牙周病原菌血浆或血清抗体效价检测试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及一种牙周病原菌血浆或血清抗体效价检测试剂盒。本发明专利技术的目的是提供能对具有大范围的免疫表型的患者以高精度检查牙周病、并且能用自动化的机器进行高速处理的、血液试样中的针对牙周病原菌的抗体效价或抗体的检测试剂盒，适合用于该试剂盒的牙周病原菌抗原蛋白，以及使用该试剂盒的检测血液试样中的抗体效价或抗体的存在的方法，对牙龈卟啉单胞菌菌株进行分型的试剂盒。本发明专利技术公开了包含具有序列编号：1、3、9、15、19、31、41、43、63、65和67的氨基酸序列的一系列多肽的检测试剂盒，具有序列编号：67的氨基酸序列的改性多肽，以及测定从人身体中分离的血液试样中的针对牙周病原菌的抗体效价或抗体的存在的方法，该方法包括使该血液试样与上述一系列多肽接触的步骤。

【技术实现步骤摘要】
本申请是国际申请日为2011年10月18日、国际申请号为PCT/JP2011/073942、进入中国国家阶段获得的国家申请号为201180067623.5、专利技术名称为“牙周病原菌血浆或血清抗体效价检测试剂盒”的PCT申请的分案申请即申请号为201510069376.2的专利技术专利申请的进一步的分案申请。
本专利技术涉及一种牙周病原菌血浆或血清抗体效价检测试剂盒，更详细地说，涉及适合于用机器自动化检测的包含特定的牙周病原菌抗原蛋白的牙周病原菌血浆或血清抗体效价检测试剂盒、该试剂盒中使用的改性多肽、以及测定血液试样的针对牙周病原菌的抗体效价的方法。
技术介绍
牙周病是因口腔细菌感染牙周组织而引发的细菌感染症。在牙科临床的现场，将临床症状、口腔内照片、X光图像或牙周组织检查等临床检查的结果综合起来进行牙周病的诊断。这些检查中，口腔内照片和X光图像诊察是用视觉来评价牙周组织的形态变化，牙周组织检查是测定牙菌斑附着状况、牙周袋的深度、探诊时的出血或牙齿的松动度等各种临床项目来进行评价。因此，这些检查需要繁琐的操作，为了准确地诊断患者的牙周病病情，要求手术者有高超的技术。即，根据情况的不同，会因手术者的熟练度而导致检查结果不同，甚至有可能导致对患者的诊断不同。此外，上述牙科临床检查中，虽然牙周病是细菌感染症，但并不是在牙周病原菌的“感染”水平上进行评价，而是在牙周组织的“形态上的变化”的水平上进行评价，可以说是由手术者主观地进行检查，一直以来对于从细菌学、免疫学的观点来看恰当、且不会因手术者的熟练度而导致检查结果产生差异的客观的牙周病检查方法都存在需求。在这种状况下，建立了以针对牙周病原菌的血清抗体效价作为牙周病检查的指标的牙周病检查系统(非专利文献1)。该牙周病检查系统从由患者的指尖采集并分离的微量的血液来检查、定量针对牙周病原菌的“特异性抗体”，由此评价牙周病原菌的感染状态和牙周病的严重程度(炎症的状态)，能通过采用免疫学方法来客观且均一地评价牙周病的病情。此外，该牙周病检查系统中，从由指尖采集的血液中分离血浆，将血浆试样邮递至检查机构，用检查机构测定针对牙周病原菌的IgG抗体效价，评价牙周病的严重程度后，通知各患者牙周病检查的结果(牙周病原菌血浆抗体效价检查)。因此，能对全科医师或家庭的牙周病检查实施辅助，并且通过一揽子收集并分析检查数据，也能利用庞大的数据来与病情进行关联。另一方面，这种牙周病检查系统中，由于要处理大量的试样，因此要求自动进行高速处理。这种检查系统中，试样(血液)中的针对作为检查对象的抗原的抗体的种类越多，则检查结果与牙周病的相关性越高，越能以良好的精度检查牙周病。此外，感染牙周病的人中，由于牙周病原菌和人的个体差异，导致识别的牙周病原菌抗原的种类不同，从这一点来看，也同样是作为检查对象的抗体的种类越多，越能以良好的精度检查牙周病。然而，如果欲测定多种抗体的抗体效价，则难以进行试样的高速处理，不适合于用机器自动化检测。现在的抗体效价测定中使用的抗原是将牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonasgingivalis)等牙周病原菌粉碎而配制成的溶液，是包含种类繁多的细菌蛋白(也包括LPS、膜脂)的混合物。因此，难以用机器来自动地高速处理大量的试样。现有技术文献非专利文献非专利文献1：工藤值英子、冈山牙学会杂志、第28卷、第1号(2009)1-14页。
技术实现思路
专利技术要解决的技术问题本专利技术的目的在于提供牙周病原菌血浆或血清抗体效价检测试剂盒、适合用于该试剂盒的牙周病原菌抗原蛋白、以及使用该试剂盒的检测血液试样的牙周病原菌血浆或血清抗体效价的方法，该试剂盒能涵盖由于变化的牙周病原菌的抗原性和检查对象的多样的免疫反应性而产生的多样的抗原抗体反应，能以高精度检查具有多样的免疫表型的广大范围内的患者的牙周病，并且能用自动化的机器进行高速处理。用于解决技术问题的手段基于该课题，本专利技术人对牙周病原菌蛋白的筛选进行了研究，该牙周病原菌蛋白即使种类少，也能涵盖多样的抗原抗体反应，能以良好的精度判定牙周病。其结果是，本专利技术人发现，特定的牙周病原菌蛋白的组合与从牙周病患者中分离的血液试样中的血浆抗体特异性地反应，通过选择性地使用这些细菌蛋白的组合，能涵盖多样的抗原抗体反应，能以良好的精度检测血液试样，并且能用自动化的机器进行高速处理，从而完成了本专利技术。即，本专利技术提供：［1］牙周病原菌血浆或血清抗体效价检测试剂盒，其包含具有序列编号：1、3、9、15、19、31、41、43、63、65和67的氨基酸序列的一系列多肽。［2］上述[1]所述的牙周病原菌血浆或血清抗体效价检测试剂盒，其进一步包含具有序列编号：5和37的氨基酸序列的多肽。［3］上述[1]或[2]所述的牙周病原菌血浆或血清抗体效价检测试剂盒，其进一步包含具有序列编号：23、35和47的氨基酸序列的多肽。［4］上述[1]～[3]中任一项所述的牙周病原菌血浆或血清抗体效价检测试剂盒，其进一步包含具有序列编号：17的氨基酸序列的多肽。［5］改性多肽，其具有序列编号：63的氨基酸序列。［6］上述[5]所述的改性多肽，其包含由序列编号：64的核苷酸序列编码的氨基酸序列。［7］改性多肽，其具有序列编号：65的氨基酸序列。［8］上述[7]所述的改性多肽，其包含由序列编号：66的核苷酸序列编码的氨基酸序列。［9］改性多肽，其具有序列编号：67的氨基酸序列。［10］上述[9]所述的改性多肽，其包含由序列编号：68的核苷酸序列编码的氨基酸序列。［11］改性多肽，其具有序列编号：141的氨基酸序列。［12］上述[11]所述的改性多肽，其包含由序列编号：142的核苷酸序列编码的氨基酸序列。［13］改性多肽，其具有序列编号：145的氨基酸序列。［14］上述[13]所述的改性多肽，其包含由序列编号：146的核苷酸序列编码的氨基酸序列。［15］牙周病原菌血浆或血清抗体效价检测试剂盒，其包含具有选自序列编号：1、3、5、9、15、17、19、23、31、35、37、41、43、47、63、65、67、141、143、145、147、151、153和155中的一种或两种以上的氨基酸序列的多肽。［16］上述[15]所述的牙周病原菌血浆或血清抗体效价检测试剂盒，其中，所述多肽是具有选自序列编号：3、5、15、19、31、41、141和145中的一种或两种以上的氨基酸序列的多肽。［17］上述[15]所述的牙周病原菌血浆或血清抗体效价检测试剂盒，其中，所述多肽是由选自序列编号：2、4、6、10、16、18、20、24、32、36、38、42、44、48、64、66、68、142、144、146、148、152、154和156中的一种或两种以上的多核苷酸序列编码的多肽。［18］测定从人身体中分离的血液试样中的针对牙周病原菌的抗体效价的方法，该方法包括使该血液试样与牙周病原菌抗原多肽接触的步骤，该方法的特征在于，所述牙周病原菌抗原多肽是具有选自序列编号：1、3、5、9、15、17、19、23、31、35、37、41、43、47、63、65、67、141、143、145、147、151、153和155中的一种或两种以上的氨基酸序列的多肽。［19］测定从人身体中分离的血液试样中的针对牙周病原菌的抗本文档来自技高网...

【技术保护点】
牙周病原菌血浆或血清抗体效价检测试剂盒，其包含具有序列编号：151的氨基酸序列的多肽。

【技术特征摘要】
2010.12.15 JP 2010-2792681.牙周病原菌血浆或血清抗体效价检测试剂盒，其包含具有序列编号：151的氨基酸序列的多肽。2.权利要求1所述的牙周病原菌血浆或血清抗体效价检测试剂盒，其中，所述多肽是由序列编号：152的多核苷酸序列编码的...

【专利技术属性】
技术研发人员：野添干雄，
申请(专利权)人：新时代株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP