本发明专利技术涉及一个由所述式（１）表示新的咔唑类生物碱，还涉及其制备方法和应用。其特征是将二叉黑角珊瑚（Ａｎｔｉｐａｔｈｅｓ ｄｉｃｈｏｔｃｍａ（Ｐａｌｌａｓ））有机溶剂粗提取物悬浮于水后用乙酸乙酯或氯仿萃取，收集乙酸乙酯层或氯仿层进行常压硅胶柱层析，用薄层层析追踪合并，并用体积比９∶１的氯仿－丙酮溶剂系统洗脱，收集Ｒ↓［ｆ］值约为０．５～０．７，且在紫光灯波长２５４ｎｍ下有紫外吸收的组分，得到粗产物，进一步提纯得到纯品。本发明专利技术的咔唑类生物碱可用于制备治疗胃癌，肝癌和抗单纯疱疹病毒的药物中，其对人胃腺癌细胞株ＳＧＣ－７９０１和人肝癌细胞Ｈｅｐ Ｇ２的半数抑制率ＩＣ５０分别为６７．３８μｇ／ｍＬ和７３．６５μｇ／ｍＬ；抗单纯疱疹ＨＳＶ－Ⅰ病毒的ＩＣ５０值为３０．６８μｇ／ｍＬ。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一个新的生物碱，具体来说是涉及一个由下述式(1)表示的新的咔唑类生物 碱，另外还涉及这种生物碱的制备方法以及其在抑制癌细胞生长和抗病毒方面的应用。二叉黑角珊瑚U/^'/at力asc/ic力"c鹏(Pallas))药名海铁树，铁树，《中华本草》记 载它有清热，收涩，软坚的功效，主治食粘膜损伤，血痢，盗汗瘰疬，骨哽等。但是目前国 内外还没有关于二叉黑角珊瑚的研究报道，只有国外的两篇关于从该属的另一种黑角珊瑚 "77"pat/;es仰4w'/Ma&)中分离出9个新的多羟基留醇的研究报道( Aiello A, Fattorusso E， Menna M. Steroids, 1991, 56 (10): 513—517. Aiello A, Fattorusso E, Menna M. J Nat Prod, 1992, 55 (3〉 321-325.)。本专利技术的目的在于从二叉黑角珊瑚中分离出一个新的咔唑类生物碱，另一个目的是提供 该咔唑类生物碱的制备方法，进一步的目的是提供该咔唑类生物碱在制备抗癌药物和抗病毒 药物中的应用。我们利用常压柱层析，从南海二叉黑角珊瑚中分离得到一个新的咔唑类生物碱，该咔唑 类生物碱对人胃腺癌细胞株SGC-7901和人肝癌细胞(ttep_G2)的生长有较好抑制作用，也 具有较强的抗单纯疱疹病毒HSV- I病毒活性，从而实现了本专利技术的目的。本专利技术的咔唑类生物碱，其结构由式(1)表示-本专利技术的咔唑类生物碱的制备方法，其特征包括以下的步骤-(1) 将二叉黑角珊瑚用有机溶剂提取，得到的提取液浓缩得到粗提取物；(2) 将步骤(1)得到的粗提取物悬浮于水，用乙酸乙酯或氯仿萃取，收集乙酸乙酯层
技术介绍
技术实现思路
<formula>complex formula see original document page 3</formula>式(1)或氯仿层；(3)将上述乙酸乙酯层或氯仿层进行常压硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯、石油醚-丙酮、氯仿-乙酸乙酯或氯仿-丙酮溶剂系统为洗脱剂，从体积比10:0到0:10变化进行梯度 洗脱，用薄层层析追踪合并，得到的组分在薄层层析上用体积比9:1的氯仿-丙酮溶剂系统从 体积比10:1到9:1变化进行冲洗，收集尼值为0.5 0.7，且在紫光灯波长254nm下有紫外吸 收的组分，得到粗产物，纯化得到由式(1)表示的化合物。步骤(l)所述的有机溶剂可以是甲醇、乙醇、二氯甲垸、甲醇和二氯甲烷的混合物或者 乙醇和二氯甲烷的混合物等。步骤(2)所述的乙酸乙酯或氯仿的萃取次数可以是3 4次。 步骤(3)所述的粗产物纯化可以采用常用的方法如重结晶或柱层析分离等。 本专利技术的咔唑类生物碱为淡黄色无定形粉末，通过碘化铋钾试剂显色(呈含氮化合物的 显色反应)为阳性反应，从NMR和HRESIMS谱推出其分子式为C16H13N302， UV (MeOH)显示在 波长220, 240， 264, 301, 336， 348 nm处有强吸收。在13C (DEPT) NMR谱中可以观察到 16个碳信号，包括2个甲基(S c: 28. 4， 30. 9)、 6个低场区的芳环次甲基(S c: 104. 7、 110. 1， 111.9， 119.5， 122.0， 128. 4)、 8个季碳(Sc: 114.4， 122.8， 129,7， 133.9， 136.8， 143.5， 151. 0, 162. 6)。'醒R i普显示有2个单峰甲基质子信号(S H: 3. 57， 3. 66)，结合13CNMR谱 提示应是与N相连的甲基；另外力丽R谱低场区显示有一个属于AA' BB'系统的4个芳香质 子SH7.35 (1H， t， /= 7.5Hz) 、 7.60 (1H， t， /= 7.5Hz) 、 7.66 (1H， d， /= 7.5Hz)、 8.42 (1H， d, /= 7.5Hz)、两个芳香环单质子SH8. 14 (1H， s) 、 8.66 (1H, s)、以及 一个低场活泼质子& 12.73 (1H， s)。通过以上数据初步推测该化合物是1，3-二取代-咔唑类生物碱。这个推测得到二维核磁共振HMBC实验的论证。 在HMBC i普中，H-4 ( S H 8. 14) /H-5 ( S 7. 66) /H-6 ( S H 7. 35)和C_5a ( 5 c 122. 8)相关，H-7 (6 H 7. 60) /H-8 ( S H 8. 42)和C-8a ( S c 143. 5)相关，H-2 ( S H 8. 66)和C-4 ( S c 104. 7) /C_la (Sc 136.8)相关，NH (SH 12.73)和C-8 (Sc 111. 9)/C-8a/C-la/C-1 ( S c 129.7)相关。 此外，HMBC谱也显示H-2和C-4 /C-3 ( S c 133. 9)/C-10 ( S c 162. 6)相关'Me-15 ( S H 3. 57) 和C-10/C-12 (Sc 151.0)相关，Me-14 ( 5 H 3. 66)和C-3/C-12相关，这表明有一个 - C0_NCH3-C0-NCH3-基团连接于1， 3_二取代-9炉咔唑骨架的C-l/3位置上。二维N0ESY谱显 示H-4和Me-14相关，进一步论证有一个-N(13)CH3-基团连接于C-3位置上。因此证实本 专利技术的咔唑类生物碱为式(l)的化合物。通过体外活性定量筛选，发现本专利技术的咔唑类生物碱对人胃腺癌细胞株SGC-7901和人肝癌细胞(H印—G2)的生长有较好抑制作用，其半数抑制率IC50分别为67. 38 Mg/mL和73. 65 M/rnL。此外，该咔唑类生物碱具有较强的抗单纯疱疹病毒HSV-I病毒活性，其IC50值约为 30.68 "g/raL。本专利技术的咔唑类生物碱可以用于制备治疗胃癌，肝癌的药物和抗单纯疱疹病毒的药物。 具体实施例方式以下的实施例是对本专利技术的进一步说明，不是对本专利技术的限制。 实施例1:以湿重3Kg的二叉黑角珊瑚(^7Z^。W力e5力'c力"c/昭(Pallas))为原料，冷冻干燥切碎 后用体积比2:1的乙醇-二氯甲烷混合有机溶剂15L提取3次，将提取液减压浓縮得粗提取物。 将粗提取物悬溶于水，依次用乙酸乙酯萃取3次(每次各500mL)，取乙酸乙酯层，减压浓縮 得到27g。用氯仿-甲醇混合溶剂将乙酸乙酯层溶解拌硅胶，用约600mL石油醚拌约500g硅 胶进行湿法装柱，以石油醚-乙酸乙酯溶剂系统从体积比10:0到0:10变化进行梯度洗脱， 薄层层析TLC (GF浏)追踪合并得8个组分。将这8个组分在TLC (GF254)上用氯仿-丙酮溶剂 系统从体积比10:1到9:1变化进行冲洗，收集《值约为0.6,并能在紫光灯波长254nm下有 紫外吸收的组分，得到粗产物。将粗产物用氯仿-甲醇混合溶剂重结晶，得到淡黄色无定形膨松状粉末。经检测证实是式 (1)的化合物。检测数据如下 一般显色剂不显色，改良碘化铋钾显桔红色UV (MeOH) Xmax 220， 240， 264， 301， 336, 348 nm; 'H NMR(本文档来自技高网...
【技术保护点】
以下式（１）的化合物： ＊＊＊ 式（１）。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：漆淑华，张偲，
申请(专利权)人：中国科学院南海海洋研究所，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]
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