一组配对的天然β-胡萝卜素高产菌株及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一组配对的天然β‑胡萝卜素高产菌株及其制备方法和应用。目前，关于三孢布拉霉合成β‑胡萝卜素的化学促进剂种类和工艺控制方法繁多，但是这些方法往往存在诸多缺陷，离工业化尚有差距。本发明专利技术经原生质体紫外诱变并结合化学诱变技术选育，通过在平板上筛选耐高浓度植物油和抗β‑紫罗兰酮的抗性突变株，并在摇瓶上进行(+)、(‑)株配对初筛、复筛验证，最终获得高产菌株。本发明专利技术获得的高产菌株在工业生产规模发酵罐上进行溶氧、pH值及植物油和β‑紫罗兰酮的流加控制，产量可达8.42g·L

【技术实现步骤摘要】
一组配对的天然β-胡萝卜素高产菌株及其制备方法和应用
本专利技术涉及微生物发酵
，具体地说是一组配对的天然β-胡萝卜素高产菌株及其制备方法和应用。
技术介绍
类胡萝卜素(carotenoids)是某些植物、藻类、细菌和真菌等生物合成的异戊二烯类天然色素，根据是否含有氧原子可划分为：(1)纯碳氢化合物的胡萝卜素族(carotenes)，如α-胡萝卜素、β-胡萝卜素、γ-胡萝卜素和番茄红素等；(2)含有氧原子的叶黄素族(xanthophylls)，如虾青素、玉米黄质、叶黄素和辣椒红素等。类胡萝卜素具有优越的抗氧化性和着色性，上述2点重要的特性赋予它们在医药、食品、保健品及化妆品等领域的广泛应用。β-胡萝卜素，也称为维生素A原，是目前已知的600多种类胡萝卜素的重要一员，具有抗炎、解毒、抗癌、预防心血管疾病、防治白内障和保护肝脏等多方面的医学和生物学功能，呈现巨大的商业价值。最近的市场调研显示，2015年β-胡萝卜素市场总额为4.36亿美元，2017年市场需求量为371.56吨，预计到2022年底将达到5.72亿美元，复合年增长率为3.本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一组配对的天然β-胡萝卜素高产菌株，其特征在于，其生物分类学上属于三孢布拉霉Blakeslea trispora，为异宗接合菌，包括三孢布拉霉(+)和三孢布拉霉(-)两株单性菌株，其正株保藏号为CGMCC No.16491，负株保藏号为CGMCC No.16492。/n

【技术特征摘要】
1.一组配对的天然β-胡萝卜素高产菌株，其特征在于，其生物分类学上属于三孢布拉霉Blakesleatrispora，为异宗接合菌，包括三孢布拉霉(+)和三孢布拉霉(-)两株单性菌株，其正株保藏号为CGMCCNo.16491，负株保藏号为CGMCCNo.16492。


2.权利要求1所述天然β-胡萝卜素高产菌株的制备方法，其特征在于，以三孢布拉霉(+)株Xβ-15-02正-03和三孢布拉霉(-)株Xβ-15-04负-03为出发菌株，用物理和/或化学诱变选育的方法，以植物油和β-紫罗兰酮作为筛选压力，获得高产菌株。


3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的诱变选育孢子浓度为104～108个/mL。


4.权利要求1-3任一项所述高产菌株在商业化制备天然β-胡萝卜素发酵液的应用，其特征在于，包括如下步骤：
a.发酵罐培养：高产菌株三孢布拉霉(+)株和(-)株的种子液接种到含有碳源、氮源、无机盐、抗氧化剂和营养素的培养基中，经搅拌通气培养3天以上；
b.发酵过程中用酸和/或碱溶液控制pH值为5.5～7.5，同时，连续流加β-紫罗兰酮植物油混合液。


5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤a中，三孢布拉霉(+)株和(-)株的种子液配对比例为1:3～1:200；种子液按5～15％v/v比例移种发酵罐。


6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤a中，发酵培养温度为22～32℃；压缩空气通气比为0.2～2.5vvm；商业生产规模搅拌转速15～250rpm，罐压为0.01...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈克杰，陈迎迎，刘燕，周旭燕，孙新强，
申请(专利权)人：浙江医药股份有限公司新昌制药厂，
类型：发明
国别省市：浙江;33