一种促进农业废弃物快速腐解的复合菌剂及其制作方法技术

本发明专利技术公开了一种促进农业废弃物快速腐解的复合菌剂，由以下重量份的原料制备而成：米曲霉培养物40‑60份、酵母菌培养物10‑20份、黑曲霉培养物10‑20份、枯草芽孢杆菌培养物10‑20份和乳酸菌培养物1‑2份。本发明专利技术的复合菌剂选用的米曲霉、酵母菌、黑曲霉、枯草芽孢杆菌、乳酸菌安全性高，不产生有毒副产物，在这几种微生物的协同作用下，可以加速农作物秸秆等农业废弃物的降解，降解速率高，且秸秆中纤维素降解效率高。此外本发明专利技术还提供了一种促进农业废弃物快速腐解的复合菌剂的制作方法。

Composite bacterial agent for accelerating quick dissolution of agricultural waste and preparation method thereof

The invention discloses a composite agent promote agricultural waste quickly rotten, by weight of the raw materials prepared by Aspergillus cultures of 40 60 copies, 20 copies of 10 yeast culture, Aspergillus niger 10 20, Bacillus subtilis 20 and 10 cultures milk acid bacteria culture of 1 2. The invention of the compound bacteria selected yeast, Aspergillus oryzae, Aspergillus niger, Bacillus subtilis, lactic acid bacteria, high safety, no toxic by-products in the synergistic effect of these microorganisms, can accelerate the degradation of crop stalks and other agricultural wastes, the degradation rate is high, and the high efficiency of straw cellulose degradation. In addition, the invention also provides a method for making a composite microbial inoculum for quick degradation of agricultural wastes.

【技术实现步骤摘要】
一种促进农业废弃物快速腐解的复合菌剂及其制作方法
本专利技术属于微生物降解农业废弃物
，具体涉及一种促进农业废弃物快速腐解的复合菌剂及其制作方法。
技术介绍
我国是农业生产大国，每年产生大量的农业废弃物，尤其是农作物秸秆，包括玉米秸秆、小麦秸秆、高粱秸秆、水稻秸秆、动物粪便等，这些秸秆中含有大量的碳水化合物、蛋白质和脂肪，以作物秸秆为主的农业废弃物如果不加以利用，将其丢弃，就会造成大量资源浪费。现有技术中，农作物秸秆等废弃物主要用作牲畜饲料的主要原料，其在还田腐解方面研究较少，其腐解技术更是研究的甚少。在生物领域，微生物的协同作用一直都是学者们研究的热点，当不同的微生物在相同的环境下生长一段时间后，它们之间的拮抗和协同作用，使得其复合微生物产生的效果大于单个微生物产生的效果。在农业菌剂方面具有良好的应用前景。目前最农业废弃物腐解菌剂是EM菌，对粪便的腐熟效果较好，但是秸秆类腐解过程中通常需要添加动物粪便，单独的EM菌降解秸秆的速率较慢，秸秆中纤维素降解效率不佳。
技术实现思路
本专利技术提供的一种促进农业废弃物快速腐解的复合菌剂及其制作方法，解决了现有EM复合菌剂降解秸秆的速率较慢，秸秆中纤维素降解效率不佳的问题。本专利技术的目的是提供一种促进农业废弃物快速腐解的复合菌剂，包括以下步骤：由以下重量份的原料制备而成：米曲霉培养物40-60份、酵母菌培养物10-20份、黑曲霉培养物10-20份、枯草芽孢杆菌培养物10-20份和乳酸菌培养物1-2份；所述米曲霉培养物是将米曲霉接种于熟黄豆和小麦秸秆粉的混合物中，发酵2-3d而得；所述酵母菌培养物是将酵母菌接种于液体麦芽汁培养基中，培养2-3d而得；所述黑曲霉培养物是将黑曲霉接种于小麦秸秆粉和豆粕的混合物中，发酵2-3d而得；所述枯草芽孢杆菌培养物是将枯草芽孢杆菌接种于小麦秸秆粉和碳粉的混合物中，发酵18-24h而得；所述乳酸菌培养物是将乳酸菌接种于小麦秸秆粉、碳粉和氯化钠的混合物中，培养1-2d而得。优选的，上述促进农业废弃物快速腐解的复合菌剂，由以下重量份的原料制备而成：米曲霉培养物50份、酵母菌培养物15份、黑曲霉培养物15份、枯草芽孢杆菌培养物15份和乳酸菌培养物1份。优选的，上述促进农业废弃物快速腐解的复合菌剂，由以下重量份的原料制备而成：米曲霉培养物40份、酵母菌培养物20份、黑曲霉培养物20份、枯草芽孢杆菌培养物10份和乳酸菌培养物2份。优选的，上述促进农业废弃物快速腐解的复合菌剂中，所述米曲霉为米曲霉沪酿3.042或者米曲霉沪酿1.08；所述酵母菌为酿酒酵母；所述黑曲霉为黑曲霉AS3.316；所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌ACCCNo.03189；所述乳酸菌为耐盐乳酸菌sCGMCC3792或者双歧杆菌。优选的，上述促进农业废弃物快速腐解的复合菌剂中，所述复合菌剂中的有效活菌数为108个/克。本专利技术还提供了一种促进农业废弃物快速腐解的复合菌剂的制作方法，包括以下步骤：步骤1，制备米曲霉培养物步骤1.1，活化米曲霉菌种，并用无菌水洗脱米曲霉孢子，得到米曲霉孢子悬浮液；步骤1.2，将黄豆于水中浸泡4-6h，沥干水分，然后蒸熟，冷却至30-40℃，得到熟黄豆；将小麦秸秆磨成粉，过60目筛，得到小麦秸秆粉；然后将熟黄豆和小麦秸秆粉按照1:2的质量比例混合均匀，得到米曲霉培养基质；步骤1.3，向米曲霉培养基质中接种米曲霉孢子悬浮液，其中每千克米曲霉培养基质接种米曲霉孢子悬浮液5-10ml，混合均匀，然后于28-32℃发酵培养2-3d，得到米曲霉培养物；步骤2，制备酵母菌培养物将酵母菌接种于液体麦芽汁培养基中，18-25℃发酵培养2-3d，得到酵母菌培养物；步骤3，制备黑曲霉培养物步骤3.1，活化黑曲霉菌种，并用无菌水洗脱黑曲霉孢子，得到黑曲霉孢子悬浮液；步骤3.2，将豆粕于水中浸泡2-3h，沥干水分，然后蒸熟，冷却至30-40℃，得到熟豆粕；将小麦秸秆磨成粉，过60目筛，得到小麦秸秆粉；然后将熟豆粕和小麦秸秆粉按照1:2的质量比例混合均匀，得到黑曲霉培养基质；步骤3.3，向黑曲霉培养基质中接种黑曲霉孢子悬浮液，其中每千克黑曲霉培养基质接种黑曲霉孢子悬浮液5-10ml，混合均匀，然后于28-32℃发酵培养2-3d，得到黑曲霉培养物；步骤4，制备枯草芽孢杆菌培养物步骤4.1，活化枯草芽孢杆菌菌种，并将活化的枯草芽孢杆菌接种于LB液体培养基中，36-38℃条件下培养20h，得到枯草芽孢杆菌种子液；步骤4.2，将小麦秸秆磨成粉，过60目筛，得到小麦秸秆粉；然后将小麦秸秆粉和80目的碳粉按照10:1的质量比例混合均匀，得到枯草芽孢杆菌培养基质；步骤4.3，向枯草芽孢杆菌培养基质中接种枯草芽孢杆菌种子液，其中每千克枯草芽孢杆菌培养基质接种枯草芽孢杆菌种子液5-10ml，接着加入相当于枯草芽孢杆菌培养基质30％质量的无菌水，混合均匀，然后于35-38℃发酵培养2-3d，得到枯草芽孢杆菌培养物；步骤5，制备乳酸菌培养物步骤5.1，活化乳酸菌菌种，并将活化的乳酸菌接种于MRS液体培养基中，28-30℃条件下培养2-3d，得到乳酸菌种子液；步骤5.2，将小麦秸秆磨成粉，过60目筛，得到小麦秸秆粉；然后将小麦秸秆粉、氯化钠和80目的碳粉按照10:0.4:1的质量比例混合均匀，得到乳酸菌培养基质；步骤5.3，向乳酸菌培养基质中接种乳酸菌种子液，其中每千克乳酸菌培养基质接种乳酸菌种子液5-10ml，接着加入相当于枯草芽孢杆菌培养基质30％质量的无菌水，混合均匀，然后于28-30℃发酵培养2-3d，得到枯草芽孢杆菌培养物；步骤6，按以下重量份称取各组分：米曲霉培养物40-60份、酵母菌培养物10-20份、黑曲霉培养物10-20份、枯草芽孢杆菌培养物10-20份和乳酸菌培养物1-2份，充分混合均匀，于28-30℃培养24h，得到湿菌剂，最后于35-40℃条件下干燥至湿菌剂的水分含量低于10％，得到促进农业废弃物快速腐解的复合菌剂，0-4℃保存备用。与现有技术相比，本专利技术的促进农业废弃物快速腐解的复合菌剂具有以下有益效果：(1)选用的米曲霉、酵母菌、黑曲霉、枯草芽孢杆菌、乳酸菌安全性高，不产生有毒副产物，即使使用过量，也不会造成环境微生物污染，在这几种微生物的协同作用下，可以加速农作物秸秆等农业废弃物的降解，降解速率高，且秸秆中纤维素降解效率高。(2)制备方法中，每一个菌种都选用了各自专用的培养基，在扩培微生物的同时，加速纤维素酶等代谢产物的产生，从而为秸秆中纤维素的快速降解提供了物质基础；微生物的协同作用是生物领域的一个重要研究方向，我们将各个微生物的培养物混合均匀后再培养24h，使微生物之间达到生长平衡，这样才能在降解秸秆时达到最高的效率，以最少的支出获得高回报。(3)我们专利技术的复合菌剂中，纤维素酶活力、蛋白酶活力是EM菌产生的酶活的60.2倍和28.5倍以上。具体实施方式下面对专利技术的具体实施方式进行详细描述，但应当理解本专利技术的保护范围并不受具体实施方式的限制。下列实施例中未注明具体条件的试验方法，通常按照常规条件，或者按照各制造商所建议的条件。当实施例给出数值范围时，应理解，除非本专利技术另有说明，每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。除非另外定义，本专利技术中使本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种促进农业废弃物快速腐解的复合菌剂，其特征在于，由以下重量份的原料制备而成：米曲霉培养物40‑60份、酵母菌培养物10‑20份、黑曲霉培养物10‑20份、枯草芽孢杆菌培养物10‑20份和乳酸菌培养物1‑2份；所述米曲霉培养物是将米曲霉接种于熟黄豆和小麦秸秆粉的混合物中，发酵2‑3d而得；所述酵母菌培养物是将酵母菌接种于液体麦芽汁培养基中，培养2‑3d而得；所述黑曲霉培养物是将黑曲霉接种于小麦秸秆粉和豆粕的混合物中，发酵2‑3d而得；所述枯草芽孢杆菌培养物是将枯草芽孢杆菌接种于小麦秸秆粉和碳粉的混合物中，发酵18‑24h而得；所述乳酸菌培养物是将乳酸菌接种于小麦秸秆粉、碳粉和氯化钠的混合物中，培养1‑2d而得。

【技术特征摘要】
1.一种促进农业废弃物快速腐解的复合菌剂，其特征在于，由以下重量份的原料制备而成：米曲霉培养物40-60份、酵母菌培养物10-20份、黑曲霉培养物10-20份、枯草芽孢杆菌培养物10-20份和乳酸菌培养物1-2份；所述米曲霉培养物是将米曲霉接种于熟黄豆和小麦秸秆粉的混合物中，发酵2-3d而得；所述酵母菌培养物是将酵母菌接种于液体麦芽汁培养基中，培养2-3d而得；所述黑曲霉培养物是将黑曲霉接种于小麦秸秆粉和豆粕的混合物中，发酵2-3d而得；所述枯草芽孢杆菌培养物是将枯草芽孢杆菌接种于小麦秸秆粉和碳粉的混合物中，发酵18-24h而得；所述乳酸菌培养物是将乳酸菌接种于小麦秸秆粉、碳粉和氯化钠的混合物中，培养1-2d而得。2.根据权利要求1所述的促进农业废弃物快速腐解的复合菌剂，其特征在于，由以下重量份的原料制备而成：米曲霉培养物50份、酵母菌培养物15份、黑曲霉培养物15份、枯草芽孢杆菌培养物15份和乳酸菌培养物1份。3.根据权利要求1所述的促进农业废弃物快速腐解的复合菌剂，其特征在于，由以下重量份的原料制备而成：米曲霉培养物40份、酵母菌培养物20份、黑曲霉培养物20份、枯草芽孢杆菌培养物10份和乳酸菌培养物2份。4.根据权利要求1-3任一项所述的促进农业废弃物快速腐解的复合菌剂，其特征在于，所述米曲霉为米曲霉沪酿3.042或者米曲霉沪酿1.08；所述酵母菌为酿酒酵母；所述黑曲霉为黑曲霉AS3.316；所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌ACCCNo.03189；所述乳酸菌为耐盐乳酸菌CGMCC3792或者双歧杆菌。5.根据权利要求1-3任一项所述的促进农业废弃物快速腐解的复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂中的有效活菌数为108个/克。6.一种根据权利要求1所述的促进农业废弃物快速腐解的复合菌剂的制作方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，制备米曲霉培养物步骤1.1，活化米曲霉菌种，并用无菌水洗脱米曲霉孢子，得到米曲霉孢子悬浮液；步骤1.2，将黄豆于水中浸泡4-6h，沥干水分，然后蒸熟，冷却至30-40℃，得到熟黄豆；将小麦秸秆磨成粉，过60目筛，得到小麦秸秆粉；然后将熟黄豆和小麦秸秆粉按照1:2的质量比例混合均匀，得到米曲霉培养基质；步骤1.3，向米曲霉培养基质中接种米曲霉孢子悬浮液，其中每千克米曲霉培养基质接种米曲霉孢子悬浮液5-10ml，混合均匀，然后于28-32℃发酵培养2-3d，得到...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨飞，李继光，
申请(专利权)人：杨飞，
类型：发明
国别省市：河北,13