一种宫颈癌尿液检测试剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种宫颈癌尿液检测试剂及其制备方法和应用，包括有含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液、磷钨酸试剂以及缓冲溶液的混合液，含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液、磷钨酸试剂以及缓冲溶液的混合比例是0.5:1:1。含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液的浓度为0.05mol~0.5mol/L，磷钨酸试剂包含下列组份含量的水溶液：钨酸钠40g~58g/380ml~650ml、浓磷酸85%/30ml~50ml、浓盐酸20ml~50ml、硫酸锂30g~55g，缓冲溶液为乙酸/乙酸钠缓冲溶液，其PH值为PH5~PH6。本发明专利技术制备的宫颈癌尿液检测试剂通过检测尿液中的巯基代谢物的含量，判断是否为宫颈癌阳性，不需辅助的仪器设备，不需要冷藏，建立了一种快速、简便、灵敏、特异的宫颈癌检测试剂，以期达到对宫颈癌早期筛查的目的。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及体外诊断试剂
，具体涉及一种宫颈癌尿液检测试剂及其制备方法和应用。
技术介绍
宫颈癌是全世界女性常见的恶性肿瘤之一，在危害女性健康的恶性肿瘤中，宫颈癌被列在第三位。据统计，2008年在全球女性所有新发癌症中，新发宫颈癌所占的比例为9%，仅次于乳腺癌和结肠直肠癌。在我国，据统计每年新发子宫颈癌患者约15万例。业已公认高危人乳头瘤病毒（HR-HPV）的持续感染是宫颈癌发生的必要条件。但从HR-HPV感染妇女诱发宫颈上皮内瘤变（CIN）发展为浸润性宫颈癌（ICC）约需5-20年时间，这为通过筛查发现并治疗癌前病变以降低宫颈癌的发病率和死亡率赢得了时间。最近50年以来，由于有效的筛查方法和策略的应用，宫颈癌的筛查普及率得以较大幅度的提高，在世界范围内，宫颈癌的死亡率有了大幅度的下降，尤其是在一些发达国家。在我们国家，尽管从全国范围来说，宫颈癌的死亡率有了较大幅度的下降，但是这种比例分布并不均衡，比如我国的中西部地区，从事农业的人口占了总人口很大的比例，其中部分地区由于经济条件落后，科学知识普及面过窄，卫生资源缺乏，人们卫生意识较差，这就导致这些地区的宫颈癌发病率和死亡率始终维持在较高的水平。近年来，患宫颈癌的人数呈现逐年增加的趋势，患病的妇女也越来越年轻，引起全世界的高度重视。世界卫生组织（WHO）指出在未来10年里，要釆取更强而有力的措施去阻遏宫颈癌的发生发展，否则，死于宫颈癌的人数将上升25%。随着科学技术的发展，对宫颈癌的病因学研究取得了突破性的进展，目前比较一致的结论是：宫颈癌的主要病因是人乳头瘤病毒(HPV)感染。此后又经过流行病学和生物学大量的研究完善，得出结论：持续高危的HPV感染是引起宫颈癌及宫颈上皮内瘤变的必要因素。宫颈癌发病较缓慢，它的发生、发展是一个逐渐积累，由渐变到突变，由量变到质变的过程。由最初的持续性高危HPV感染到最后发展为宫颈癌这个过程是连续的，它往往要经历以下阶段：持续高危型HPV感染→宫颈不典型增生及宫颈原位癌(CINI、CINII和CINIII)→微小浸润癌→浸润癌。经研究证实从高危型HPV感染发展到宫颈浸润癌(CIS)大约需要7—12年，这个过程中存在着一个较长的癌前病变期，是可逆转的。其明确的致病因素和缓慢的发展过程为广大妇科医生及时有效的干预宫颈癌的发生和发展提供了宝贵的时机。而大量的临床实践表明，通过采取经济有效的筛查方法可以及早发现宫颈癌前期病变，继而采取积极的措施去治疗，对于帮助广大妇女远离宫颈癌的威胁，降低宫颈癌的发病率以及死亡率有着不可低估的意义。世界卫生组织唯一建议的在世界范围内开展筛查的恶性肿瘤便是宫颈癌。宫颈癌在全球范围内的防治目标是：一方面使参与到宫颈癌筛查中的妇女人数不断增加，逐步扩大成年妇女宫颈癌筛查的范围，特别是如今宫颈癌患者趋于年轻化，年轻患者更应该备受关注；另一方面，尽可能给每位患宫颈癌的妇女提供准确的筛查方法，确保筛查方法本身的质量和有效性不存在问题。对于宫颈癌病因学的突破为其预防提供了新的方向和前景，目前HPV-DNA检测作为宫颈癌的一种主要筛查方法在临床上逐步推广；2006年，HPV的预防性疫苗也已成功上市。但是，由于疫苗的成本较高，而且其在人群中是否具有预防效果尚需20-30年的时间进行验证，对于发展中国家的广大妇女来说，实现疫苗预防在目前来说不太现实。因此，顺应发展中国家国情的需要，在目前及将来很长一段时间内，宫颈癌的筛查仍然是宫颈癌防治的一种重要手段。所以，根据我国的实际情况，在临床上如何选择一种既准确有效、又经济适用，而且容易被女性接受的宫颈癌筛查方法显得尤为重要。目前临床上宫颈癌的筛查方法主要有肉眼观察法、细胞学检查法和HPV检测法。细胞学检查因其快速、价廉，是目前最常用的方法，在宫颈筛查中仍起着重要作用，并被许多国家作为常规筛査项目。但细胞学检查并不十分可靠，具有较高的假阴性，通常需要重复检查才能获得满意的敏感度，且巴氏涂片在腺癌检测中的敏感度比鳞癌更低。虽然薄层液基细胞学等新技术的出现改善了细胞学的制片问题，但并没有彻底改变其敏感度低的现状，这也制约着细胞学筛查的发展。HPV检测是宫颈癌筛查的另一项重要方法。在欧洲国家，HPV检测正在取代细胞学检查，成为宫颈病变初筛的首选。HPV检测具有很高的敏感性，在大样本筛査中可查出高风险人群，比细胞学筛查更为有效。但HPV的感染非常普遍，据统计，性活跃妇女终生累积感染率可高达80%。这种感染通常是一过性的，可通过自身免疫系统及时清除，并不导致高度CIN及宫颈癌的发生。因而，HPV检测通常具有较高的假阳性，尤其在年轻女性中其特异性更低。因此，从宫颈癌筛査及早期诊断的角度出发，有必要寻找新的手段来替代或协助常规筛查方法进行综合判断，使宫颈癌的筛查更加准确和可靠。利用尿液筛查宫颈癌，克服了传统检查方法的不足，一方面增强了受试者的依从性，使加入到宫颈癌筛查的妇女大大增加；另一方面，对于一些未有性生活或者不愿进行妇科检查的妇女提供了新的宫颈癌筛查的途径，这些优势可以提高我国的宫颈癌筛查率，促进我国宫颈癌的预防和控制工作效率，对于减少宫颈癌的发病率和降低其死亡率有着迫切的现实意义。现有的宫颈癌尿液检测试剂盒虽然是一种快速简便的方法，但是试剂盒仍然存在组成溶液种类较多、结构较复杂、操作步骤多等缺陷，且上述试剂盒中的试剂保存时间短、稳定性差。现有技术有待进一步改进和提高。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于，提供一种宫颈癌尿液检测试剂及其制备方法和应用，通过检测患者尿液中巯基代谢物的含量，判断患者是否为宫颈癌阳性，不需辅助的仪器设备，不需要冷藏，建立了一种快速、简便、灵敏、特异的宫颈癌检测试剂，以期达到对宫颈癌早期筛查的目的。本专利技术人对尿液中的宫颈癌标志物进行研究，意外地发现，巯基化合物在健康人的尿液中含量非常低，而在宫颈癌患者的尿液中含量显著升高。为了验证这种标志物与宫颈癌之间的特异性关联，本专利技术人进一步研究了巯基化合物在其他类型癌症患者尿液中的含量，意外发现基本上没有出现这种蛋白含量同时升高的情况。因此，巯基化合物可以作为尿液中宫颈癌的特异性诊断标志物。本专利技术的技术方案就是以尿液中存在的巯基化合物作为靶标来检测宫颈癌的存在于否。本专利技术是这样实现的，提供一种宫颈癌尿液检测试剂，包括有含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液、磷钨酸试剂以及缓冲溶液的混合液，所述含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液、磷钨酸试剂以及缓冲溶液的混合比例是0.5:1:1；所述含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液的浓度为0.05mol~0.5mol/L，所述磷钨酸试剂包含下列组份含量的水溶液：钨酸钠40g~58g/380ml~650ml、浓磷酸85%/30ml~50ml、浓盐酸20ml~50ml、硫酸锂30g~55g，所述缓冲溶液为乙酸/乙酸钠缓冲溶液，所述缓冲溶液的PH值为PH5~PH6。进一步地，所述含锌离子化合物溶液为氯化锌溶液，所述含汞离子化合物溶液为氯化汞溶液。进一步地，所述氯化汞溶液的浓度为0.05mol/L；所述钨酸钠45g/380ml、浓磷酸85%/30ml、浓盐酸30ml、硫酸锂30g，最后加蒸馏水定容至1000ml；所述乙酸钠82.3g/10本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种宫颈癌尿液检测试剂，其特征在于，包括有含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液、磷钨酸试剂以及缓冲溶液的混合液，所述含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液、磷钨酸试剂以及缓冲溶液的混合比例是0.5:1:1；所述含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液的浓度为0.05mol~0.5mol/L，所述磷钨酸试剂包含下列组份含量的水溶液：钨酸钠40g~58g/380ml~650ml、浓磷酸85%/30ml~50ml、浓盐酸20ml~50ml、硫酸锂30g~55g，所述缓冲溶液为乙酸/乙酸钠缓冲溶液，所述缓冲溶液的PH值为PH5~PH6。

【技术特征摘要】
1.一种宫颈癌尿液检测试剂，其特征在于，包括有含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液、磷钨酸试剂以及缓冲溶液的混合液，所述含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液、磷钨酸试剂以及缓冲溶液的混合比例是0.5:1:1；所述含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液的浓度为0.05mol~0.5mol/L，所述磷钨酸试剂包含下列组份含量的水溶液：钨酸钠40g~58g/380ml~650ml、浓磷酸85%/30ml~50ml、浓盐酸20ml~50ml、硫酸锂30g~55g，所述缓冲溶液为乙酸/乙酸钠缓冲溶液，所述缓冲溶液的PH值为PH5~PH6。2.如权利要求1所述的宫颈癌尿液检测试剂，其特征在于，所述含锌离子化合物溶液为氯化锌溶液，所述含汞离子化合物溶液为氯化汞溶液。3.如权利要求2所述的宫颈癌尿液检测试剂，其特征在于，所述氯化汞溶液的浓度为0.05mol/L；所述钨酸钠45g/380ml、浓磷酸85%/30ml、浓盐酸30ml、硫酸锂30g，最后加蒸馏水定容至1000ml；所述乙酸钠82.3g/1000ml、加入乙酸调PH值至PH5.3~PH5.5的乙酸/乙酸钠缓冲溶液。4.如权利要求2所述的宫颈癌尿液检测试剂，其特征在于，所述氯化汞溶液的浓度为0.08mol/L；所述钨酸钠51g/400ml、浓磷酸85%/37ml、浓盐酸20ml、硫酸锂38g，最后加蒸馏水定容至1000ml；所述乙酸钠70g/1000ml、加入乙酸调PH值至PH5.5~PH5.7的乙酸/乙酸钠缓冲溶液。5.如权利要求2所述的宫颈癌尿液检测试剂，其特征在于，所述氯化锌溶液的浓度为0.1mol/L；所述钨酸钠58g/520ml、浓磷酸85%/40ml、浓...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱建华，
申请(专利权)人：安徽康乐美生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽;34