长50‑250毫米；2）流动相的配制：分别量取正己烷50‑99体积份和四氢呋喃0.25‑20体积份，将四氢呋喃加入正己烷中，混合，置于超声波器内超声5分钟；3）将步骤2）中配制的流动相连接入半制备液相色谱，设定半制备液相色谱检测器的检测波长为190‑280纳米，流动相流速为0.5‑10升/分钟；4）将待分离的鳞翅目环氧烯烃同分异构体混合物样品置于自动进样器内，设置进样量及运行时间，即可在馏分收集器中收集同分异构体馏分。

【技术特征摘要】
1.一种鳞翅目环氧烯烃同分异构体的分离制备方法，其特征在于包括以下步骤：1）半制备液相色谱的准备：依次连接四源梯度模块、自动进样器、检测器和馏分收集器，安装超纯硅胶正相制备色谱柱，所述超纯硅胶正相制备色谱柱参数为：颗粒度粒径5-10微米、色谱柱直径10-50毫米和色谱柱柱长50-250毫米；2）流动相的配制：分别量取正己烷50-99体积份和四氢呋喃0.25-20体积份，将四氢呋喃加入正己烷中，混合，置于超声波器内超声5分钟；3）将步骤2）中配制的流动相连接入半制备液相色谱，设定半制备液相色谱检测器的检测波长为190-280纳米，流动相流速为0.5-10升/分钟；4）将待分离的鳞翅目环氧烯烃同分异构体混合物样品置于自动进样器内，设置进样量及运行时间，即可在馏分收集器中收集同分异构体馏分。2.根据权利要求1所述的一种鳞翅目环氧烯烃同分异构体的分离制备方法，其特征在于所述超纯硅胶正相制备色谱柱参数为：颗粒度粒径10微米、色谱柱直径30-50毫米和色...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗宗秀，张新忠，边磊，李兆群，蔡晓明，陈宗懋，
申请(专利权)人：中国农业科学院茶叶研究所，
类型：发明
国别省市：浙江,33