一种检测生物素含量的方法技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，具体公开了一种检测生物素含量的方法。本发明专利技术所述方法包括：步骤１、将ＡＳ１．２９９于种子培养基中培养后去除种子培养基，稀释得ＡＳ１．２９９菌液；步骤２、分别向体积相同的各检测培养基中添加梯度含量生物素及相同体积的ＡＳ１．２９９菌液定容后培养，然后根据ＯＤ６２０值绘制标准曲线，得出线性方程；步骤３、取待测原料和ＡＳ１．２９９菌液添加至步骤２所述检测培养基中定容后培养，然后检测ＯＤ６２０值，通过所述线性方程计算得到待测原料的生物素含量。本发明专利技术所述方法能有效消除培养基、接种量以及原料组分造成的影响，提高微生物法检测生物素含量的精确度，可广泛应用于实际生产。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种检测生物素含量的方法，其特征在于，包括：步骤１、ＡＳ１．２９９菌株于种子培养基培养后去除种子培养基，稀释后制得ＡＳ１．２９９菌液，所述种子培养基包含５％的葡萄糖、０．８％的尿素、３％玉米浆、０．１４％Ｋ↓［２］ＨＰＯ↓［４］、０．０６％ＭｇＳＯ↓［４］、２μｇ／ｍＬ　ＭｎＳＯ↓［４］、２μｇ／ｍＬ　ＦｅＳＯ↓［４］；步骤２、分别向体积相同的各检测培养基中添加梯度含量生物素溶液以及相同体积的ＡＳ１．２９９菌液，定容后培养，然后根据ＯＤ↓［６２０］值绘制标准曲线，得出线性方程，所述检测培养基包含５％的葡萄糖、０．８％的尿素、１６ｍｇ／１００ｍＬ的天冬氨酸、８ｍｇ／１００ｍＬ的丝氨酸、１６ｍｇ／１００ｍＬ的甘氨酸、１０ｍｇ／１００ｍＬ的苏氨酸、１０ｍｇ／１００ｍＬ的丙氨酸、１４ｍｇ／１００ｍＬ的精氨酸、４ｍｇ／１００ｍＬ的酪氨酸、７ｍｇ／１００ｍＬ的缬氨酸、３ｍｇ／１００ｍＬ的甲硫氨酸、１０ｍｇ／１００ｍＬ的苯丙氨酸、７ｍｇ／１００ｍＬ的异亮氨酸、１６ｍｇ／１００ｍＬ的亮氨酸、１９ｍｇ／１００ｍＬ的赖氨酸、２ｍｇ／１００ｍＬ的脯氨酸、２０μｇ／Ｌ的Ｖｂ↓［１］、０．１４％Ｋ↓［２］ＨＰＯ↓［４］、０．０６％ＭｇＳＯ↓［４］、２μｇ／ｍＬＭｎＳＯ↓［４］和２μｇ／ｍＬ　ＦｅＳＯ↓［４］；步骤３、取待测原料和ＡＳ１．２９９菌液添加至步骤２所述检测培养基中定容后培养，然后检测ＯＤ↓［６２０］值，通过所述线性方程计算得到待测原料的生物素含量，所述ＡＳ１．２９９菌液的体积、检测培养基的体积、定容的体积和培养的时间与步骤２所述ＡＳ１．２９９菌液的体积、检测培养基的体积、定容的体积和培养的时间一致。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘康乐，杜文鹏，龚华，
申请(专利权)人：五洲明珠股份有限公司，
类型：发明
国别省市：54[中国|西藏]