Hendra和Nipah病毒G糖蛋白免疫原性组合物制造技术

本发明专利技术涉及Hendra病毒和Nipah病毒免疫原性组合物以及使用方法。本发明专利技术进一步涉及包含Hendra病毒G糖蛋白的免疫原性组合物，以及预防Nipah病毒感染和疾病的方法。本发明专利技术还涉及区分接种本发明专利技术的所述免疫原性组合物的受试者与感染Hendra和/或Nipah病毒的受试者的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及免疫原性和疫苗组合物，其包含来自Hendra病毒(HeV)和/或Nipah病毒(NiV)的G糖蛋白，并且涉及与其相关的使用方法。本专利技术还涉及包含适用于预防由NiV引起的感染和疾病的来自HeV的G糖蛋白的组合物。
技术介绍
NiV的导致大量人类灾祸的复发型发作最近已很成问题(参见例如Butler(2000)Nature429,7；Gurley等,(2007)EmergingInfectiousDiseases13(7),1031-1037)。病例研究已经将人的疾病与来自猪的动物传染病传播联系起来(参见例如Parashar等,(2000)JInfectDis.181,1755-1759)。还已知HeV会导致人和动物的灾祸，并且在基因和免疫学上与NiV紧密相关。Nipah病毒与Hendra病毒都是美国国家过敏症和传染病研究所生物防御问题C类优先试剂，并且是USDA-APHISHigh-ConsequenceTier3外来兽疫试剂，这意谓关于对策储备要求，其在程序优先级方面得到极大考虑。目前有一种得到许可的用于预防由Hendra病毒引起的感染或疾病的疫苗(HeV；Zoetis)；而不存在用于预防Nipah病毒感染的得到许可的疫苗。因为这些病毒是动物传染病的4级生物安全试剂(BSL-4)，所以与安全问题关联的疫苗生产和/或诊断具有极高成本并且是困难的。多个团队已经证明基于源自HeV(参见例如McEachern等,(2008)Vaccine26,3842-3852；Bossart等,(2012)SciTranslMed.4(146),1-8)或源自NiV(参见例如Mungall等,(2006)JVirol.80(24),12293-12302；Weingartl等,(2006)JVirol.80(16),7929-7938)的抗原的重组型G蛋白疫苗可提供针对感染的保护。然而，无一已成功商业化这些疫苗中的任一种。因此，仍需要允许高产量生产的Nipah病毒或Hendra病毒疫苗和诊断剂。副粘病毒如HeV和NiV在病毒颗粒的包膜中具有两种主要的膜锚定糖蛋白。将病毒颗粒与宿主细胞上的受体连接所需的一种糖蛋白命名为血凝素-神经氨酸酶蛋白(HN)或血凝素蛋白(H)，并且另一个是糖蛋白(G)，其既不具有血细胞凝集活性也不具有神经氨酸酶活性。连接糖蛋白是II型膜蛋白，其中分子的氨基(N)端向着细胞质定向并且蛋白质的羧基(C)端是细胞外的。另一种主要糖蛋白是融合(F)糖蛋白，其为含有两个七肽重复(HR)区域和疏水性融合肽的I类三聚融合包膜糖蛋白。HeV和NiV通过与pH值无关的进入受体宿主细胞的膜融合过程、通过其连接G糖蛋白与F糖蛋白在受体结合之后的一致行动来感染细胞。HeV和NiV连接G糖蛋白的主要功能在于将适当受体接合在宿主细胞的表面上，对于大部分充分表征的副粘病毒来说为唾液酸部分。HeV和NiVG糖蛋白利用宿主细胞蛋白受体肝配蛋白B2和/或肝配蛋白B3，并且已经开发出阻断通过G糖蛋白实现的病毒连接的抗体(WO2006137931,Bishop(2008)J.Virol.82:11398-11409)。此外，已经开发出还使用G糖蛋白作为产生针对HeV和NiV感染的免疫保护反应的手段的G糖蛋白的疫苗(WO2009117035)。K.Bossart等(JournalofVirology,第79卷,第6690-6702页,2005)和B.Mungall等(JournalofVirology,第80卷,第12293-12302页,2006)合理地提出，Hendra病毒G糖蛋白可能交叉预防由Nipah引起的病毒感染。当然，待解决的问题是提供增强交互保护并且使其高效并且在医学上和商业上实用的高效疫苗组合物。HeV和/或NiVG糖蛋白与生物学上可接受的佐剂在疫苗中的组合代表了开发有效HeV和NiV疫苗中的进步，这是考虑到当这些组分组合施用时，有着免疫反应性增强与佐剂副作用减小的潜力。
技术实现思路
本专利技术涵盖一种免疫原性组合物，其包含Hendra和/或Nipah病毒G蛋白、佐剂和一种或多种赋形剂，其量会在向受试者施用之后有效引发针对Hendra和/或Nipah病毒的中和抗体的产生。在一些实施方案中，可溶性Hendra病毒G糖蛋白由原生HendraG糖蛋白的氨基酸73至604(SEQIDNO:2)组成。在一些实施方案中，可溶性Hendra病毒G糖蛋白由包含SEQIDNO:16的核苷酸64至1662的核苷酸序列编码。在一些实施方案中，可溶性Hendra病毒G蛋白以二聚体形式存在，其中每一可溶性Hendra病毒G糖蛋白二聚体亚单元由一个或多个二硫键连接。在一些实施方案中，可溶性Hendra病毒G蛋白以四聚体形式存在。在一些实施方案中，四聚体形式以由一个或多个二硫键非共价键联和/或连接的二聚体的二聚体形式存在。在一些实施方案中，可溶性Hendra病毒G蛋白的浓度可为在免疫原性组合物中约5μg/ml至250μg/ml(也参见WO2006/085979)。在一些实施方案中，佐剂可为水包油乳液。在一些实施方案中，佐剂可为SP-油。在一些实施方案中，佐剂可以包含皂角苷、固醇、季铵化合物、聚合物、糖脂和免疫刺激性低核苷酸。在一些实施方案中，本专利技术还涵盖一种在受试者中产生针对Hendra和/或Nipah病毒的中和抗体反应的方法，其包括以有效产生中和抗体反应的量和持续时间向所述受试者施用本文所述的免疫原性组合物。在一些实施方案中，中和抗体反应会减少Hendra和/或Nipah病毒在受试者体内复制，并且还可以减少Hendra和/或Nipah病毒在受试者体内脱落。在一些实施方案中，受试者已经暴露于Hendra和/或Nipah病毒，而在其它实施方案中，受试者正遭受Hendra和/或Nipah病毒感染。在一些实施方案中，本专利技术涵盖一种在受试者中产生针对Hendra病毒的中和抗体反应的方法，其包括以有效产生中和抗体反应的量和持续时间向所述受试者施用本文所述的免疫原性组合物。在一些实施方案中，本专利技术涵盖一种在受试者中产生针对Nipah病毒的中和抗体反应的方法，其包括以有效产生中和抗体反应的量和持续时间向所述受试者施用本文所述的免疫原性组合物。在一些实施方案中，肌肉内施用免疫原性组合物。在一些实施方案中，分多次剂量施用免疫原性组合物，并且第二剂在第一剂之后至本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种免疫原性组合物，其包含Hendra病毒G糖蛋白、水包油乳液佐剂和一种或多种赋形剂，其量会在向受试者施用之后有效引发针对Nipah病毒的中和抗体的产生。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.09.05 US 61/874,0851.一种免疫原性组合物，其包含Hendra病毒G糖蛋白、水包油
乳液佐剂和一种或多种赋形剂，其量会在向受试者施用之后有效引发
针对Nipah病毒的中和抗体的产生。
2.如权利要求1所述的免疫原性组合物，其中所述水包油乳液佐
剂包括微流化油乳液，所述微流化油乳液包含聚氧化乙烯-聚氧化丙烯
嵌段共聚物、角鲨烷、聚氧化乙烯失水山梨糖醇单油酸酯，以及缓冲
盐溶液。
3.如权利要求2所述的免疫原性组合物，其中所述聚氧化乙烯-
聚氧化丙烯嵌段共聚物的最终浓度为0.2％、所述角鲨烷的最终浓度为
0.4％，并且所述聚氧化乙烯失水山梨糖醇单油酸酯的最终浓度为
0.032％。
4.如权利要求1所述的免疫原性组合物，其中所述可溶性Hendra
病毒G糖蛋白由原生HendraG糖蛋白(SEQIDNO:2)的氨基酸73至
604组成。
5.如权利要求4所述的免疫原性组合物，其中所述可溶性Hendra
病毒G糖蛋白由包含SEQIDNO:16的核苷酸64至1662的核苷酸序
列编码。
6.如权利要求1所述的免疫原性组合物，其中所述可溶性Hendra
病毒G糖蛋白以二聚体形式存在。
7.如权利要求6所述的免疫原性组合物，其中每一可溶性Hendra
病毒G糖蛋白二聚体亚单元由一个或多个二硫键连接。
8.如权利要求1所述的免疫原性组合物，其中所述可溶性Hendra

\t病毒G糖蛋白以四聚体形式存在。
9.如权利要求1所述的免疫原性组合物，其中可溶性Hendra病毒
G糖蛋白的所述浓度为约5μg/ml至约250μg/ml。
10.如权利要求1至9中任一项所述的免疫原性组合物，其中所述
受试者为人、马、奶牛、绵羊、猪、山羊、鸡、狗或猫。
11.一种在受试者中产生针对Nipah病毒的中和抗体反应的方法，
其包括以有效产生所述中和抗体反应的量和持续时间向所述受试者...

【专利技术属性】
技术研发人员：JM哈达姆，J黄，PJ多米诺夫斯基，
申请(专利权)人：硕腾服务有限责任公司，
类型：发明
国别省市：美国;US