蜡样芽孢杆菌BCJB01在防治葡萄溃疡病方面的应用制造技术

本发明专利技术公开了蜡样芽孢杆菌BCJB01在防治葡萄溃疡病方面的应用，并公开了一种蜡样芽孢杆菌BCJB01的生防菌剂悬浮剂，该悬浮剂对葡萄果穗的防治效果在76.8%以上，对葡萄果粒的防治效果在90.1%以上。

【技术实现步骤摘要】
蜡样芽孢杆菌BCJB01在防治葡萄溃疡病方面的应用
本专利技术涉及一种蜡样芽孢杆菌制剂及应用，具体为蜡样芽孢杆菌BCJB01在防治葡萄溃疡病方面的应用，属于生物防治领域。
技术介绍
葡萄溃疡病（Grapevinecanker）是一种严重的葡萄病害，引起叶斑，枝梢枯萎、坏死，枝干、茎部溃疡，果实和种子腐烂等症状，在全世界主要葡萄产区均有报道，并造成极为严重的经济损失。美国加州每年因溃疡病的损失超过2.6亿美元；澳大利亚南部，葡萄座腔菌科的真菌与葡萄顶枯病病菌Eutypellavitis混合侵染达60%，对葡萄造成巨大损失。在我国20个葡萄主种植省份也均有发生，病害造成葡萄减产3%至8%，严重地区减产达10%至20%，个别地区葡萄园减产达50%以上。引起溃疡病的病原菌种类很多，国外的多数研究认为，造成葡萄溃疡病的病原主要是子囊菌中的葡萄座腔菌属Botryosphaeriaspp.，到目前为止，已发现葡萄座腔菌科的15个种能引起葡萄溃疡病，我国报道的引起葡萄溃疡病的病原主要为：葡萄座腔菌Botryosphaeriadothidea、可可毛色二孢Lasidiplodiatherbromae、色二胞属Diplodiaseriata、小新壳梭孢Neofusicoccumparvum。其中B.dothidea和L.theobromae是主要致病种群。目前常用的预防及防治该病害的方法有：农田管理改善、应用抗性品种、化学药剂防治，但效果不甚明显，且化学农药施用不当造成了一系列的环境及健康问题。随着生活水平的提高，人们对绿色食品、有机食品需求越来越大，对支撑其生产的绿色、无污染、高效生物农药的需求也日益扩大。国内外也开展了相关的研究，如宋雅琴等通过筛选，推荐使用抑霉唑乳油防治葡萄溃疡病Lasidiplodiatherbromae；刘梅等针对葡萄溃疡病Botryosphaeriarhodina、Botryosphaeriadothidea建议采用嘧菌酯、苯醚甲环唑或寡雄腐霉果穗蘸药或喷施进行防治，但只停留在实验室阶段。国内防治葡萄溃疡病的专利共2个，其中1个为生物防治菌剂，与市场需求严重不符，因此研制高效防治葡萄溃疡病的微生物制剂成为市场急需。
技术实现思路
本专利技术的目的就是针对上述存在的缺陷而提供一种蜡样芽孢杆菌BCJB01在防治葡萄溃疡病方面的应用。该蜡样芽孢杆菌在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101，其保藏编号是：CGMCCNO.10477，菌种的拉丁文名称是Bacilluscereus，参据的微生物（株）：BCJB01，保藏日期是2015年1月30日。本专利技术同时公开了一种蜡样芽孢杆菌BCJB01的生防菌剂悬浮剂，该悬浮剂对葡萄果穗的防治效果在76.8%以上，对葡萄果粒的防治效果在90.1%以上。本专利技术的技术方案为，蜡样芽孢杆菌BCJB01在防治葡萄溃疡病方面的应用。蜡样芽孢杆菌BCJB01对葡萄座腔菌和可可毛色二孢有抑制作用。将蜡样芽孢杆菌BCJB01发酵液制备成生防菌剂进行葡萄溃疡病的防治。所述的生防菌剂为悬浮剂，由蜡样芽孢杆菌BCJB01发酵液、N-十二烷基-β-氨基丙酸钠、羧甲基纤维素、硫酸苯磺酸钠、2,6-吡啶二羧酸钙以及肽聚糖组成。所述的悬浮剂由以下成分组成：蜡样芽孢杆菌BCJB01发酵液1000mLN-十二烷基-β-氨基丙酸钠20~25g羧甲基纤维素3~5g硫酸苯磺酸钠2~3g2,6-吡啶二羧酸钙0.1~0.2g肽聚糖0.1~0.2g。蜡样芽孢杆菌BCJB01发酵液中芽孢含量为不低于55×108cfu/mL。悬浮剂中有效活性成分含量不低于50×108cfu/mL。悬浮剂中各组分粒径不大于5μm。本专利技术的有益效果为：本专利技术中蜡样芽孢杆菌BCJB01在PDA平板上对B.dothidea和L.theobromae有较好的抑制作用，抑菌带宽度分别为7.5mm和9.5mm。由蜡样芽孢杆菌BCJB01为有效成分制备的悬浮剂可有效防治由B.dothidea和L.theobromae等引起的葡萄溃疡病，对葡萄果穗溃疡病的防治效果达到76.8%以上，对葡萄果粒溃疡病的防治效果达到90.1%以上。本专利技术的悬浮剂中有效活性成分为蜡样芽孢杆菌BCJB01的芽孢，悬浮剂中芽孢含量不低于50×108cfu/mL，悬浮剂中N-十二烷基-β-氨基丙酸钠为助剂和分散剂，它具有良好的耐强碱、强酸和电解质性能及易于生物降解的特性，羧甲基纤维素为增稠剂，其它成分为保护剂，可保护芽孢的活性，延长悬浮剂的保质期。悬浮剂中各组分的粒径不大于5μm。附图说明：图1所示为为蜡样芽孢杆菌BCJB01在PDA平板上对B.dothidea的抑菌带大小；图2所示为蜡样芽孢杆菌BCJB01在PDA平板上对L.theobromae的抑菌带大小。具体实施方式：为了更好地理解本专利技术，下面用具体实例来详细说明本专利技术的技术方案，但是本专利技术并不局限于此。实施例1蜡样芽孢杆菌BCJB01的平板抑菌作用在PDA平板中央接种直径5mm的病原真菌菌块，在平板边缘距中心35mm处接种蜡样芽孢杆菌BCJB01，28℃培养，记录抑菌带宽度。结果见说明书附图，蜡样芽孢杆菌BCJB01对B.dothidea（图1）和L.theobromae（图2）在PDA平板上均有抑制作用，可产生明显的抑菌带，抑菌带宽度分别为7.5mm和9.5mm。实施例2悬浮剂制备制备蜡样芽孢杆菌BCJB01的发酵液，发酵结束芽孢含量达到55~60×108cfu/mL，按下述比例制备悬浮剂。发酵液1000mLN-十二烷基-β-氨基丙酸钠20~25g羧甲基纤维素3~5g硫酸苯磺酸钠2~3g2,6-吡啶二羧酸钙0.1~0.2g肽聚糖0.1~0.2g。该悬浮剂中有效活性成分为蜡样芽孢杆菌BCJB01的芽孢，悬浮剂中芽孢含量不低于50×108cfu/mL，悬浮剂中N-十二烷基-β-氨基丙酸钠为助剂和分散剂，它具有良好的耐强碱、强酸和电解质性能及易于生物降解的特性，羧甲基纤维素为增稠剂，其它成分为保护剂，可保护芽孢的活性，延长悬浮剂的保质期。悬浮剂中各组分的粒径不大于5μm。实施例3悬浮剂对葡萄溃疡病的大田防治效果试验试验地点：广西省罗城县四把镇四把社区水源毛葡萄基地。葡萄品种：毛葡萄。试验设3个处理，处理1为BCJB01悬浮剂，100倍稀释液；处理2为己唑·嘧菌酯，60倍稀释液；处理3为清水对照，每个处理设3个重复。处理方式：稀释喷雾。用药时间：2015年5月27日，2015年6月17日，2015年6月27日，大约间隔7~10d，根据天气情况进行。调查时间：2015年8月25日。试验结果表明（表1），本专利技术悬浮剂对广西省罗城县四把镇四把社区水源毛葡萄基地的葡萄溃疡病有较好的防治效果，与对照药剂间存在显著性差异（p＜0.01）。其中对果穗的防治效果达到了76.8%，对果粒的防治效果达到了90.1%。表1本专利技术悬浮剂对广西罗城葡萄溃疡病的大田防治效果处理果穗发病率%果穗防效%果粒发病率%果粒防效%本专利技术悬浮剂22.9±1.89A76.85.6±0.35A90.1己唑·嘧菌酯71.6±2.66B27.530.3±7.10B46.9清水98.8±2.14C-57.本文档来自技高网...

【技术保护点】
蜡样芽孢杆菌BCJB01在防治葡萄溃疡病方面的应用。

【技术特征摘要】
1.蜡样芽孢杆菌BCJB01在防治葡萄溃疡病方面的应用，其特征在于，蜡样芽孢杆菌BCJB01对葡萄座腔菌和可可毛色二孢有抑制作用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，蜡样芽孢杆菌（Bacilluscereus）BCJB01，其保藏号为CGMCCNO.10477。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，将蜡样芽孢杆菌BCJB01发酵液制备成生防菌剂进行葡萄溃疡病的防治。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的生防菌剂为悬浮剂，由蜡样芽孢杆菌BCJB01发酵液、N-十二烷基-β-氨基丙酸钠、羧甲基纤维素、硫酸苯磺酸钠、2,6-吡啶二羧酸钙...

【专利技术属性】
技术研发人员：李纪顺，陈凯，王贻莲，谢雪迎，扈进冬，杨合同，张力群，
申请(专利权)人：山东省科学院生物研究所，
类型：发明
国别省市：山东;37