一组斑马鱼基因标志物及其在评估环境污染物致神经损伤风险中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一组斑马鱼基因标志物及其在评估环境污染物致神经损伤风险中的应用，属于污染物检测技术领域；一组用于评估环境污染物致神经损伤风险的斑马鱼基因标志物，包括：

【技术实现步骤摘要】
一组斑马鱼基因标志物及其在评估环境污染物致神经损伤风险中的应用


[0001]本专利技术属于污染物检测
，一组斑马鱼基因标志物及其在评估环境污染物致神经损伤风险中的应用
。

技术介绍

[0002]现代社会中污染是一个不可避免的问题，任何行业或家庭都会产生各种类型的污染物
。
污染物对环境和健康有极大的影响，因此必须进行检测和监测，以便采取必要的措施来减少或消除污染物
。
污染物的检测方法涉及许多领域，包括化学
、
物理
、
工程学和数据分析等等
。
常用的污染物检测方法有气相色谱法
、
液相色谱法
、
质谱法
、
原子吸收光谱法
、
核磁共振
、
海洋质量指数等
。
[0003]当然，也有很多常用的监测研究水体污染状况的生物检测方法，包括生物群落法
、
生产力测定法
、
残毒测定法
、
急性毒性试验等等
。
现存的污染物神经毒性检测方法是将目标化合物加入到斑马鱼的生长介质中，观察斑马鱼的行为反应是否受到影响，比如游泳速度旋转行为等
。
[0004]此外，斑马鱼与人基因具有
87
％的同源性，斑马鱼中尚有大量基因的新功能未被开发利用
。
目前急需一种科学
、
准确
、
迅速的环境污染物检测方法
。

技术实现思路

[0005]针对现有技术的不足，本专利技术提供了一组斑马鱼基因标志物及其在评估环境污染物致神经损伤风险中的应用
。
[0006]本专利技术的技术方案如下：
[0007]一组用于评估环境污染物致神经损伤风险的斑马鱼基因标志物，包括：
c6ast3、endou
和
tspan34
基因
。
[0008]一组斑马鱼基因标志物在评估环境污染物致神经损伤风险中的应用，所述斑马鱼基因标志物包括：
c6ast3、endou
和
tspan34
基因
。
[0009]根据本专利技术优选的，所述应用中，
c6ast3、endou
和
tspan34
基因的引物序列如下：
[0010]c6ast3
‑
RT
‑
F
：
GTCTGTGTCTGAACTGCTGC SEQ ID NO.1
；
[0011]c6ast3
‑
RT
‑
R
：
GAGGAGTAGTGGTTGGCGAT SEQ ID NO.2
；
[0012]endou
‑
RT
‑
F
：
TTGGCCAATGTGTCAGATGC SEQ ID NO.3
；
[0013]endou
‑
RT
‑
R
：
GCCGGTCTGAGAAGAAGGAASEQ ID NO.4
；
[0014]tspan34
‑
RT
‑
F
：
ATCAGCGGTGGACAGGTAAC SEQ ID NO.5
；
[0015]tspan34
‑
RT
‑
R
：
CCAGGAAGATGATGCCGTTG SEQ ID NO.6。
[0016]一种评估环境污染物致神经损伤风险的方法，包括如下步骤：
[0017](1)
将
6dpf
的斑马鱼分为空白对照组和检测组，空白对照组使用养鱼水进行培养，检测组用含环境污染物的养鱼水培养；
[0018](2)
培养
24
‑
25h
后，分别收集各组斑马鱼，并检测各组斑马鱼中的标志基因
c6ast3、endou
和
tspan34
的表达水平；与空白对照组相比，检测组斑马鱼的
c6ast3、endou
和
tspan34
三个基因表达均显著上升；则判断环境污染物有致神经损伤的风险
。
[0019]根据本专利技术优选的，步骤
(1)
中，斑马鱼品系为野生型
AB
斑马鱼
。
[0020]根据本专利技术优选的，步骤
(1)
中，每组斑马鱼3个平行，每个平行斑马鱼
20
‑
25
条
。
[0021]根据本专利技术优选的，步骤
(1)
中，养鱼水的配置方法：首先配置
E3
养鱼水，
E3
养鱼水的每升成分组成为
NaCl 14.62
‑
15g、KCl 0.63
‑
1.00g、CaCl
2 2.42
‑
2.9g、MgSO4·
7H2O 4.06
‑
4.98g、
余量为去离子水，然后将配置的
E3
养鱼水稀释
50
倍以上，得到养鱼水
。
[0022]进一步优选的，将配置的
E3
养鱼水稀释
50
倍，得到养鱼水
。
[0023]根据本专利技术优选的，步骤
(1)
中，环境污染物为废水
。
[0024]进一步优选的，环境污染物包括含铬废水
、
含砷废水
、
含铅废水
、
含汞废水
、
含铜废水
。
[0025]根据本专利技术优选的，步骤
(2)
中，将斑马鱼置于
28℃
恒温培养箱中培养
24
‑
25h。
[0026]根据本专利技术优选的，步骤
(2)
中，
c6ast3、endou
和
tspan34
基因的引物序列如下：
[0027]c6ast3
‑
RT
‑
F
：
GTCTGTGTCTGAACTGCTGC SEQ ID NO.1
；
[0028]c6ast3
‑
RT
‑
R
：
GAGGAGTAGTGGTTGGCGAT SEQ ID NO.2
；
[0029]endou
‑
RT
‑
F
：
TTGGCCAATGTGTCAGATGC SEQ ID本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一组用于评估环境污染物致神经损伤风险的斑马鱼基因标志物，包括：
c6ast3、endou
和
tspan34
基因
。2.
一组斑马鱼基因标志物在评估环境污染物致神经损伤风险中的应用，所述斑马鱼基因标志物包括：
c6ast3、endou
和
tspan34
基因
。3.
如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述应用中，
c6ast3、endou
和
tspan34
基因的引物序列如下：
c6ast3
‑
RT
‑
F
：
GTCTGTGTCTGAACTGCTGC SEQ ID NO.1
；
c6ast3
‑
RT
‑
R
：
GAGGAGTAGTGGTTGGCGAT SEQ ID NO.2
；
endou
‑
RT
‑
F
：
TTGGCCAATGTGTCAGATGC SEQ ID NO.3
；
endou
‑
RT
‑
R
：
GCCGGTCTGAGAAGAAGGAA SEQ ID NO.4
；
tspan34
‑
RT
‑
F
：
ATCAGCGGTGGACAGGTAAC SEQ ID NO.5
；
tspan34
‑
RT
‑
R
：
CCAGGAAGATGATGCCGTTG SEQ ID NO.6。4.
一种评估环境污染物致神经损伤风险的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)
将
6dpf
的斑马鱼分为空白对照组和检测组，空白对照组使用养鱼水进行培养，检测组用含环境污染物的养鱼水培养；
(2)
培养
24
‑
25h
后，分别收集各组斑马鱼，并检测各组斑马鱼中的标志基因
c6ast3、endou
和
tspan34
的表达水平；与空白对照组相比，检测组斑马鱼的
c6ast3、endou
和
tspan34
三个基因表达均显著上升；则判断环境污染物有致神经损伤的风险
。5.
如权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤
(1)
中，斑马鱼品系为野生型
AB
斑马鱼
。6.
如权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤
(1)
中，每组斑马鱼3个平行，每个平行斑马鱼
20
‑
25
条
。7.
如权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤
(1)
中，养鱼水的配置方法：首先配置
E3
养鱼水，
E3
养鱼水的每升成分组成为
NaCl 14.62
‑
15g、KCl 0.63

【专利技术属性】
技术研发人员：靳梦，高鑫，刘思宇，李宁，刘可春，康慧君，崔晓彤，
申请(专利权)人：山东省科学院生物研究所，
类型：发明
国别省市：