对脂蛋白脂肪酶缺乏(LPLD)群体中的载脂蛋白C-III(APOCIII)表达的调节制造技术

本发明专利技术提供用于在患者中减少ApoCIII mRNA和蛋白质的表达以治疗、预防、延迟或改善弗雷德里克森I型血脂异常/FCS/LPLD的方法、化合物和组合物。所述方法、化合物和组合物在所述患者中增高HDL水平和/或改良TG与HDL之比和减少血浆脂质和血浆葡萄糖，并且可用于治疗、预防、延迟或改善胰腺炎、心血管疾病或代谢病症或其相关症状中的任何一种或多种。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】对脂蛋白脂肪酶缺乏(LPLD)群体中的载脂蛋白C-III(APOCIII)表达的调节序列表本申请正随电子格式的序列表一起提交。所述序列表是以2014年1月28日创建的名为BIOL0218WOSEQ_ST25.txt的文件的形式提供，其大小为16Kb。所述序列表的电子格式中的信息是以全文引用的方式并入本文中。专利
本文中提供了用于在弗雷德里克森I型血脂异常患者中减少载脂蛋白C-III(ApoCIII)mRNA和蛋白质的表达、降低甘油三酯水平和增高高密度脂蛋白(HDL)水平或HDL活性的方法、化合物和组合物。本文中还提供了用于治疗弗雷德里克森I型血脂异常或其相关病症的化合物和组合物。专利技术背景脂蛋白是由被两亲性蛋白质、磷脂和胆固醇包覆层围绕的酰基甘油和胆固醇酯的非极性核心组成的球形胶束状颗粒。已基于脂蛋白的功能和物理性质将其分为五大类：乳糜微粒、极低密度脂蛋白(VLDL)、中密度脂蛋白(IDL)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)。乳糜微粒将饮食脂质从肠转运到组织。VLDL、IDL和LDL都能将三酰基甘油和胆固醇从肝脏转运到组织。HDL将内源性胆固醇从组织转运到肝脏。载脂蛋白C-III(也称为APOC3、APOC-III、ApoCIII和APOC-III)是HDL和富甘油三酯(TG)脂蛋白的成分。ApoCIII升高与TG水平升高和诸如心血管疾病、代谢综合征、肥胖和糖尿病等疾病相关(Chan等,IntJClinPract,2008,62:799-809；Onat等,Atherosclerosis,2003,168:81-89；Mendivil等,Circulation,2011,124:2065-2072；Mauger等,J.LipidRes,2006.47:1212-1218；Chan等,Clin.Chem,2002.278-283；Ooi等,Clin.Sci,2008.114:611-624；Davidsson等,J.LipidRes.2005.46:1999-2006；Sacks等,Circulation,2000.102:1886-1892；Lee等,ArteriosclerThrombVascBiol,2003.23:853-858)。ApoCIII通过抑制脂蛋白脂肪酶(LPL)和干扰脂蛋白与细胞表面葡萄糖胺聚糖基质结合来抑制脂解作用而减缓对富TG脂蛋白的廓清(Shachter,Curr.Opin.Lipidol,2001,12,297-304)。由于ApoCIII抑制LPL从而导致TG的脂解作用下降，所以抑制ApoCIII在LPL缺乏(LPLD)受试者中具有有益的效应是出乎意料的。LPLD的特征在于使受影响的个体不能够产生功能活性LPL。LPL主要在骨骼肌、脂肪组织和心肌中产生，且具有多种关键功能，尤其是富TG脂蛋白(例如VLDL)和乳糜微粒(CM)的分解代谢。TG从CM(和VLDL)中卸载在正常情况下能防止CM质量和TG在饭后过度上升。在LPLD中，LPL存在功能障碍，且在饭后超过12小时，仍存在高TG和乳糜微粒血症且直观表现为脂血症。使用弗雷德里克森系统对患者的诸如高甘油三酯血症等血脂异常的原发性(遗传)原因进行分类。弗雷德里克森I型(也称为LPLD或家族性乳糜微粒血症综合征(FCS))通常由LPL基因或所述基因的辅因子ApoC-II突变，导致受影响的个体不能够产生功能活性LPL(即LPLD)而引起。患者具有纯合性突变(各等位基因上具有相同的突变)或复合杂合性突变(各等位基因上具有不同的突变)。流行率在一般群体中为大约1/1,000,000，且在南非和东魁北克，由于始祖效应而高得多。目前，弗雷德里克森I型、FCS、LPLD患者极少或根本不回应诸如他汀类、贝特类和烟酸等降TG药物(Tremblay等,JClinLipidol,2011,5:37-44；Brisson等,PharmacogenetGenom,2010,20:742-747)。弗雷德里克森I型、FCS、LPLD患者的临床处置一般由将总饮食脂肪严重减至远少于热量摄入的20％和使用经由门静脉系统吸收且因此不直接进入血浆的中链TG组成。所述终生饮食方案给患者带来了重大顺应性问题。即使当患者顺应所述饮食且在脂质门诊被饮食学家和医疗团队密切跟进时，TG往往并未降至胰腺炎风险增高的临限值以下。最近，欧洲已批准基因疗法产物(GlyberaR)用于治疗尽管进行了饮食脂肪限制但仍遭受严重或多次胰腺炎发作的成年LPLD患者。经GlyberaR治疗的患者需要在GlyberaR治疗之前和之后施用免疫抑制药物。GlyberaR将仅由具有治疗LPLD专长的专门中心和由受过特殊训练的医生提供，以确保治疗的进行安全性(http://www.uniqure.com/products/glybera/)。因此，仍需要为患有弗雷德里克森I型血脂异常、FCS、LPLD的患者提供新颖的治疗选择。反义技术正作为一种减少某些基因产物的表达的有效手段而兴起，并且会被证明在用于调节ApoCIII的许多治疗、诊断和研究应用中特别有用。我们先前在US20040208856(美国专利7,598,227)、US20060264395(美国专利7,750,141)、WO2004/093783和WO2012/149495中已经公开了通过反义化合物抑制ApoCIII的组合物和方法，所有文献都以引用的方式并入本文中。已经在I期临床试验中测试了靶向ApoCIII的反义寡核苷酸且被证明是安全的。目前，靶向ApoCIII的反义寡核苷酸正进行II期临床试验以评定其在治疗糖尿病或高甘油三酯血症方面的有效性。专利技术概述某些实施方案提供了一种治疗、预防、延迟或改善弗雷德里克森I型血脂异常、FCS、LPLD的方法，其包括向动物施用治疗有效量的包含ApoCIII特异性抑制剂的化合物。某些实施方案提供了一种ApoCIII特异性抑制剂用于治疗、预防、延迟或改善弗雷德里克森I型血脂异常、FCS、LPLD。某些实施方案提供了一种在患有弗雷德里克森I型血脂异常、FCS、LPLD的动物中降低甘油三酯水平的方法，其包括向所述动物施用治疗有效量的包含ApoCIII特异性抑制剂的化合物。某些实施方案提供了一种在患有弗雷德里克森I型血脂异常、FCS、LPLD的动物中增高HDL水平和/或改良TG与HDL之比的方法，其包括向所述动物施用治疗有效量的包含ApoCIII特异性抑制剂的化合物。某些实施方案提供了一种在患有弗雷德里克森I型血脂异常、FCS、LPLD的动物中预防、延迟或改善心血管和/或代谢疾病、病症、病状或其症状的方法，其包括向所述动物施用治疗有效量的包含ApoCIII特异性抑制剂的化合物。某些实施方案提供了一种在患有弗雷德里克森I型血脂异常、FCS、LPLD的动物中预防、延迟或改善胰腺炎或其症状的方法，其包括向动物施用治疗有效量的包含ApoCIII特异性抑制剂的化合物。在某些实施方案中，所述ApoCIII特异性抑制剂是能够抑制ApoCIII表达的核酸、肽、抗体、小分子或其它药剂。在某些实施方案中，所述核酸是反义化合物。在某些实施方案中，所述反义化合物是靶向ApoCIII的寡核苷酸。在某些实施方案中，所述本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗、预防、延迟或改善弗雷德里克森I型血脂异常、FCS、LPLD的方法，其包括向动物施用治疗有效量的包含ApoCIII特异性抑制剂的化合物，从而预防、延迟或改善弗雷德里克森I型血脂异常、FCS、LPLD。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.02.14 US 61/764,969;2013.09.20 US 61/880,7791.ApoCIII特异性抑制剂在制备用于i)在动物中治疗、预防、延迟或改善FCS；或ii)在患有FCS的动物中预防、延迟或改善胰腺炎或其症状的药物中的用途，其中所述ApoCIII特异性抑制剂包含靶向ApoCIII的反义化合物，且其中所述反义化合物抑制ApoCIII的表达。2.如权利要求1所述的用途，其中降低了所述动物的甘油三酯水平。3.如权利要求1所述的用途，其中所述反义化合物包含经修饰的寡核苷酸。4.如权利要求3所述的用途，其中所述经修饰的寡核苷酸具有包含SEQIDNO:3的核碱基序列的至少8个连续核碱基的核碱基序列。5.如权利要求4所述的用途，其中所述经修饰的寡核苷酸包含核碱基序列SEQIDNO:3。6.如权利要求4所述的用途，其中所述经修饰的寡核苷酸由核碱基序列SEQIDNO:3组成。7.如权利要求3所述的用途，其中所述经修饰的寡核苷酸的核碱基序列与SEQIDNO:1、SEQIDNO:2或SEQIDNO:4的核碱基序列至少80％互补。8.如权利要求3所述的用途，其中所述经修饰的寡核苷酸的核碱基序列与SEQIDNO:1、SEQIDNO:2或SEQIDNO:4的核碱基序列至少90％互补。9.如权利要求3所述的用途，其中所述经修饰的寡核苷酸的核碱基序列与SEQIDNO:1、SEQIDNO:2或SEQIDNO:4的核碱基序列100％互补。10.如权利要求3所述的用途，其中所述经修饰的寡核苷酸由经修饰的单链或双链寡核苷酸组成。11.如权利要求3所述的用途，其中所述经修饰的寡核苷酸由12至30个连接的核苷组成。12.如权利要求11所述的用途，其中所述经修饰的寡核苷酸由20个连接的核苷组成。13.如权利要求3所述的用途，其中所述经修饰的寡核苷酸具有至少一个经修饰的核苷间键联、糖部分或核碱基。14.如权利要求13所述的用途，其中所述经修饰的寡核苷酸的所述经修饰的核苷间键联是硫代磷酸酯核苷间键联，所述经修饰的糖是双环糖或2'-O-甲氧基乙基，且所述经修饰的核碱基是5-甲基胞嘧啶。15.如权利要求3所述的用途，其中所述经修饰的寡核苷酸包含：(a)由连接的脱氧核苷组成的间隙区段；(b)由连接的核苷组成的5'翼状区段；(c)由连接的核苷组成的3'翼状区段；其中所述间隙区段位于紧邻所述5'翼状区段和所述3'翼状区段处且在所述5'翼状区段与所述3'翼状区段之间，且其中各翼状区段的各核苷包含经修饰的糖。16.如权利要求3所述的用途，其中所述经修饰的寡核苷酸包含：(a)由10个连接的脱氧核苷...

【专利技术属性】
技术研发人员：V·J·亚历山大，N·J·瓦伊尼，J·L·魏茨滕，
申请(专利权)人：ISIS制药公司，
类型：发明
国别省市：美国;US