稳定的人生长激素液体制剂制造技术

本文公开了稳定的液体制剂，其包含人生长激素；L-赖氨酸、L-精氨酸或聚乙二醇300；以及聚(氧化乙烯)聚(氧化丙烯)共聚物、聚乙二醇-15聚羟基硬脂酸酯或聚乙二醇-35蓖麻油。

【技术实现步骤摘要】
【专利说明】 本申请是中国专利申请号200680055699. 5 (PCT/KR2006/002640)、申请日2006年 7月6日，专利技术名称为"稳定的人生长激素液体制剂"的分案申请。
本专利技术设及稳定的液体制剂，其包括人生长激素山-赖氨酸、心精氨酸或聚乙二 醇300 ;和聚（氧化乙締）聚（氧化丙締）共聚物、聚乙二醇-15聚径基硬脂酸醋或聚乙二 醇-35藍麻油。
技术介绍
在人脑垂体中产生的人生长激素是191个氨基酸的单链多肤，具有的分子量 为约22, 000道尔顿。人生长激素主要用于治疗儿童的垂体性保儒症巧ndocrinol. Rev. 4, 155, 1983)〇 人生长激素在药物制剂中倾向于为不稳定的。可W在溶液中生成包括脱酷胺化或 次硫酸化的产物W及二聚物或聚合物形式在内的生长激素降解产物。人生长激素的主要化 学降解反应是脱酷胺基化，其尤其是在149位的天冬酷胺残基的位置通过直接水解或通过 环状班巧酷亚胺中间体形成kasp-hGH、kis〇-asp-hGH、D-asp-hGH和D-is〇-asp-hGH来进 行。目前，认为人生长激素的运些脱酷胺化的产物没有毒性的或不改变的生物活性或受体 结合性能，但是与天然的人生长激素相比，亚讽的结构稳定性有所降低。 脱酷胺化的人生长激素对于用作药物来说是不希望的，因为其经历品质劣化，尽 管生物活性未改变，并且因此其可允许的含量通常由公开的纯度规格提供。另外，生长激素 聚集体例如二聚物或聚合物的形成引起不希望的免疫原性，在体内导致安全问题，并且产 生悬浮固体，引起外观问题，从而引起患者不满意。 蛋白质稳定性与水密切相关。人生长激素主要作为用W增加其稳定性的冻干 制剂市售，其必须在使用前重构。然而，已经对人生长激素的液体制剂进行了许多研究， 目的是改善对医生和患者的便利性。例如，设及Genentech'SNutropinAQ的美国专 利号6, 448, 225公开了人生长激素的含水制剂，其包括人生长激素、甘露糖醇、缓冲剂 和非离子型表面活性剂，其中作为优选举例说明了巧樣酸盐缓冲剂。韩国专利申请号 10-1999-0001217提供了稳定的含水制剂，其中将人生长激素溶解于包含苯扎氯锭的缓冲 溶液中，所述缓冲溶液是使用微酸性到中等酸性的缓冲剂制备的，优选马来酸盐缓冲剂。 韩国专利申请号10-1998-0052483描述了药学稳定的人生长激素液体制剂，其中优选由 乙酸钢和谷氨酸钢组成的缓冲溶液。另外，在韩国专利申请号10-1994-0702139中，Novo NordiskA/S描述了一种药物制剂，其包括生长激素，和选自Asp、lie、Val、Leu和化S的 氨基酸，或组氨酸的衍生物，或包括至少一种碱性氨基酸和至少一种酸性氨基酸的肤，W及 非离子型洗涂剂例如聚山梨醋或泊洛沙姆。NovoNordiskA/S目前上市了Norditropin SimpleXx，其包含人生长激素、组氨酸缓冲剂、非离子型表面活性剂、氯化钢、和防腐剂。 然而，如上所述，尽管已经进行了多种尝试来提供生长激素的液体制剂，但是仍需 要更稳定的生长激素液体制剂。
技术实现思路
阳00引技术问题 因此，本专利技术的目的是提供稳定的人生长激素液体制剂，其通过将特定的氨基酸 例如k赖氨酸或者k精氨酸、或聚乙二醇与特定的表面活性剂组合，W便使脱酷胺化产物 和聚集的形成最小化，从而相对于已知液体制剂增强了长期保存稳定性和便利性。【附图说明】 图1是表示本专利技术的液体制剂在25°c储存Ξ个月时人生长激素在脱酷胺基化和 聚集方面的剩余比例（％)的图。 图2是表示本专利技术的液体制剂在2°C到8°C储存一年时人生长激素在脱酷胺基化 和聚集方面的剩余比例（％)的图。 优选实施方式 在一个方面中，本专利技术设及稳定的液体制剂，其包括人生长激素、心赖氨酸或 k精氨酸、和聚（氧化乙締）聚（氧化丙締）共聚物、聚乙二醇-15聚径基硬脂酸醋或聚乙 二醇-35藍麻油。 意图为在本专利技术的液体制剂中被稳定化的人生长激素可W是天然存在的，或者可 W得自使用重组DNA技术用编码人生长激素的DNA转化的原核生物或真核生物。使用大肠 杆菌或酵母作为基因重组体宿主生产人生长激素的方法在文献中有所描述，例如韩国专利 号25013、韩国专利号316347、或韩国专利公开号10-1997-0006498。人生长激素可W是野 生型或其衍生物。 本专利技术的液体制剂包含k赖氨酸或k精氨酸作为稳定剂。优选的是所述稳定剂 的盐形式，例如k赖氨酸盐酸盐或k精氨酸盐酸盐。与其它常规的氨基酸稳定剂相比，所 述稳定剂表现出在人生长激素的液体制剂中在储存预定的时间段之后不产生聚集的好的 效果。上述的稳定剂，如表8中所示，在14天之后不发生聚集，因此表现出与用于国际专利 用于本专利技术的液体制剂中的聚（氧化乙締）聚（氧化丙締）共聚物（泊洛沙 姆）、聚乙二醇-15聚径基硬脂酸醋（聚乙二醇-15聚径基硬脂酸醋）或聚氧乙締酸藍麻 油ELP(聚乙二醇-35藍麻油）是非离子型表面活性剂。在多种非离子型表面活性剂中，在 本专利技术人使用上述表面活性剂将它们与特定的稳定剂组合时，发现液体制剂具有增强的稳 定性。与常规的聚山梨醋例如吐溫20或吐溫80相比，运些表面活性剂在人生长激素的脱 酷胺基化和聚集方面表现出好的效果（表5)。泊洛沙姆优选为泊洛沙姆188 (聚（氧化乙 締）聚（氧化丙締）共聚物188)或泊洛沙姆407 (聚（氧化乙締）聚（氧化丙締）共聚物 407)，更优选为泊洛沙姆188 (聚（氧化乙締）聚（氧化丙締）共聚物188)。 本专利技术的液体制剂可W另外包含本领域已知的添加剂，例如缓冲剂、等渗剂、防腐 剂或止痛剂。 所述缓冲剂可用于调节液体制剂的抑值而不影响人生长激素，并且示例为乙酸 盐、谷氨酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、巧樣酸盐和憐酸盐。优选巧樣酸钢或乙酸钢。从实施例4 的结果显而易见，缓冲剂不影响本专利技术液体制剂的稳定性。得到运些结果是因为本专利技术的 液体制剂的好的稳定性来源于特定的稳定剂和特定的表面活性剂的组合。缓冲剂在本专利技术 的液体制剂中W5-lOOmM、优选5-50mM的浓度存在。 可用于本专利技术的等渗剂可W包括氯化钢、甘露糖醇、薦糖、葡萄糖、山梨糖醇、或其 混合物。优选D-甘露糖醇。等渗剂在本专利技术的液体制剂中优选W20-50mg/ml的浓度存在。 可用于本专利技术的防腐剂可W包括苯甲醇、苯酪、和间甲酪。优选苯甲醇。苯甲醇起 到止痛剂W及防腐剂的作用。防腐剂在本专利技术的液体制剂中优选W1到9mg/ml范围的量 存在。 阳02U 在详细的方面中，本专利技术的液体制剂包含2. 5-7. 5mg/ml的人生长激素、每mg人生 长激素为0.01-1. 0% (w/v)的心赖氨酸或心精氨酸和0.01-1. 0% (w/v)的聚（氧化乙締） 聚（氧化丙締）共聚物、聚乙二醇-15聚径基硬脂酸醋或聚乙二醇-35藍麻油。在更详细 的方面中，该液体制剂包括2. 5-5. 5mg/ml的人生长激素；每mg人生长激素为0. 02-0. 5 % (w/v)的k赖氨酸或k精氨酸讯0. 1-0. 5% (w/v)的聚（氧化乙締）聚（氧化丙締）共 聚物、聚乙二醇-15聚径基硬脂酸醋或聚乙二醇-35藍麻油。 在优选的方面中，本发本文档来自技高网...

【技术保护点】
液体制剂，包含人生长激素、L‑赖氨酸或L‑精氨酸、和泊洛沙姆188，其中人生长激素以2.5‑5.5mg/ml范围的量存在；L‑赖氨酸或L‑精氨酸以每mg人生长激素为0.02‑0.5w/v％范围的量存在；且泊洛沙姆188以0.1‑0.5w/v％范围的量存在。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：金仙姬，郑尧景，张裁荣，李相吉，李玟锡，朴胜国，
申请(专利权)人：株式会社大熊，
类型：发明
国别省市：韩国;KR