一种从松花粉中提取有效成分的超临界萃取方法技术

本发明专利技术涉及一种从松花粉中提取有效成分的超临界萃取方法。本发明专利技术酯类成分在护肤品中可以起到脂质屏障防护的作用，并且同保湿抗炎等功效息息相关；黄酮类成分具有抗衰老、抗炎症等护肤活性；生物碱类成分具有与神经酰胺相似的功能结构基团，能够起到调节皮肤生理功能、保湿和延缓皮肤衰老的作用。三种成分的功能活性相辅相成，达到协同增效的目的，促进松花粉有效成分在终端产品中的利用率。本发明专利技术涉及三级提取，借助超临界萃取技术，除了提取常见的酯类成分外，还利用残渣进行黄酮和生物碱两种较难提纯物质的提取，提高了黄酮等成分的提取率，进而提高了松花粉的利用效率，避免了资源浪费，同时最大程度的保存了其中的有效物质，提高了生物活性。

Supercritical extraction method for extracting active components from pine pollen

The invention relates to a supercritical extraction method for extracting active ingredients from pine pollen. The present invention esters can play a protective role in the lipid barrier and skin care products with moisturizing, anti-inflammatory and other effects are closely related; flavonoids have anti-aging, anti-inflammatory and other skin care activity; alkaloid components with similar structure and functional groups of ceramide, can play a physiological function, regulate skin moisturizing and delay skin aging the role of. The functional activities of the three components supplement each other to achieve synergistic effect and promote the utilization ratio of the active components of pine pollen in the end products. The present invention relates to three stage extraction by supercritical extraction technology, extraction of common elements except esters, also two kinds of flavonoids and alkaloids are difficult to extract by purifying residue, improve the extraction rate of flavonoids and other ingredients, and to improve the utilization efficiency of pine pollen, avoid the waste of resources, and to the greatest extent the preservation of the effective substances, improve the biological activity.

【技术实现步骤摘要】
一种从松花粉中提取有效成分的超临界萃取方法
本专利技术属于松花粉萃取
，尤其涉及一种从松花粉中提取有效成分的超临界萃取方法。
技术介绍
松花粉是一种药食兼用的花粉品种，作为中国传统药材，其药食兼用的历史已逾千年，具有延年益寿等多种保健功效。花粉黄酮具有多种美容护肤作用，有研究表明其在抗辐射、延缓衰老和抗氧化方面都有良好的表现。目前松花粉的提取分离工艺大都集中在水提和醇提工艺研究，对松花粉中的酯类成分和生物碱类成分难以达到分离纯化的目的；利用超临界等萃取技术通常是针对松花粉中的酯类成分如甾醇、甘油酸等，但是对传统提取工艺下涉及的活性成分少有涉及，因此很难最大程度的利用松花粉中的有效成分。
技术实现思路
本专利技术针对上述现有技术存在的不足，提供一种从松花粉中提取有效成分的超临界萃取方法。本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下：一种从松花粉中提取有效成分的超临界萃取方法，包括以下步骤：(1)提取总酯类成分：将经过干燥、破壁和灭菌的松花粉装入萃取器中，在温度为40-50℃、压力为25MPa、CO2流速为25L/h-35L/h,条件下连续萃取2h；带着萃取出脂肪类化合物的CO2流体进入分离釜I中，在温度为40℃-60℃、压力为8MPa条件下进行一级分离；再进入分离釜II中，在温度为30℃、压力为6MPa条件下进行二级分离；(2)提取总黄酮类成分：将步骤(1)得到的药物残渣在压力为20-40MPa、温度为60-80℃、CO2流速为25L/h-35L/h的条件下萃取1.5h；(3)提取总生物碱成分：将步骤(2)得到的药物残渣与100mL、浓度为10-20％的氨水溶液混合，碱化1-2h后，在温度为70℃、压力为40MPa、CO2流速为35-45L/h的条件下萃取1.5h；(4)将步骤(1)(2)(3)的萃取成分混合。其中，步骤(2)的萃取过程中加入200-400ml、浓度为80-90％的乙醇作为挟带剂。步骤(3)中的萃取过程中加入300ml无水乙醇作为挟带剂。步骤(1)(2)(3)中所述的CO2纯度为99％以上。本专利技术的有益效果是：1、本专利技术提取的酯类成分在护肤品中可以起到脂质屏障防护的作用，并且同保湿抗炎等功效息息相关；提取的黄酮类成分具有抗衰老、抗炎症等护肤活性；提取的生物碱类成分具有与神经酰胺相似的功能结构基团，能够起到调节皮肤生理功能、保湿和延缓皮肤衰老的作用。三种成分的功能活性相辅相成，达到协同增效的目的，促进松花粉有效成分在终端产品中的利用率。2、现有的松花粉超声提取多为一级提取，主要针对其中的脂肪类成分，或是脂质合成前体物质甾醇类化合物。本专利技术提取的物质为总酯类，除了常见的脂肪类或是甾醇类成分，还包括磷脂类成分和挥发油类成分等。另外，本专利技术涉及三级提取，借助超临界萃取技术，除了提取常见的酯类成分外，还利用残渣进行黄酮和生物碱两种较难提纯物质的提取，提高了黄酮等成分的提取率，进而提高了松花粉的利用效率，避免了资源浪费，同时最大程度的保存了其中的有效物质，提高了生物活性。具体实施方式以下结合实例对本专利技术的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本专利技术，并非用于限定本专利技术的范围。实施例1一种从松花粉中提取有效成分的超临界萃取方法，包括以下步骤：(1)提取总酯类成分：将松花粉装入萃取器中，在温度为40-50℃、压力为25MPa、CO2流速为30L/h条件下连续萃取2h；带着萃取出脂肪类化合物的CO2流体进入分离釜I中，在温度为50℃、压力为8MPa条件下进行一级分离；再进入分离釜II中，在温度为30℃、压力为6MPa条件下进行二级分离；(2)提取总黄酮类成分：将步骤(1)得到的药物残渣在压力为20-40MPa、温度为70℃、CO2流速为30L/h的条件下萃取1.5h，的萃取过程中加入200-400ml、浓度为80-90％的乙醇作为挟带剂；(3)提取总生物碱成分：将步骤(2)得到的药物残渣与100mL、浓度为10-20％的氨水溶液混合，碱化1-2h后，在温度为70℃、压力为40MPa、CO2流速为40L/h的条件下萃取1.5h，萃取过程中加入300ml无水乙醇作为挟带剂；(4)将步骤(1)(2)(3)的萃取成分混合。各提取成分的含量测定：1、总甾醇含量测定对照品标准液的配制：精密称取豆甾醇对照品0.022g，用甲醇溶解并定容至50mL容量瓶作为对照品标准溶液。显色剂的配制：称取0.5g氧化汞，精密加入2mL浓硫酸和10mL蒸馏水，超声溶解，量取1mL该溶液置于100mL容量瓶中，用冰乙酸和浓硫酸混合溶液(1∶2)定容至刻度。供试品溶液的配制：精密称取0.5g一级萃取后溶液，用甲醇溶解并定量至10mL容量瓶作为供试品溶液。测定方法：取供试品溶液2mL置于10mL容量瓶中用磺基醋酸汞试剂定容至刻度，在410nm波长处，用甲醇作为空白测定其吸光度。线性与范围：精密吸取豆甾醇标准品溶液1.0、2.0、4.0、6.0、10.0mL分别置于10mL容量瓶中并用甲醇定容至刻度，作为对照品溶液。410nm波长处测定其吸光度，以豆甾醇浓度(C)为横坐标，吸光度(A)为纵坐标作回归曲线，得回归方程。实验结果:结果测得溶液中甾醇含量为31.69mg/mL,用传统溶剂提取同样得率提取液中甾醇含量仅为10.19mg/mL.2、黄酮含量测定:最大吸收峰位置确定：准确吸取芦丁标准溶液(0.55g/L)10mL于50ml容量瓶中，用30％乙醇补至25mL，加入1.4mL、5％NaNO2摇匀，放置5min后加入1.4mL、10％Al(NO3)3，6min后再加入10mL、1mol/LNaOH混匀，用30％乙醇稀释至刻度，10min后测定其λmax，参比为空白试剂。标准曲线的绘制：分别取上述芦丁标准溶液1mL、2mL、4mL、6mL、8mL、10mL于6只50mL容量瓶中，用30％乙醇补至25mL，加入1.4mL、5％NaNO2摇匀，放置5min后加入1.4mL、10％Al(NO3)3，6min后再加入10mL、1mol/LNaOH，混匀，用30％乙醇稀释至刻度。于波长510nm处测定测吸光值，参比为空白试剂。样品溶液的测定：取1mL提取液，于25mL容量瓶中用30％乙醇-水补充至12.5mL，加入0.7mL亚硝酸钠，摇匀，放置5min后加入0.7mL、l0％Al(NO3)3，6min后再加人5mL、1mol/LNaOH混匀，用30％乙醇稀释至刻度，10min后测定其在510nm波长下的吸光度，参比为空白试剂。实验结果：测得提取液中黄酮含量为2.38mg/mL。3、生物碱含量测定：标准曲线的绘制：用移液管准确量取氧化苦参碱对照品溶液1mL、2mL、3mL、4mL、5mL、6mL,置于干燥的具塞三角瓶中,各加蒸馏水至6mL,分取5mL,分别加入pH值7.0缓冲液5mL,再依次精密加入浓度0.025％溴麝香草酚蓝标准液2.0mL和氯仿10.0mL,振摇1min,转移至50mL分液漏斗放置分层，静置1h,分取氯仿层，在417nm波长处测定吸光度。另以同法操作(不加氧化苦参碱对照品溶液)的氯仿为空白。以浓度(C)为横坐标,吸光度(A)为纵坐标,绘制标准曲线。样品测定：分别取稀释液5.0mL置分液漏斗中,依次加入pH值7.0缓冲溶液5mL、浓度0.02本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从松花粉中提取有效成分的超临界萃取方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)提取总酯类成分：将经过干燥、破壁和灭菌的松花粉装入萃取器中，在温度为40‑50℃、压力为25MPa、CO

【技术特征摘要】
1.一种从松花粉中提取有效成分的超临界萃取方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)提取总酯类成分：将经过干燥、破壁和灭菌的松花粉装入萃取器中，在温度为40-50℃、压力为25MPa、CO2流速为25L/h-35L/h,条件下连续萃取2h；带着萃取出脂肪类化合物的CO2流体进入分离釜I中，在温度为40℃-60℃、压力为8MPa条件下进行一级分离；再进入分离釜II中，在温度为30℃、压力为6MPa条件下进行二级分离；(2)提取总黄酮类成分：将步骤(1)得到的药物残渣在压力为20-40MPa、温度为60-80℃、CO2流速为25L/h-35L/h的条件下萃取1.5h；(3)提取总生...

【专利技术属性】
技术研发人员：陶宇，于建伟，隋海松，卢伟超，唐文金，潘松浩，邹鹏飞，
申请(专利权)人：烟台新时代健康产业日化有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37