贴膏剂中辣椒素含量的检测方法技术

本发明专利技术涉及化学物质含量检测技术，特别涉及一种辣椒素的检测方法。本发明专利技术的目的在于提供一种操作简便、专属性强、重现性好、准确度高的贴膏剂中辣椒素含量的检测方法。该检测方法以体积比为1：1的甲醇‑四氢呋喃混合溶剂溶解贴膏中的辣椒素，采用高效液相色谱法测定辣椒素含量，高效液相色谱条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比为46：54的乙腈‑0.1％磷酸溶液为流动相，检测波长为205nm。该检测方法专属性强、重复性好，样品平行测试的RSD仅为1.58％；线性良好，辣椒素在10μg/ml‑100μg/ml之间与峰面积呈良好的线性关系；回收率高，即准确度高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及化学物质含量检测技术，特别涉及一种辣椒素的检测方法。
技术介绍
目前市场上的贴膏品种繁多，贴膏的药效成分中大多含有辣椒素，辣椒素具有消炎、止痛、治疗肌肉酸痛等作用，其含量高低对贴膏药效会产生直接影响。但是目前没有专门针对贴膏中辣椒素含量的检测方法，因而无法建立辣椒素含量与药效之间的对应关系，也无法评价生产过程中辣椒素在贴膏中含量分布的均匀性。因此建立一种适于企业使用的操作简便、重现性好、准确度高的贴膏中辣椒素含量的检测方法，不仅有助于企业进行生产工艺及成品质量控制，也为辣椒素含量与贴膏药效之间对应关系的建立提供高可靠性的检测基础。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足，提供一种操作简便、专属性强、重现性好、准确度高的贴膏剂中辣椒素含量的检测方法。为了达到上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：一种贴膏剂中辣椒素含量的检测方法，包括如下步骤：1、制备供试品溶液：将含辣椒素的贴膏剪成窄条，除去盖衬，置于具塞锥形瓶中，精密加入体积比为1：1的甲醇-四氢呋喃混合溶剂，，密塞，称定重量，加热回流提取2小时，放冷，再称定重量，用体积比为1：1的甲醇-四氢呋喃混合溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，即得供试品溶液；2、制备对照品溶液：取辣椒素，精密称定，加入体积比为1：1的甲醇-四氢呋喃混合溶剂制成对照品溶液；3、采用高效液相色谱法测定供试品溶液中的辣椒素含量：高效液相色谱法测定条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比为46：54的乙腈-0.1％磷酸溶液为流动相，检测波长为205nm；分别精密吸取一定量的对照品溶液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，测量对照品溶液和供试品溶液中辣椒素成分的峰面积或峰高，按下式计算含量：Cx＝Cr(Ax/Ar),其中Cx为供试品浓度、Cr为对照品浓度、Ax为供试品峰面积或峰高、Ar为对照品的峰面积或峰高。作为优选，步骤1中每100cm2贴膏加入100ml的甲醇-四氢呋喃混合溶剂。作为优选，步骤2中制成每1ml含辣椒素50μg的对照品溶液。本专利技术贴膏剂中辣椒素含量的检测方法具有如下有益效果：1、该检测方法专属性强；2、重复性好，样品平行测试的RSD仅为1.58％；3、线性良好，辣椒素在在10μg/ml-100μg/ml之间与峰面积呈良好的线性关系，相关系数R为0.9997；4、回收率高，即准确度高；5、辣椒素溶液稳定性好，室温条件下24小时内测定基本稳定。具体实施方式实施例1、制备供试品溶液：取三批不同批号的辣椒素贴膏各3份，每份100cm2，剪成窄条，除去盖衬，置于具塞锥形瓶中，精密加入体积比为1：1的甲醇-四氢呋喃混合溶剂100ml，密塞，称定重量，加热回流提取2小时，放冷，再称定重量，用体积比为1：1的甲醇-四氢呋喃混合溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，即得供试品溶液；2、制备对照品溶液：取辣椒素适量，精密称定，加入体积比为1：1的甲醇-四氢呋喃混合溶剂制成每1ml含辣椒素50μg的对照品溶液；3、采用高效液相色谱法测定供试品溶液中的辣椒素含量：高效液相色谱法测定条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比为46：54的乙腈-0.1％磷酸溶液为流动相，检测波长为205nm；分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，测量对照品溶液和供试品溶液中辣椒素成分的峰面积或峰高，按下式计算含量：Cx＝Cr(Ax/Ar),其中Cx为供试品浓度、Cr为对照品浓度、Ax为供试品峰面积或峰高、Ar为对照品的峰面积或峰高。测定结果如表1：表1含量测定结果批号辣椒素(mg/100cm2)RSD(％)1508013.930.601508023.731.271508033.730.65对比试验1、分别制备两种供试品溶液各两份：①取贴膏100cm2,剪成窄条，除去盖衬，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇100ml，密塞，称定重量，加热回流提取2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。②取贴膏100cm2,剪成窄条，除去盖衬，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-四氢呋喃(1：1)100ml，密塞，称定重量，加热回流提取2小时，放冷，再称定重量，用甲醇-四氢呋喃(1：1)补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。2、分别制备两种对照品溶液各两份：①取辣椒素适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含辣椒素50ug的溶液，即得。②取辣椒素适量，精密称定，加甲醇-四氢呋喃(1：1)制成每1ml含辣椒素50ug的溶液，即得。3、在两种色谱条件下进行测定：①以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂、以甲醇-水(50：50)为流动相、检测波长为280nm，柱温40℃。②以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂、以乙腈-0.1％磷酸溶液(46：54)为流动相、检测波长为205nm。以上述两种色谱条件分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10ul，注入高效液相色谱仪，测定，计算。检测结果：甲醇为溶剂，色谱条件①时辣椒素对照品峰的保留时间为47.920min,甲醇-四氢呋喃(1：1)为溶剂，色谱条件①时辣椒素对照品峰的保留时间为49.347min；甲醇为溶剂，色谱条件②时辣椒素对照品峰的保留时间为13.510min,甲醇-四氢呋喃(1：1)为溶剂，色谱条件②时辣椒素对照品峰的保留时间为12.988min。理论板数、分离度、峰面积和响应值的检测结果如表2、表3。表2：色谱条件①检测结果表3：色谱条件②检测结果结论：由上述检测结果可以判断理论板数和分离度均达到要求，其中以色谱条件②，提取溶剂为甲醇-四氢呋喃(1：1)的响应值最好。方法验证试验1、专属性取不含辣椒素的空白供试品贴膏100cm2,照本专利技术步骤1的供试品溶液制备方法以甲醇-四氢呋喃(1：1)为溶剂，制备阴性供试液，照本专利技术步骤3的色谱条件取10μl注入液相色谱仪；另取含辣椒素供试品进行同法操作。结果显示空白供试品在11-15min保留时间未见峰，供试品在12.387min保留时间有相应的色谱峰，其理论板数为8679，分离度为3.70。说明该方法对辣椒素的检测具有较好的专属性。2、检测限照本专利技术步骤3的色谱条件，取空白甲醇-四氢呋喃(1：1)溶剂10μl注入液相色谱仪，共进样3针，在保留时间11-13min查看基线噪声，基线噪声为3.543mAU。取辣椒素适量，精密称定，加甲醇-四氢呋喃(1：1)制成每1ml含辣椒素50ug的溶液，依次稀释成1μg/ml，2μg/ml，3μg/ml三种浓度的溶液，检测响应值，结果见表4。表4检测限试验结果辣椒素溶液浓度(μg/ml)检测值(峰高mAU)信噪比12.9460.8:128.0822:1310.3823:1确定信躁比3：1时的浓度为检测限，结果表明辣椒素浓度3μg/ml为检测限。3、重复性试验取同一批号辣椒贴膏6份，每份100cm2，照本专利技术步骤1的方法进行处理，采用步骤3的色谱条件进行测定，相应峰面积结果见表5。表5重复性试验结果编号123456平均RSD辣椒素50.100651.265150.289850.152252.233650.540250.76361.58％标准偏差RSD＜2.0％，该方法重复性好。4、线性取辣椒素适量，精密称定，加甲醇-四本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种贴膏剂中辣椒素含量的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)制备供试品溶液：将含辣椒素的贴膏剪成窄条，除去盖衬，置于具塞锥形瓶中，精密加入体积比为1：1的甲醇‑四氢呋喃混合溶剂，，密塞，称定重量，加热回流提取2小时，放冷，再称定重量，用体积比为1：1的甲醇‑四氢呋喃混合溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，即得供试品溶液；(2)制备对照品溶液：取辣椒素，精密称定，加入体积比为1：1的甲醇‑四氢呋喃混合溶剂制成对照品溶液；(3)采用高效液相色谱法测定供试品溶液中的辣椒素含量：高效液相色谱法测定条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比为46：54的乙腈‑0.1％磷酸溶液为流动相，检测波长为205nm；分别精密吸取一定量的对照品溶液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，测量对照品溶液和供试品溶液中辣椒素成分的峰面积或峰高，按下式计算含量：Cx＝Cr(Ax/Ar),其中Cx为供试品浓度、Cr为对照品浓度、Ax为供试品峰面积或峰高、Ar为对照品的峰面积或峰高。

【技术特征摘要】
1.一种贴膏剂中辣椒素含量的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)制备供试品溶液：将含辣椒素的贴膏剪成窄条，除去盖衬，置于具塞锥形瓶中，精密加入体积比为1：1的甲醇-四氢呋喃混合溶剂，，密塞，称定重量，加热回流提取2小时，放冷，再称定重量，用体积比为1：1的甲醇-四氢呋喃混合溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，即得供试品溶液；(2)制备对照品溶液：取辣椒素，精密称定，加入体积比为1：1的甲醇-四氢呋喃混合溶剂制成对照品溶液；(3)采用高效液相色谱法测定供试品溶液中的辣椒素含量：高效液相色谱法测定条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比为46：54的乙腈-0....

【专利技术属性】
技术研发人员：张利华，徐建峰，
申请(专利权)人：浙江鼎泰药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33