本发明专利技术属于医药技术领域，提供了一种中草药过山蕨有效成分及其提取方法和用途。该提取方法包括水提法、醇提法、大孔树脂纯化法、溶剂萃取法。经该方法所得的提取物主要有效成分为总黄酮、总皂苷、总有机酸，其含量分别为总黄酮１％－３５％，总皂苷１％－２５％，总酚酸１％－３％。本发明专利技术还提供了过山蕨直接或与药学上通常用于该类制剂的固体或液体混合制成适宜剂型的方法，过山蕨有效成分及其制剂具有治疗血栓闭塞性脉管炎，肾炎，外伤出血，子宫出血，神经性皮炎，脑栓塞引起的偏瘫以及糖尿病并发症的作用。该提取方法简单易行、成本低，所得提取物无毒副作用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药
，涉及中草药过山蕨的有效成分提取方法和用途，以及过山蕨有效成分制剂的生产加工方法。
技术介绍
过山蕨(C卿f,潔"》/r/面R叩r.)，又名马蹬草，还卩曰草，过桥草，为铁角蕨科，过山蕨属多年生草本植物。本属全世界共两种，中国产一种。过山蕨是一种传统草药，民间用于治疗外伤出血，子宫出血，血栓闭塞性脉管炎，肾炎，神经性皮炎，脑栓塞引起的偏瘫以及糖尿病并发症等，具有确切疗效。实验表明，该草药毒性很小，对血压无明显影响，长期给药对家兔肝功能未见不良影响。其有效成分的提取及利用其有效成分生产加工成制剂未有报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供过山蕨有效成分的提取方法，以及利用其有效成分生产加工数种制剂，将其作为治疗血栓闭塞性脉管炎，肾炎，外伤出血，子.宫出血，神经性皮炎，脑栓塞引起的偏瘫以及糖尿病并发症的药物。过山蕨有效成分组成如下Compd,1 H CH2CH GlcCompd2 Gto CH2OH GlcC加pd.3 Glc CHpH GJc2-1 GlcCompcM H CH20"GIC GlcCompU.5 Glc CH20"Glc GlcCompd.6 GfcwGlc CH20H Glc2-"vlCompd.7 GIC"MGtewAra CH2OH GlcCompil.8 GlCwGlca^Gal CH2OH GIc2-1GlcCompd.9 GlcCH3 GlcCampd.10 Gk^GIcCH3 GlcCompd." GlcCH20(6"CoumsTOyl) Glcz.，G'cGlc / "D"glLJcopyranoskteAra ct-L-arabinopyranosideR2Conrvd.22 OHCompd.23 OHCompd.24 OCH3Compd.26 OHR3HHCompd.14Compd.15Gompd.16Compd.17Compd.18Compd.19 Glc^GIc (6"Caffeoyl)Compd.21 GIC2-，Glc (6切umaroy0本专利技术是是通过如下方案实现的所述过山蕨有效成分的制备方法分四种方法l:取原药材去杂后，加15至30倍量水煎煮不少于两次，每次提 取时间不少于1小时，提取液浓缩至药液体积的五分之一至二十分之一， 在0-10'C下低温静置6-24小时至沉淀完全，除去沉淀，取上清液加乙醇沉 淀l-2次，控制提取液中乙醇浓度在50%-90%,在0-1(TC下低温静置12-48 小时至沉淀完全，再次过滤，滤液回收乙醇至无醇味，所得上清液经大孔 树脂(HPD100或DIOI)进行分离纯化，分别以水，5%-30%乙醇，30%-60°/ 乙醇，60%-95%乙醇洗脱，5%-30%乙醇洗脱物为有效成分组1， 30%-60%乙醇 洗脱物为有效成分组2, 60%-95%乙醇洗脱物为有效成分组3,三者按折合 生药材量l: 1: 1组合为过山蕨有效提取物。方法2:取原药材去杂后，加15至30倍量的5%-95%的乙醇煎煮不少于两次，每次提取时间不少于1小时，提取液浓缩至药液体积的五分之一 至二十分之一，在0-l(TC下低温静置12-24小时至沉淀完全，除去沉淀， 所得上清液经大孔树脂(HPD 100或D101 )进行分离纯化，分别以水，5%-30% 乙醇，30%-60%乙醇,60%-95%乙醇洗脱，5%-30%乙醇洗脱物为有效成分组1， 30%-60%乙醇洗脱物为有效成分组2， 60%-95%乙醇洗脱物为有效成分组3，三者按折合生药材量l: 1: l组合为过山蕨有效提取物。方法3:取原药材去杂后，加15至30倍量的5%-95%的乙醇煎煮不少 于两次，每次提取时间不少于1小时，提取液浓缩至药液体积的五分之一 至二十分之一，在O-l(TC下低温静置12-24小时至沉淀完全，除去沉淀， 取上清液分别用石油醚(或环己烷、正己烷)、乙酸乙酯、正丁醇萃取两次 以上至萃取完全。回收溶媒，所得正丁醇萃取层经大孔树脂(HPD 100或 D101)纯化，分别以水，5%-95%乙醇，乙醇洗脱，5%-95%乙醇洗脱物为有 效成分组分l,乙酸乙酯萃取层为有效成分组2, 二者按折合生药材量l: 1 组合为过山蕨有效提取物。方法4:取原药材去杂后，加15至30倍量水煎煮不少于两次，每次提 取时间不少于1小时，提取液浓缩至药液体积的五分之一至二十分之一， 在0-1(TC下低温静置6-24小时至沉淀完全，除去沉淀，取上清液分别用石 油醚(或环己烷、正己烷)、乙酸乙酯、正丁醇萃取两次以上至萃取完全。 回收溶媒，所得正丁醇萃取层经大孔树脂纯化，分别以水，5%-95%乙醇， 乙醇洗脱，5%-95%乙醇洗脱物为有效成分组分1，乙酸乙酯萃取层为有效成 分组2， 二者按折合生药材量l: l组合为过山蕨有效提取物。所得过山蕨有效成分提取物中，总黄酮含量为1%-35%,总皂苷含量为 "/「25%,总酚酸含量为1%-3%。由上述方法可见，过山蕨有效成分提取物由总黄酮、总皂苷和总酚酸 组成，可通过上述四种方法制备，可简述为方法一水提-水沉-醇沉-大孔 树脂分段纯化；方法二醇提-水沉-大孔树脂分段纯化；方法三醇提-溶 剂分段萃取-大孔树脂纯化；方法四水提-溶剂分段萃取-大孔树脂纯化。本专利技术所述提取物具有抗氧化、清除自由基、醛糖还原酶抑制、扩张血 管等活性，可用于治疗血栓闭塞性脉管炎、糖尿病性肾炎、外伤出血等症的治疗。利用本专利技术获得的过山蕨有效成分提取物中的部分单体化合物具 有显著的抗氧化、清除自由基、醛糖还原酶抑制的活性。 本专利技术的优点如下(1) 本制备方法所得过山蕨提取物成分明确，其中化合物卜12, 19-21 为过山蕨特有成分，质量可控性强。(2) 本专利技术所得过山蕨有效成分提取物由三种不同类型天然产物组成，具有多靶点协同作用且毒副作用低的优点。(3) 制备方法简便、易行，提取充分，适宜于工业生产(4) 过山蕨有效成分提取物活性显著，疗效确切，可有效降低中药服 用量。附图说明图1为部分单体化合物类S0D活性测试结果*: IC50<10 uM 图2为部分单体化合物自由基清除活性测试结果*: IC50〈15uM 图3为部分单体化合物醛糖还原酶抑制活性测试结果 *: IC50〈50uM 具体实施例方式实施例1按照有效成分制备方法1(1) 取干燥过山蕨全草10kg,去除杂质、灰尘(2) 在中药提取罐中加入药材和18倍量的水，加热煮沸，提取两次， 每次2小时。(3) 合并两次提取液，浓缩至20L,在4'C下低温静置24小时至沉淀 完全，除去沉淀。(4) 取上清液加入乙醇，调节醇浓度至50 / ，在10。C下低温静置24小 时至沉淀完全，再次过滤，滤液回收乙醇至无醇味。(5 )上清液上样至非极性大孔树脂柱，分别用水(8VR )、 20%乙醇(4VR)、 60%乙醇(4VJ、 90%乙醇(4Vb)梯度洗脱，得水洗物弃去，20%乙 醇洗脱物、60%乙醇洗脱物、90%乙醇洗脱物按照折合生药量1: 1: 1比例混合，得过山蕨有效提取物，其中总黄酮含量为30%,总皂 苷含量为20%,总酚酸含量为1%。实施例2按照有效成分制备方法2(1) 取干燥过山蕨全草5kg，去除杂质、灰尘(2) 在中本文档来自技高网...
【技术保护点】
过山蕨有效成分，其特征在于：包括山柰酚型黄酮苷类、环阿尔廷型三萜皂苷类、小分子酚酸类；该有效成分的结构式为： ＊＊＊。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李宁，李铣，张鹏，马忠俊，
申请(专利权)人：沈阳药科大学，
类型：发明
国别省市：89[中国|沈阳]
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