一种制备高纯度紫杉烷类化合物的方法技术

本发明专利技术公开了一种制备高纯度紫杉醇、多西他赛等紫杉烷类化合物的方法，以合成、半合成或从植物中提取的紫杉烷类化合物为原料，用水性溶剂体系溶解原料，采用大孔吸附树脂（如Ｄｉａｉｏｎ　　ＨＰ系列树脂、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ　　ＸＡＤ系列树脂）为固定相，以有机溶剂（如四氢呋喃、Ｎ，Ｎ－二甲基甲酰胺（ＤＭＦ）等）的水溶液为洗脱液，采用常压柱层析方法，一步法提纯得到纯度达９９．９０％以上的高纯度紫杉烷类化合物，且收率高于９９．０％。本方法方法简单，操作方便，有利于放大生产。有机溶剂用量少，且可回收循环使用，有利于保护环境。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种处理紫杉烷类化合物原料的方法。更具体而言，本专利技术涉及利用大孔吸附树脂层析法处理紫杉烷类化合物原料，从而制备高纯度紫杉烷类化合物的方法。
技术介绍
紫杉烷(taxane)类化合物是提取于高等裸子植物红豆杉(Taxusbrevifolia)的树皮、根和叶等部位的一类化合物。在目前已分离到200多种紫杉烷类化合物中，有许多已被证明具有细胞毒性和抗肿瘤活性。 紫杉醇和多西他赛能稳定细胞微管，防止细胞微管解聚，从而防止细胞分裂而抑制癌细胞的生长，因而具有治疗癌症的效果，目前已在临床上广泛应用。 紫杉醇被认为是近三十年来，天然抗癌药物研究领域最重大的发现，目前已成为临床上的首选抗癌药物。美国化学家Wall和Wani等，于1971年首次报道从红豆杉的树皮中分离到紫杉醇，并确认其具有抗癌活性(J.Am.Chem.Soc.，93，2325，1971)。1983年，美国国立癌症研究所(NCI)报告紫杉醇对乳腺癌、结肠癌等实体癌具有抗肿瘤作用。1993年，美国FDA批准将该药用于包括卵巢癌、乳腺癌、非小细胞肺癌及其它癌症在内的常规化疗。 多西他赛，又名多烯紫杉醇，是法国罗纳普朗克乐安公司开发的半合成紫杉醇衍生物，它是第二代紫杉烷类抗肿瘤药物的代表。1996年，该药物获得美国FDA批准，用于治疗乳腺癌和非小细胞肺癌等癌症。多西他赛以其增加的水溶性及优异的抗癌广谱性日益受到人们的关注。 目前，紫杉醇的工业化生产主要有植物提取和化学半合成两种方法。 植物提取是以天然植物红豆杉的树皮为原料，但由于紫杉醇含量极低，天然红豆杉资源极为有限，而且树皮难于再生，这一方法越来越难于满足紫杉醇生产的需要。 化学半合成方法则首先从欧洲红豆杉的针叶中提取高含量的10-去乙酰巴卡亭III(baccatin III)作为原料，再经化学反应制备得到紫杉醇。由于原料资源丰富，因此半合成方法日益成为紫杉醇主要的生产途径。多西他赛则完全是采用半合成方法生产。 在紫杉烷类化合物的生产过程中会产生多种结构相近的衍生物、同系物，这些杂质的存在会对患者的用药安全，乃至生命安全造成潜在的危险。但是，从紫杉烷类化合物中分离杂质，对活性物质进行提纯是很困难的工作。如何改进分离提纯方法，制备高纯度的紫杉烷类化合物，是目前受到普遍重视的课题。 由于紫杉烷类化合物不溶于水，若要提高纯度，常规的手段是采用大型制备液相色谱提纯，上样量很小，并需要用大量的有机溶剂洗脱，造成了一定的环境污染，且提高了生产成本。 目前已揭示的分离方法有硅胶柱层析法、氧化铝柱层析法和结晶等。 陈建民等(CN97109192.7)以紫杉醇粗提物和液溴反应，随后经过正相填充色谱柱分离，再经过两次结晶得到高纯度的紫杉醇。加拿大植原药物公司(CN99815315.X)用丙酮/水沉淀法制备高纯度紫杉醇。刘开录(CN96102442.9)等用多孔多分子填料作固定相的反相液相色谱分离方法制备高纯度的紫杉醇。 然而，这些方法仍然存在以下不足之处1)紫杉醇的纯度不高，均不能达到99.9％以上；2)操作较为复杂；3)需要使用大量的有机溶剂，既污染了环境，又提高了生产成本。 因此本领域迫切需要一种操作简便、成本低廉、对环境污染小的紫杉烷类化合物原料处理方法，以得到高纯度紫杉烷类化合物。
技术实现思路
本专利技术的目的正是针对现有技术的以上缺点，提供一种处理紫杉烷类化合物原料以得到高纯度紫杉烷类化合物的方法。 在本专利技术的第一方面，提供了一种方法，所述方法包括如下步骤 a)将紫杉烷类化合物原料溶于含水互溶性溶剂和水的混合溶剂体系A中形成溶液，其中所述的混合溶剂体系A中水互溶性溶剂与水的体积比为5∶95～60∶40； b)以大孔吸附树脂为固定相，对步骤a)所得的溶液进行层析，用含有机溶剂和水的洗脱溶剂体系B进行洗脱； c)收集含有紫杉烷类化合物的洗脱部分；和 d)去除溶剂，分离得到紫杉烷类化合物。 在本专利技术方法的一个实施方式中，所述紫杉烷类化合物是紫杉醇、多西他赛或它们的衍生物、或其组合。 在本专利技术方法的另一实施方式中，所述原料是提取自植物的紫杉烷类化合物、以合成法或半合成法制得的紫杉烷类化合物。 在本专利技术的一个优选例中，所述原料中紫杉烷类化合物的纯度为80.0～99.5wt％，优选90.0～99.5wt％，最优选为99.5wt％。 在本专利技术的另一优选例中，所述紫杉烷类化合物原料与溶剂体系A的混合比为2～50克原料/升溶剂体系A，优选3～30克原料/升溶剂体系A，更优选5～10克原料/升溶剂体系A。 在本专利技术方法的另一实施方式中，溶剂体系A中所述的水互溶性溶剂选自醇、酮、四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺或其组合。 在本专利技术的一个优选例中，所述醇选自甲醇、乙醇、异丙醇或丁醇，优选乙醇。 在本专利技术的另一优选例中，所述酮选自丙酮、丁酮或甲基乙基酮。 在本专利技术的另一优选例中，步骤a)中所述的混合溶剂体系中水互溶性溶剂与水的体积比优选为8∶92～50∶50，更优选10∶90～15∶85。 在本专利技术方法的另一实施方式中，所述大孔吸附树脂选自Diaion HP系列大孔吸附树脂、Amberlite XAD系列大孔吸附树脂、Duolite PSP、DuoliteS-30、Lewapol G-7318、SP-1/2、GDX系列大孔吸附树脂，优选Diaion HP系列大孔吸附树脂或Amberlite XAD系列大孔吸附树脂。 在本专利技术的一个优选例中，紫杉烷类化合物原料与大孔吸附树脂的用量为2-80克紫杉烷类化合物/升大孔吸附树脂，优选5-40克紫杉烷类化合物/升大孔吸附树脂，最优选10～15克紫杉烷类化合物/升大孔吸附树脂(柱体积)。 在本专利技术方法的另一实施方式中，步骤b)洗脱溶剂体系B中的所述有机溶剂为与水互溶的有机溶剂。 在本专利技术的一个优选例中，洗脱溶剂体系B中的所述有机溶剂选自醇、酮、四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、或它们的组合。 在本专利技术的一个优选例中，所述醇选自甲醇、乙醇、异丙醇或丁醇，优选乙醇。 在本专利技术的另一优选例中，所述酮选自丙酮、丁酮或甲基乙基酮。 在本专利技术的另一优选例中，洗脱溶剂体系B中的所述有机溶剂与步骤a)混合溶剂体系A中所用的水互溶性溶剂相同，并且在洗脱溶剂体系B中有机溶剂的浓度与混合溶剂体系A中水互溶性溶剂的浓度之比≥1.3，更佳地该比值为1.5-5.0。 在本专利技术的另一优选例中，步骤b)洗脱溶剂体系中的所述有机溶剂与水的体积比为10∶90～70∶30，优选为20∶80～50∶50，更优选30∶70～40∶60。 在本专利技术方法的另一实施方式中，在步骤d)中包括浓缩干燥所得的紫杉烷类化合物。 在本专利技术的一个优选例中，所述方法还包括将步骤d)所得的紫杉烷类化合物作为原料，重复步骤a)～d)一次或多次，从而制得纯度大于或等于99.9％的紫杉烷类化合物。 在本专利技术方法的另一实施方式中，所述方法还包括步骤 e)将步骤d)所得的紫杉烷类化合物与药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂混合，从而制得药物组合物。 在本专利技术的第二方面中，提供了一种纯度高于或等于99.90％的紫杉烷类化合物，所述的紫杉烷类化合物是用前述方法中的任一种制备的。 在本专利技术的第三方面中，提供了一种药物组合物，它包含采本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种方法，所述方法包括如下步骤：ａ）将紫杉烷类化合物原料溶于含水互溶性溶剂和水的混合溶剂体系Ａ中，形成溶液，其中所述的混合溶剂体系Ａ中水互溶性溶剂与水的体积比为５∶９５～６０∶４０；ｂ）以大孔吸附树脂为固定相，对步骤ａ）所得的溶液进行层析，用含有机溶剂和水的洗脱溶剂体系Ｂ进行洗脱；ｃ）收集含有紫杉烷类化合物的洗脱部分；和ｄ）去除溶剂，分离得到紫杉烷类化合物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：季晓铭，姚勇，李严，卓忠浩，郑云满，
申请(专利权)人：上海天伟生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]