本发明专利技术提供用于口服递送的组合物和采用VSP载体，例如贾第虫属可变表面蛋白(VSP)，递送治疗剂的治疗方法。VSP药物载体可以与生物活性肽(如胰岛素、胰高血糖素或hGH)组合，且可以口服或粘膜施用。VSP载体对酸性pH和蛋白水解降解具有抗性，且在胃肠道中保护治疗剂不被降解。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】作为用于口服药物递送的载体的原生动物变体特异性表面 蛋白（VSP) 对电子递交的序列表的引用 与本申请一起提交的电子递交ASCII文本文件的序列表（文件名：3181_001PC01_ sequence_listing_ST25.txt;大小：2,8138, 935 字节；创建日期：2013年7月 1 日）的内 容通过引用并入本文。 技术背景 本专利技术涉及使用多肽载体将治疗剂递送至需要该治疗剂的受试者的组合物和方 法。更具体地，本专利技术涉及作为用于递送治疗剂（如生物活性肽）的载体发挥作用的多肽， 如贾第虫属（Giardia sp.)可变表面蛋白（variable surface protein) (VSP)。 由于易于施用、患者依从性和成本，口服递送代表了递送预防性和治疗性药剂的 理想手段。然而，口服途径由于胃肠道（GIT)形成的众多屏障也是最困难的。主要的挑战 是在胃和小肠上部的化学和酶降解，以及缺乏足够的穿过胃的渗透性。胃中的低PH可以使 治疗剂遭受物理和化学降解。肽的物理降解一般涉及蛋白质的原始结构到更高阶结构的修 饰，这可能是吸附、聚集、展开、沉淀和/或完全/部分降解为其氨基酸成分的结果。化学降 解通常涉及键的裂解和导致新产物的形成。 贾第虫是能够在胃和小肠上部的恶劣环境条件下存活的肠道病原体。像许多 原生动物微生物一样，贾第虫发生抗原性变异（参见例如，Zambrano-Villa等，Trends Parasitol. 18:272-8(2002))，通过该机制它不断变换其主要的表面分子，从而允许 该寄生虫逃避宿主的免疫反应并建立慢性和/或复发性感染（参见例如，Nash，Mol. Microbiol. 45:585-90 (2002))。这些表面抗原属于变体-特异性表面蛋白（VSP)家族，其 是覆盖滋养体整个表面的膜内在蛋白。 VSP具有富含半胱氨酸的氨基末端区域以及包含跨膜区和短的胞质尾的保守 羧基末端结构域（图1A)。在贾第虫的基因组中存在大约200个VSP基因的集合，但在 任意给定时间只有一个VSP在该寄生虫的表面上表达（参见例如，Prucca等，Nature 456 (7223) : 750-4 (2008) ;Deitsch 等，Microbiol. Mol. Biol. Rev. 61:281-93 (1997)) 〇 因为贾第虫VSP的胞外部分使得该寄生虫能够在小肠上部的敌对环境内存活， 与抗原共价结合的VSP已被用于运送（shuttle)候选抗原。已经观察到当口服施用包含 与贾第虫抗原共价结合的VSP的疫苗时，该抗原完全保护动物不受贾第虫寄生虫的后续感 染，表明该抗原在通过GIT时保存下来（Rivero等，Nat. Med. 16(5):551-7(2010),参见例 如，PCT公开号WP2010/064204和W02011/120994,其整体在此通过引用并入本文）。 1型糖尿病通常在儿童和年轻成年人中诊断，并造成越来越大比例的国家医疗保 健支出。1型糖尿病是由免疫系统的功能障碍引起的自身免疫性疾病，它攻击并摧毁产生胰 岛素的胰岛的β-细胞。 施用外源胰岛素是可以用来控制与该疾病并发的血糖升高的唯一药物治 疗。相反，2型糖尿病的特征是胰岛素分泌和胰岛素作用两者的缺陷，胰岛素缺乏通常 在疾病过程的后期出现。在该疾病中，经常需要补充胰岛素来实现良好的葡萄糖水平 控制（参见例如，DeWitt&Hirsch, JAMA 289:2254-2264(2003))。具有不同类型的可 用的皮下胰岛素（Summers等，Clin. Ther. 26:1498-1505(2004))。然而，调查表明部 分2型糖尿病的患者由于预期的疼痛和不方便而对胰岛素治疗具有显著阻力（Peyrot 等，Diabetes Care 28:2673-2679(2005))。最年轻的和最年长的患者最不可能接受可注 射治疗，因此对想要开始胰岛素治疗的医生提出最大的挑战（Freemantle等，Diabetes Care 28:427-428 (2005))。因此，患者的偏好驱动了开发口服、鼻用和吸入的胰岛素制 剂的努力以避免皮下注射（Cefalu, Ann. Med. 33:579-586 (2001) ;Graham等州』叩1· J. Med. 356:497-502 (2007))。因此，通过口服途径递送胰岛素的选择仍然是有吸引力的治 疗策略。 胰高血糖素（胰腺分泌的肽激素）提高血糖水平。它的作用与降低血糖水平的胰 岛素的作用相反。胰高血糖素指示用于严重低血糖的治疗。因为1型糖尿病患者与稳定的 2型患者相比可能具有较少的血糖水平的增加，应当尽快给予补充的碳水化合物，尤其是对 儿童患者。当减少肠道蠕动是有利时，胰高血糖素还指示作为胃、十二指肠、小肠和结肠放 射学检查的辅助诊断。对于这种检查，胰高血糖素与抗胆碱能药物一样有效。然而，加入抗 胆碱能剂可能造成增加的副作用。在胰岛素的情况下，开发适合口服递送的胰高血糖素形 式是有吸引力的治疗策略。 生长激素缺乏是涉及脑垂体腺的失调，脑垂体产生生长激素和其他激素。人生 长激素（hGH)在人体中刺激生长和细胞繁殖，也在脂质、蛋白质和碳水化合物的代谢中 发挥作用。通常通过细菌发酵生产重组的hGH(Zeisel等，!1〇1'111.1^8.37(5即？12):5-13 (1992) ;Sonoda&Sigimura, Biosci. Biotechnol. Biochem. 72:2675-80 (2008))。当脑垂体 腺没有产生足够的生长激素时，生长将会比正常的慢。生长激素对于儿童的正常生长是需 要的。在成年人中，需要生长激素来维持适量的身体脂肪、肌肉和骨骼。hGH缺乏可能发生 在任何年龄。患有生长激素缺乏症的儿童和一些成年人将会受益于生长激素治疗。为了治 疗生长激素缺乏症，通常服用hGH (人生长激素）。hGH是可注射药物，其于患者皮肤的脂肪 下一周注射数次（Brearley等，BMC Clin. Pharmacol. 7:10 (2007))。在胰岛素治疗的情况 下，患者对开始注射疗法的抵抗和依从性对医生提出了挑战。因此，开发适合口服递送的 hGH形式是有吸引力的治疗策略。 专利技术简沐 本公开提供用于将治疗剂（例如生物活性肽，如胰岛素、胰高血糖素、或生长激 素），例如通过口服或粘膜施用，递送至需要该治疗剂的受试者的靶位置的包含VSP-载体 的组合物和方法。 更具体地，本公开提供VSP多肽如贾第虫寄生虫的可变表面蛋白（VSP)或其片段 (例如，贾第虫VSP的细胞外结构域或其包含CXXC基序的片段）作为载体通过口服或粘膜 施用递送治疗剂的用途。本专利技术的VSP载体没有通过肽键与治疗剂共价结合。 因此，本公开提供包含VSP载体和治疗剂的治疗组合物。在一些实施方案中，组合 物配制用于口服施用。在其他实施方案中，组合物配制用于粘膜施用。在一些实施方案中， VSP载体是VSP、VSP样蛋白、VSP或VSP样蛋白片段、VSP或VSP样蛋白衍生物、或两个或更 多个所述VSP载体的组合。 在一些实施方案中，VSP载体包含来自贾第虫的VSP或其片段。在其他实本文档来自技高网...
【技术保护点】
治疗组合物，包含VSP载体和治疗剂。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：D·克拉茨曼，E·皮亚乔，H·卢简，
申请(专利权)人：国民议会科学和技术研究，科尔多瓦天主教大学，巴黎公共救济院，居里巴黎第六大学，
类型：发明
国别省市：阿根廷;AR
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