一种提取川贝母DNA的方法技术

技术编号:14996892 阅读:299 留言:0更新日期:2017-04-04 02:10
本发明专利技术提供了一种提取川贝母品DNA的方法,旨在提供一种专属性强、富集效率高、操作相对简单的方法,该方法依次包括下述步骤:1)前处理样品;2)取前处理好的样品,加入400μL裂解缓冲液和已融化的核糖核酸酶A5μL,振荡混匀;置于70℃金属浴中10‑30分钟,期间取出振荡混匀数次;5000转离心10分钟,取上清进行提取;取出试剂盒中96位深孔板,于A行分别加入已裂解样品300μL,连接缓冲液600μL,磁珠60μL;F行加入清洗缓冲液Ⅰ500μL;G行加入清洗缓冲液Ⅱ550μL;H行加入清洗缓冲液Ⅲ550μL;取出试剂盒中洗脱条,加入洗脱缓冲液100μL;将混合后的96位深孔板和洗脱条,置于核酸提取仪,进行DNA提取;属于化学检测技术领域。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术提供一种提取川贝母的DNA的方法,具体的说,是一种提取川贝母DNA的方法;属于化学检测

技术介绍
川贝母主要分布于四川、云南、西藏等地,品质较优,为百合科植物川贝母、棱砂、乌花等的鳞茎,具有清热润肺、化痰止咳的功效,药用价值较高。传统的川贝母的鉴别,主要是性状、显微鉴别、光谱法,由于市场上贝母类药材品种较多,相同品种间也会因为药源植物来源不一、种植环境、产地和加工等因素存在相当的混杂度,这就使得实验人员必须具备较高的药材鉴别经验。随着分子生物学技术的发展,使得中药材的分子遗传标记鉴别成为可能。目前文献上已有聚合酶链式反应(PCR)法鉴别川贝母药材的相关报道。《中国药典》2015版已对川贝母引入了聚合酶链式反应-限制性内切酶长度多态性鉴别方法,但常规PCR存在需结合电泳分析、无法对扩增反应进行实时检测,以及EB试剂有毒害性等缺点。
技术实现思路
针对上述不足,本专利技术的目的是提供一种通过磁珠法提取川贝母中的DNA,该提取方法本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种提取川贝母品DNA的方法,其特征在于,依次包括下述步骤:1)前处理样品取1g试样,用研钵研成粉末,再精密称取20mg至2ml灭菌离心管中;2)DNA的提取取前处理好的样品,加入400μL裂解缓冲液和已融化的核糖核酸酶A 5μL,振荡混匀;置于70℃金属浴中10‑30分钟,期间取出振荡混匀数次;5000转离心10分钟,取上清进行提取;取出试剂盒中96位深孔板,于A行分别加入已裂解样品300μL,连接缓冲液600μL,磁珠60μL;F行加入清洗缓冲液Ⅰ 500μL;G行加入清洗缓冲液Ⅱ 550μL;H行加入清洗缓冲液Ⅲ 550μL;取出试剂盒中洗脱条,加入洗脱缓冲液100μL;将混合后的96位...

【技术特征摘要】
1.一种提取川贝母品DNA的方法,其特征在于,依次包括下
述步骤:
1)前处理样品
取1g试样,用研钵研成粉末,再精密称取20mg至2ml灭菌离
心管中;
2)DNA的提取
取前处理好的样品,加入400μL裂解缓冲液和已融化的核糖核
酸酶A5μL,振荡混匀;置于70℃金属浴中10-30分钟,期间取
出振荡混匀数次;5000转离心...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈学松罗达龙黄林杰黄琳
申请(专利权)人:广西壮族自治区梧州食品药品检验所
类型:发明
国别省市:广西;45

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