辅助检测食品中是否存在转基因蛋白质的方法技术

本发明专利技术公开了一种辅助检测食品中是否存在转基因蛋白质的方法，包括：提取总蛋白；将总蛋白质注射到检测装置的加样孔，封闭第一多孔板体上的孔洞，该检测装置包括：第一多孔板体；加样装置，其包括第二多孔板体、圆锥体和多条加样通道；中空纤维聚丙烯膜管，其设置于第一多孔板体和第二多孔板体之间，内壁上附着有与待检测转基因蛋白质特异性结合的第一抗体；打开第一多孔板体上的孔洞，洗涤；再次封闭第一多孔板体上的孔洞，将第二抗体注射到检测装置的加样孔；再次打开第一多孔板体上的孔洞，洗涤；检测中空纤维聚丙烯膜上是否存在第二抗体的标记，若存在标记，则认为该总蛋白中存在该转基因蛋白，并判断该原材料中存在转基因成分。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种辅助检测食品中是否存在转基因蛋白质的方法。
技术介绍
通过基因工程技术将一种或几种外源性基因转移到某种特定的生物体中，并使其有效地表达出相应的产物(多肽或蛋白质)，此过程叫转基因。以转基因生物为原料加工生产的食品就是转基因食品。根据转基因食品来源的不同可分为植物性转基因食品，动物性转基因食品和微生物性转基因食品。转基因食品有较多的优点：可增加作物产量；可以降低生产成本；可增强作物抗虫害、抗病毒等的能力；提高农产品耐贮性。转基因生物的安全评价是转基因生物及其产品市场化和商品化的前提，在安全评价中转基因成分的检测是一项重要内容，建立转基因生物快速、简便、准确的检测方法为安全评价和管理奠定基础。针对转基因植物及其产品中外源目的基因表达的特异性蛋白进行定性和定量检测，其结果相对更加精准，可靠性也更好，但是Elisa和Western等目前的检测蛋白的手段都比较繁琐，出结果也较慢。提高食品中转基因成分的检出速度是目前急需解决的问题。而基因表达后最终产生的是蛋白质，行驶该基因功能的产物也是蛋白质，因此，检测食品中是否存在转基因的蛋白质是比较可靠且可信的结果之一。申请号：201510005351.6的中国专利文件公开的装置，虽然能够用于食品中蛋白质的快速检测，但是存在一个样品的多个平行实验之间结果差异较大，个别样品结果不可靠的情况。
技术实现思路
本专利技术的目的之一是提供一种辅助检测食品中是否存在转基因蛋白质的方法，在蛋白质水平上快速检测食品中的转基因成分；本专利技术的另一目的是提供一种辅助检测食品中是否存在转基因蛋白质的方法的检测装置，该装置能够快速方便地结合特异性地蛋白，并且使用简单，效率高。本专利技术提供的技术方案为：一种辅助检测食品中是否存在转基因蛋白质的方法，包括：步骤一、提取原材料的总蛋白；步骤二、将步骤一得到的总蛋白质注射到检测装置的加样孔，使总蛋白质通过所述检测装置，该检测装置包括：第一多孔板体，其水平设置；加样装置，其包括第二多孔板体、设置于所述第二多孔板体上并与其形成一容置空间的圆锥体和多条加样通道，所述第二多孔板体与所述第一多孔板体平行设置，且位于所述第一多孔板体的下方，所述圆锥体的直径由下到上逐渐减小且其自由端形成加样孔，所述多条加样通道与所述第二多孔板体上的孔洞一一对应设置，且所述多条加样通道的一端均与所述加样孔连通，而所述多条加样通道的另一端均与所述第二多孔板体上的孔洞一一对应连通；中空纤维聚丙烯膜管，其设置于所述第一多孔板体和所述第二多孔板体之间，所述中空纤维聚丙烯膜管的内壁上附着有与待检测转基因蛋白质特异性结合的第一抗体，所述中空纤维聚丙烯膜管的上端固定在所述第二多孔板体的孔洞中，而其下端固定在所述第一多孔板体上的孔洞中；其中，所述中空纤维聚丙烯膜管的内壁上设置有多处凸起和凹陷当所述总蛋白通过所述检测装置时，封闭所述第一多孔板体上的孔洞，以使总蛋白的流动仅发生在所述多根中空纤维聚丙烯膜的上端和所述中空纤维聚丙烯膜的膜孔之间，使该转基因蛋白质与所述第一抗体结合进而附着到所述中空纤维聚丙烯膜上；之后进行步骤三；步骤三，打开所述第一多孔板体上的孔洞，洗涤所述中空纤维聚丙烯膜的腔中的残渣；之后进行步骤四；步骤四，再次封闭所述第一多孔板体上的孔洞，将与所述转基因蛋白质特异性结合的且带有标记的第二抗体注射到所述检测装置的加样孔，使第二抗体通过所述检测装置；之后进行步骤五；步骤五，再次打开所述第一多孔板体上的孔洞，洗涤所述中空纤维聚丙烯膜的腔中的残渣；之后进行步骤六；和步骤六，检测所述中空纤维聚丙烯膜上是否存在所述第二抗体的标记，若存在所述标记，则认为该总蛋白中存在该转基因蛋白，并判断该原材料中存在转基因成分。优选的是，所述的辅助检测食品中是否存在转基因蛋白质的方法中，通过使用密封膜封闭和打开所述第一多孔板体上的孔洞。优选的是，所述的辅助检测食品中是否存在转基因蛋白质的方法中，所述标记为辣根过氧化物酶，所述步骤六中，利用DAB检测所述中空纤维聚丙烯膜上是否存在所述第二抗体的标记，若将DAB加入到所述中空纤维聚丙烯膜上时产生棕色沉淀，则判断所述中空纤维聚丙烯膜上存在所述标记。优选的是，所述的辅助检测食品中是否存在转基因蛋白质的方法中，所述步骤二中，将步骤一得到的总蛋白质吸取到一注射器中，之后通过将所述注射器插入到所述加样孔中从而将该总蛋白注射到该检测装置中。优选的是，所述的辅助检测食品中是否存在转基因蛋白质的方法中，所述原材料包括玉米、水稻、大豆和小麦。优选的是，所述的辅助检测食品中是否存在转基因蛋白质的方法中，所述中空纤维聚丙烯膜管与所述第一多孔板体之间具有一夹角α，其中，70°≤α＜90°。优选的是，所述的辅助检测食品中是否存在转基因蛋白质的方法中，所述中空纤维聚丙烯膜管与所述第一多孔板体之间具有一夹角β，其中，70°≤β＜90°。优选的是，所述的辅助检测食品中是否存在转基因蛋白质的方法中，所述中空纤维聚丙烯膜管呈曲线形固定于所述第一多孔板体和所述第二多孔板体之间。优选的是，所述的辅助检测食品中是否存在转基因蛋白质的方法中，所述第一多孔板体和所述第二多孔板体均呈长方形，所述第一多孔板体和所述第二多孔板体的孔均各自排列在一条直线上。优选的是，所述的辅助检测食品中是否存在转基因蛋白质的方法中，所述第一多孔板体和所述第二多孔板体均呈圆形，所述第一多孔板体和所述第二多孔板体的孔均各自沿其圆周方向排列。本专利技术的有益效果：本专利技术提供的检测装置中，将转基因蛋白质的第一抗体附着在中空纤维聚丙烯膜上，从而通过使待检测原材料的总蛋白流过该检测装置来检测原材料中是否存在转基因蛋白质，并且通过注射器将蛋白质液体加入到本专利技术的检测装置中，易于操作，本专利技术的装置能够有效快速地检测是否存在转基因蛋白。同时，本专利技术的加样孔中设置有多条加样通道，可加一次样即可对一个样品作出几个平行实验，每个加样孔的直径均是相同的，且均与加样孔连通，这样流入每条中空纤维聚丙烯膜管中的样品的量是一样的，避免了一个样品只进行一个实验带来的操作误差。同时，也能够一次加样即可进行一个样品的多个平行实验，不需要多次操作，操作简便，提高工作效率。使得检测结果更加可靠可信。中空纤维聚丙烯膜的表面有凸起和凹陷，以增加其表面积，及其与总蛋白的接触面积，同时，其在第一多孔板体和第二多孔板体之间的设置为倾斜的，且其呈曲线形，在有限的空间内增加了长度，使其可能结合蛋白更多，这样，需要的样品蛋白质的量能够减少，即使少量总蛋白质也能够检测。降低了对总蛋白质量的需求。同时，本专利技术的装置还使得废液易于收集，不会对环境造成伤害。本专利技术的方法对于转基因蛋白的检测快速、准确，效率高。附图说明图1为本专利技术所述的检测装置的第一多孔板体的孔洞封闭时的结构示意图；图2为本专利技术所述的检测装置的第一多孔板体的孔洞打开时的结构示意图。具体实施方式下面结合附图对本专利技术做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。细胞核分离缓冲液：0.25M蔗糖，18mMPIPES(pH6.8)，5mMMgCl2，60mMKCl，15mMNaCl，1mMCaCl2，1.0％的TritonX-100，1mMPMSF(蛋白酶抑制剂现用现加)。新鲜配置并于4℃保存。细胞核裂解缓冲液：50m本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种辅助检测食品中是否存在转基因蛋白质的方法，其特征在于，包括：步骤一、提取原材料的总蛋白；步骤二、将步骤一得到的总蛋白质注射到检测装置的加样孔，使总蛋白质通过所述检测装置，该检测装置包括：第一多孔板体，其水平设置；加样装置，其包括第二多孔板体、设置于所述第二多孔板体上并与其形成一容置空间的圆锥体和多条加样通道，所述第二多孔板体与所述第一多孔板体平行设置，且位于所述第一多孔板体的下方，所述圆锥体的直径由下到上逐渐减小且其自由端形成加样孔，所述多条加样通道与所述第二多孔板体上的孔洞一一对应设置，且所述多条加样通道的一端均与所述加样孔连通，而所述多条加样通道的另一端均与所述第二多孔板体上的孔洞一一对应连通；中空纤维聚丙烯膜管，其设置于所述第一多孔板体和所述第二多孔板体之间，所述中空纤维聚丙烯膜管的内壁上附着有与待检测转基因蛋白质特异性结合的第一抗体，所述中空纤维聚丙烯膜管的上端固定在所述第二多孔板体的孔洞中，而其下端固定在所述第一多孔板体上的孔洞中；其中，所述中空纤维聚丙烯膜管的内壁上设置有多处凸起和凹陷当所述总蛋白通过所述检测装置时，封闭所述第一多孔板体上的孔洞，以使总蛋白的流动仅发生在所述多根中空纤维聚丙烯膜的上端和所述中空纤维聚丙烯膜的膜孔之间，使该转基因蛋白质与所述第一抗体结合进而附着到所述中空纤维聚丙烯膜上；之后进行步骤三；步骤三，打开所述第一多孔板体上的孔洞，洗涤所述中空纤维聚丙烯膜的腔中的残渣；之后进行步骤四；步骤四，再次封闭所述第一多孔板体上的孔洞，将与所述转基因蛋白质特异性结合的且带有标记的第二抗体注射到所述检测装置的加样孔，使第二抗体通过所述检测装置；之后进行步骤五；步骤五，再次打开所述第一多孔板体上的孔洞，洗涤所述中空纤维聚丙烯膜的腔中的残渣；之后进行步骤六；和步骤六，检测所述中空纤维聚丙烯膜上是否存在所述第二抗体的标记，若存在所述标记，则认为该总蛋白中存在该转基因蛋白，并判断该原材料中存在转基因成分。...

【技术特征摘要】
1.一种辅助检测食品中是否存在转基因蛋白质的方法，其特征在于，包括：步骤一、提取原材料的总蛋白；步骤二、将步骤一得到的总蛋白质注射到检测装置的加样孔，使总蛋白质通过所述检测装置，该检测装置包括：第一多孔板体，其水平设置；加样装置，其包括第二多孔板体、设置于所述第二多孔板体上并与其形成一容置空间的圆锥体和多条加样通道，所述第二多孔板体与所述第一多孔板体平行设置，且位于所述第一多孔板体的下方，所述圆锥体的直径由下到上逐渐减小且其自由端形成加样孔，所述多条加样通道与所述第二多孔板体上的孔洞一一对应设置，且所述多条加样通道的一端均与所述加样孔连通，而所述多条加样通道的另一端均与所述第二多孔板体上的孔洞一一对应连通；中空纤维聚丙烯膜管，其设置于所述第一多孔板体和所述第二多孔板体之间，所述中空纤维聚丙烯膜管的内壁上附着有与待检测转基因蛋白质特异性结合的第一抗体，所述中空纤维聚丙烯膜管的上端固定在所述第二多孔板体的孔洞中，而其下端固定在所述第一多孔板体上的孔洞中；其中，所述中空纤维聚丙烯膜管的内壁上设置有多处凸起和凹陷当所述总蛋白通过所述检测装置时，封闭所述第一多孔板体上的孔洞，以使总蛋白的流动仅发生在所述多根中空纤维聚丙烯膜的上端和所述中空纤维聚丙烯膜的膜孔之间，使该转基因蛋白质与所述第一抗体结合进而附着到所述中空纤维聚丙烯膜上；之后进行步骤三；步骤三，打开所述第一多孔板体上的孔洞，洗涤所述中空纤维聚丙烯膜的腔中的残渣；之后进行步骤四；步骤四，再次封闭所述第一多孔板体上的孔洞，将与所述转基因蛋白质特异性结合的且带有标记的第二抗体注射到所述检测装置的加样孔，使第二抗体通过所述检测装置；之后进行步骤五；步骤五，再次打开所述第一多孔板体上的孔洞，洗涤所述中空纤维聚丙烯膜的腔中的残渣；之后进行步骤六；和步骤六，检测所述中空纤维聚丙烯膜上是否存在所述第二抗体的标记，若存在所述标记，则认为该总蛋白中存...

【专利技术属性】
技术研发人员：黎志春，
申请(专利权)人：黎志春，
类型：发明
国别省市：广西;45