ｄ－生物素的纯化方法，其步骤如下：１）用低级烷基醇与冰乙酸的混合溶剂重结晶提纯含杂质的ｄ－生物素，除去杂质双苄基生物素和单苄基生物素；２）若前一步骤所得产物的旋光度不合格，在水与低级烷基醇中，投入手性诱导拆分剂ｌ－精氨酸和旋光度不合格的ｄ－生物素，搅拌溶解后，冷冻结晶、过滤，除去杂质ｌ－生物素，然后在加热条件下，用水或低级烷基醇溶解所得的滤饼，用稀酸调ＰＨ值到２－５，冷冻结晶、过滤，滤饼为ｄ－生物素纯品。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种。
技术介绍
d-生物素是一种环状结构的化学物质，具有硫酚(Thiophene)的结构环， 此种化学物质有八种同形异构体，但也只有右旋生物素(d-biotin)是存在于自 然界中，也才有维生素的功能，d-生物素具有活性，无嗅无味，无色至近无色 结晶性粉末。25。C时的溶解度(mg/100ml):水-22; 95%乙醇-80,几乎不溶 于醚及三氯甲垸，较易溶于热水和稀碱液，不溶于其它常用有机溶剂。d-生物 素在强酸、强碱、甲醛及紫外线处理后才会被破坏。特别遇强碱或氧化剂则 分解明显。熔点为228 232。C (分解)，比旋光度问025 +89° +93°。在化学合成d-生物素中存在着双苄基生物素D":26.8(c^ .O，MeOH)、 单节基生物素问025=+108.1(0=1.0,0.州NaOH)、 二氨基生物素以及d-生物素 的对映体1-生物素问025=-89° -93°，这些杂质的存在影响着生物素的质量和 活性。特别是l-生物素的存在使得产品不合格，并且无法单纯依靠重结晶等处 理方法而得到合格产品，造成了极大的资源浪费。在后处理提纯生物素的现有方法中， 一般采用氯仿等提取双苄基生物素 与单苄基生物素等杂质，在沸水中活性炭脱色重结晶，冷却到0°C，过滤析出 固体所得。由于杂质的多样性，氯仿提取不完全，无法去除l-生物素，且由于 含单苄基生物素的d-生物素的旋光度与少量的l-生物素的旋光度相抵消，可 能会导致产品旋光度合格的假象，从而生产出不合格的d-生物素产品。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是克服上述现有技术存在的缺陷，提供一种 不但可以提纯粗品生物素、而且能够有效去除l-生物素的d-生物素纯化方法， 为药用d-生物素的质量提供了保证。为此，本专利技术采用如下的技术方案，其步骤如下: 1)用低级垸基醇与冰乙酸的混合溶剂重结晶提纯含杂质的d-生物素，除去杂质双苄基生物素和单苄基生物素；2)若前一步骤所得产物的旋光度不合格， 在水与低级烷基醇中，投入手性诱导拆分剂1-精氨酸和旋光度不合格的d-生 物素，搅拌溶解后，冷冻结晶、过滤，除去杂质l-生物素，然后在加热条件下，用水或低级烷基醇溶解所得的滤饼，用稀酸调ra值到2-5，冷冻结晶、过滤，滤饼为d-生物素纯品。本专利技术先提纯粗品生物素，除去双苄基生物素 与单苄基生物素等杂质；然后与手性诱导拆分剂反应，利用冷冻状态下d-生 物素精氨酸盐不溶于低级烷基醇、而1-生物素精氨酸盐溶于低级烷基醇的特 性，使d-生物素以固体的方式析出，而1-生物素留在滤液中，从而有效地去 除l-生物素，保证了药用d-生物素的质量。所述的，所述的低级垸基醇为甲醇、乙醇、丙醇或 异丙醇。所述的，最后所得的滤液用碱液调PH值为10-11， 然后浓縮析出l-精氨酸，使其可以重复回收使用。所述的，第一次冷冻结晶的时间为6-10小时， 一般 采用静止过夜。本专利技术具有以下有益效果不但可以提纯粗品生物素，而且能够有效去除l-生物素，生产出合格的d-生物素产品，保证了药用d-生物素的质量；I-精氨酸可以重复回收使用，降低了生产成本。具体实施例方式实施例1生物素粗品30g(HPLC检测含有5%的双苄基生物素，7%单苄基生物素， 85%生物素。U〕 D25=79.5°(c=1.0， 0. 1NNaOH))， 95%药用乙醇800ml，冰 乙酸30ml升温回流，完全溶解后，趁热投入活性碳1.5g，搅拌0.5小时，过 滤，滤饼用95。/。药用乙醇100ml洗涤，滤液冷冻过夜，析出白色针状结晶， 过滤真空8CTC烘干得25g d-生物素(HPLC生物素含量高达98%， 〔 a 〕 D25=83.2°(c=1.0， 0. 1NNaOH))， d-生物素因为旋光度的问题为不合格产品。实施例2取实施例1制备的生物素25g(0.102mo1)， 20g(0.115mol)l-精氨酸，去离 子水150ml，异丙醇300ml，搅拌缓慢升温到8CTC，得到澄清无色液体，保 温1小时后，先用水浴，再冰水缓慢降温至O'C，静置恒温0'C过夜，析出生 物素精氨酸盐，过滤滤饼用50ml无水乙醇漂洗两次，烘干得41g(0.098mo1)，加入1000mL80。/。药用乙醇溶解，水浴加热到8CTC，滴加17.5%盐酸，测PH 约为3，继续升温回流，加入活性碳1.0g，过滤，滤液冷冻结晶，析出d-生 物素23.2g， 93.2%的收率，HPLC检测含量为99.5% (〔 a 〕 D25=90. 4°(c=l. 0， 0. IN NaOH) )o实施例3生物素粗品40g(HPLC检测含有2%的双苄基生物素,5%单苄基生物素， 88%生物素〔a〕 D25=75°(c=1.0， 0. lNNaOH))， 95。/。药用乙醇600ml，冰乙 酸80ml升温回流，完全溶解后，趁热投入活性碳2g，搅拌0.5小时，过滤， 滤饼用95。/。药用乙醇100ml洗涤，滤液冷冻过夜，析出白色针状结晶。过滤 真空8CTC烘干得35g生物素(HPLC生物素含量高达98.8%, 〔 a 〕 D25=80.6。(c=1.0， 0. 1NNaOH)，小于标准问025 +89° +93°(c=1.0， 0. IN NaOH))。实施例4取实施例3制备的生物素15g(0.061mo1)， 12.7g(0.073mol)l-精氨酸，去 离子水100ml，异丙醇200ml，搅拌缓慢升温到6CTC，得到澄清无色液体， 保温1小时后，用水浴，再冰水缓慢降温至0'C，静置恒温0'C过夜，析出生 物素精氨酸盐，过滤滤饼用50ml无水乙醇漂洗两次，烘干得23g(0.055mo1)， 加入500ml去离子水加热溶解到100°C，滴加17.5%盐酸，测PH约为4， 继续升温回流，加入活性碳1.0g，过滤，滤液冷冻结晶，析出d-生物素12.6g， 84.7%的收率,HPLC检测含量为99.5。/。， (a〕 。25二89. 8 (c=l. 0, 0. 1NNaOH)。实施例5取实施例3制备的生物素15g(0.061mo1)， 13.8g(0.079mol)l-精氨酸，去 离子水100ml，异丙醇200ml，搅拌缓慢升温到70C，得到澄清无色液体，保温1小时后，用水浴，再冰水缓慢降温至or，静置恒温ot:过夜，析出生物素精氨酸盐，过滤滤饼用50ml无水乙醇漂洗两次，烘干得23.5g(0.056mo1)， 加入500ml70X药用酒精溶解，水浴加热到80C，滴加30%稀硫酸调PH约 为2，继续升温回流，加入活性碳1.0g，过滤，滤液冷冻结晶，析出d-生物 素13.1g， 88%的收率，HPLC检测含量为99.6%， 〔 a 〕 。25二91. 5 (c=l. 0, 0. 1N NaOH。实施例6取实施例5得到的含拆分剂的滤液，浓縮异丙醇与水至干，加入100ml去离子水溶解，加热到80'C，滴加50X稀硫酸调PH约为2，继续升温回流， 加入活性碳0.5g，过滤，滤液冷冻结晶，析出l-生物素1.1g， 7.4%的收率， HPLC检测含量为96%， (ct〕 D25=-85. 5 (c=1.0， 0. IN NaOH)。滤液与d-生物 素的结晶母液合并，用5y。氢氧化钠调本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：陈建辉，王红卫，丁建清，
申请(专利权)人：浙江医药股份有限公司新昌制药厂，
类型：发明
国别省市：
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