用于HIV/AIDS治疗的混合谱系激酶抑制剂制造技术

本发明专利技术公开了用于治疗受逆转录病毒感染的个体的方法，所述方法包括向所述个体施用有效量的混合谱系激酶抑制剂和抗逆转录病毒药物。在进一步方面，本发明专利技术公开了用于治疗受逆转录病毒感染的个体的方法，所述方法包括施用被配制成结晶纳米颗粒的抗逆转录病毒药物，所述结晶纳米颗粒包含表面活性剂和MLK抑制剂。本发明专利技术更进一步公开了用于治疗受逆转录病毒感染的个体的方法，所述方法包括施用包含被配制成结晶纳米颗粒的抗逆转录病毒和MLK抑制剂的组合物，所述组合物包含表面活性剂。本发明专利技术更进一步公开了包含抗逆转录病毒药物、MLK抑制剂和表面活性剂的组合物，其中所述组合物是结晶纳米颗粒。本发明专利技术还公开了呈纳米颗粒形式的包含MLK抑制剂与其他药物的组合物，以及它们的使用方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请的交叉引用本申请要求2012年11月30日提交的美国临时申请第61/731,925号、2013年2月21日提交的美国临时申请第61/767,748号和2013年2月22日提交的美国临时申请第61/768,077号的优先权权益，所述临时申请以引用的方式全文并入本文中。对政府资助的致谢本专利技术根据由美国国立卫生研究院(National Institutes of Health)授予的MH064570在政府资助下进行。政府具有本专利技术的某些权利。
技术介绍
哺乳动物蛋白激酶涉及重要细胞功能的调节。由于蛋白激酶活性的功能障碍与数种疾病和病症相关这一事实，蛋白激酶是药物开发的靶标。混合谱系激酶(MLK)是靶向JNK和p38MAPK以响应于使细胞应激的不同刺激而活化的MAPK激酶激酶。因而，MLK调节广泛范围的细胞过程。MLK3是表达最广泛的MLK家族成员，且存在于神经元和脑中常驻的单核吞噬细胞中。它被Ras超家族的GTP酶(诸如Cdc42和Rac，它们通过亮氨酸拉链接口触发蛋白二聚化)活化，导致在蛋白活化环内的Thr277和Ser281处的自体磷酸化，并且随后是酶的活化。对混合谱系激酶(MLK)抑制剂CEP1347的临床前研究已显示，此药剂可保护神经元免受大范围损伤，包括暴露于阿尔茨海默氏(Alzheimer's)肽Aβ。使用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶的帕金森症模型研究已经证实了CEP1347在治疗运动缺陷和神经元变性中的功效，且使用暴露于甲基苯丙胺的人中脑-衍生的神经元，在帕金森病(Parkinson's Disease)的体外模型中也已观察到CEP1347-介导的神经保护。在诸如HIV-相关的痴呆(HAD)的神经病学并发症情形下，CEP1347也可能是保护性的。事实上，Bodner等人已表明CEP1347可以保护原代大鼠海马神经元以及背根神经节神经元免于暴露于HIV-1 gp120的另外的致死效应。已确定CEP1347通过抑制混合谱系激酶(MLK)家族的活性来介导该效应。Maggirwar等人检验了HIV-1神经毒素Tat和gp120对MLK3的作用。Tat和gp120已显示会诱导MLK3在原代大鼠神经元中的自体磷酸化，并且这会通过CEP1347的加入而消除。这些研究表明，MLK3的正常功能被这些HIV-1神经毒素损伤，导致下游信号传导事件，所述事件导致神经元死亡和单核细胞活化(并释放出炎性细胞因子)。Eggert等人已证实，CEP1347在HIV-1感染的体内模型中是神经保护性的，响应于HIV-1感染而逆转小神经胶质细胞活化和恢复正常突触结构，以及恢复巨噬细胞分泌特性至营养(相对于毒性)表型(J.Immunol.184(2):746-56,2010)。已显示MLK3会驱使HIV病毒的产生。因此，数条证据目前支持MLK3抑制剂可用于治疗许多神经学病状(包括神经艾滋(neuroAIDS))。CEP1347不具有理想的药代动力学性质，这潜在地影响它获得进入CNS的能力，或在CNS中保持治疗浓度的能力。需要具有提高的药代动力学和脑穿透性的其他小分子MLK3抑制剂。混合谱系激酶3(MLK3)的药理学阻断已显示会导致神经营养素介导的信号传导途径的活化，以及神经营养素受体的表达增加--导致对内源神经营养素(包括BDNF)的应答性增强(Wang等人,J Pharmacol Exp Ther 312:1007-19,2005)。MLK3抑制剂也已显示增加BDNF自身的产生(Conforti等人,Mol Cell Neurosci 39:1-7,2008)。用SSRI和MLK3抑制剂的组合治疗可导致神经发生的协同促进，这是由于MLK3抑制剂的神经营养素致敏作用以及它们直接上调BDNF的能力(Wang和Conforti，同上)。如果共同施用所述化合物，还可以导致SSRI(以及同时可能的谈话治疗和锻炼)的治疗有效性的增加。暴露于MLK3抑制剂还可补偿抑郁症患者的海马体中降低的BDNF水平，从而减轻抑郁症(基于“BDNF假设”)。需要用于HIV/AIDS治疗的新的MLK抑制剂和新的传递机制、治疗和组合物。本文中公开的组合物和方法解决这些和其他需要。
技术实现思路
如本文中具体体现且广泛描述，根据所公开物质、化合物、组合物、制品、装置和方法的目的，所公开主题涉及组合物以及制造和使用所述组合物的方法。在其他方面，本文公开了用于治疗受逆转录病毒感染的个体的方法，所述方法包括向所述个体施用有效量的混合谱系激酶抑制剂和抗逆转录病毒药物。在进一步方面，本文公开了用于治疗受逆转录病毒感染的个体的方法，所述方法包括施用被配制成结晶纳米颗粒的抗逆转录病毒药物，所述结晶纳米颗粒包含表面活性剂和MLK抑制剂。本专利技术更进一步公开了用于治疗受逆转录病毒感染的个体的方法，所述方法包括施用包含被配制成结晶纳米颗粒的抗逆转录病毒和MLK抑制剂的组合物，所述组合物包含表面活性剂。本文中更进一步公开了包含抗逆转录病毒药物、MLK抑制剂和表面活性剂的组合物，其中所述组合物是结晶纳米颗粒。所公开主题的另外的优势将部分地在随后的描述中阐述，并且部分地根据描述将显而易见，或可通过下文所述的方面的实践获悉。借助于随附权利要求书中特别指出的要素和组合来实现和获得下文所述的优势。应理解，前述一般描述和以下详细描述仅为例示性和说明性的，并且不是限制性的。附图说明并入本说明书并构成本说明书一部分的附图阐明了本专利技术的几个方面并与说明书一起用来解释本专利技术的原理。图1是显示在十三周内人源化小鼠中的CD4+T细胞水平％的组图。左上图显示未感染(菱形)和受HIV-1感染(正方形)的小鼠的对照。右上图显示用包含阿扎那韦(atazanavir)和利托那韦(ritonavir)的纳米颗粒处理过的小鼠(正方形)与未经处理的感染HIV-1的小鼠(菱形)相比较。左下图显示用化合物AH处理过的小鼠(正方形)与未经处理的感染HIV-1的小鼠(菱形)相比较。右下图显示用化合物AH和包含阿扎那韦和利托那韦的纳米颗粒两者处理过的小鼠(正方形)与未经处理的感染HIV-1的小鼠(菱形)相比较。图2是显示外周HIV-1病毒负荷的时程的图表。图3是一组来自未经处理的感染HIV-1的小鼠(左上)、用包含阿扎那韦和利托那韦的纳米颗粒处理的小鼠(右上)、用化合物AH处理的小鼠(左下)和用化合物AH和包含阿扎那韦和利托那韦的纳米颗粒两者处本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗受逆转录病毒感染的个体的方法，所述方法包括：向所述个体施用有效量的混合谱系激酶抑制剂和抗逆转录病毒药物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.11.30 US 61/731,925;2013.02.21 US 61/767,748;1.一种治疗受逆转录病毒感染的个体的方法，所述方法包括：
向所述个体施用有效量的混合谱系激酶抑制剂和抗逆转录病毒药物。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗逆转录病毒药物包括进入抑
制剂、CCR5受体拮抗剂、核苷逆转录酶抑制剂、非核苷逆转录酶抑制剂、
整合酶抑制剂和成熟抑制剂中的一种或多种。
3.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中抗逆转录病毒药物包括
一种或多种下列抗逆转录病毒化合物：拉米夫定、齐多夫定、恩曲他滨、阿
巴卡韦、硫酸阿巴卡韦、齐多夫定、替诺福韦、地丹诺辛、司他夫定、地拉
韦啶、依法韦仑、奈韦拉平、依曲韦林、马拉维若、利匹韦林和雷特格韦。
4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述抗逆转录病毒药物
包括蛋白酶抑制剂。
5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述抗逆转录病毒药物
包括一种或多种下列抗逆转录病毒化合物：阿扎那韦、依法韦仑、印地那韦
和利托那韦。
6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述混合谱系激酶抑制
剂包括一种或多种下列化合物：CEP-1347[3,9-双[(乙基硫基)甲
基]-(8R*,9S*,11S*)-(-)-9-羟基-9-甲氧基羰基-8-甲基-2,3,9,10-四氢-8,11-环氧
基-1H,8H,11H-2,7b,11a-三氮杂二苯并(a,g)环辛并(cde)三茚-1-酮]和
CEP-11004[3,9-双-[(异丙基硫基)甲基]-(8R*,9S*,11S*)-(-)-9-羟基-9-甲氧基羰
基-8-甲基-2,3,9,10-四氢-8,11-环氧基-1H,8H,11H-2,7b,11a-三氮杂二苯并(a,g)
环辛并(cde)三茚-1-酮]。
7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述抗逆转录病毒药物
是控释制剂、局部凝胶剂、软凝胶胶囊、硬胶囊。
8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述抗逆转录病毒药物
包含在结晶纳米颗粒中的一种或多种抗逆转录病毒化合物，其中所述纳米颗
粒还包含一种或多种表面活性剂。
9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述纳米颗粒还包含所

\t述混合谱系激酶抑制剂。
10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述纳米颗粒是棒状
或圆形。
11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中z平均直径为约100nm
至1μm。
12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述表面活性剂是带
正电荷的。
13.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述表面活性剂是带
负电荷的。
14.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述表面活性剂包括
两亲性的嵌段共聚物。
15.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述两亲性的嵌段共
聚物包含聚氧化乙烯的至少一个嵌段和聚氧化丙烯的至少一个嵌段。
16.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述表面活性剂为一
种或多种下列物质：泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、聚乙烯醇、1,2-二硬脂酰
-磷脂酰乙醇胺-甲基-聚乙二醇缀合物2000(mPEG2000DSPE)、十二烷基硫酸钠
和1,2-二油酰氧基-3-三甲基铵丙烷。
17.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述表面活性剂偶联
至靶向配体。
18.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述靶向配体为巨噬
细胞靶向配体。
19.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述巨噬细胞靶向配
体为叶酸。
20.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述纳米颗粒的至少
约95％重量为所述抗逆转录病毒化合物。
21.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述纳米颗粒的至少
约99％重量为所述抗逆转录病毒化合物。
22.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述纳米颗粒的约
0.0001％重量至约5％重量为表面活性剂。
23.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述纳米颗粒经皮下
注射施用。
24.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述混合谱系激酶抑
制剂包括结构式X的化合物
或其盐，其中：
虚线指示任选的第二键；
X1和X2独立地选自CH和N；
Y3选自键、低级烷基、低级羧基和低级杂烷基；
Y4选自O、S、C(O)、SO、SO2、NH、N(CH3)、CH2、CHF、CF2、CH(CH3)、
C(CH3)2、CH2O-和-CH2N-；且
R2选自苯基和6-元单环杂芳基，其任一个任选地被一个或多个选自以下
的取代基取代：氘、卤素、羟基、低级氨基、低级酰胺基、C1-C3烷氧基和
C1-C3烷基；
R3是环烷基、芳基、杂芳基、双环杂芳基，其任何一个任选地被一个或
多个选自以下的取代基取代：氘、卤素、羟基、低级氨基、低级酰胺基、低
级羧基、C1-C3烷氧基、C1-C3烷基、(O)、(S)、氰基、卤代烷基、苯基、环
烷基、杂芳基和环杂烷基；
R4选自氢、CH3、(O)和(S)；且
R14选自低级杂烷基、低级杂环烷基和低级杂芳基，其任何一个任选地被
一个或多个选自以下的取代基取代：氘、卤素、羟基、低级氨基、低级酰胺
基、低级羧基、C1-C3烷氧基、C1-C3烷基、(O)、(S)、卤代烷基、苯基、苄

\t基和低级环烷基。
25.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中X1是N。
26.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中X2是N。
27.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中X1和X2两者均是N。
28.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中R4是CH3。
29.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述化合物具有式XI
或式XII：
或其盐。
30.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中R2是任选地被一个或
多个选自以下的取代基取代的苯基：卤素、羟基、低级氨基、低级酰胺基、
C1-C3烷氧基和C1-C3烷基。
31.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中Y3选自键或CH2。
32.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中R3选自苯基或5/6-稠
合双环杂芳基，其任一个任选地被一个或多个选自以下的取代基取代：卤素、
羟基、氰基、低级氨基、低级酰胺基、低级苯基酰胺基、低级苯基烷基酰胺
基、低级杂环烷基、低级杂环烷基、低级烷基杂环烷基、C1-C3烷氧基和C1-C3烷基。
33.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中R14是任选地被一个
或多个选自以下的取代基取代的单环杂环烷基：卤素、羟基、低级氨基、低
级酰胺基、低级羧基、C1-C3烷氧基、C1-C3烷基、(O)、(S)、卤代烷基、苯
基、苄基和低级环烷基。
34.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中Y4选自O、S、C(O)、
NH或CH2。
35.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中R14是哌嗪基或吗啉
代，其任选地被一个或多个选自以下的取代基取代：卤素、羟基、低级氨基、
低级酰胺基、低级羧基、C1-C3烷氧基、C1-C3烷基、(O)、(S)、卤代烷基、
苯基、苄基和低级环烷基。
36.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述化合物具有结构
式XIX：
其中
X3选自C、N和O；
R3选自低级环烷基、苯基和低级杂芳基，其任何一个任选地被一个或多
个选自以下的取代基取代：卤素、羟基、低级氨基、低级酰胺基、低级羧基、
C1-C3烷氧基、C1-C3烷基、(O)、(S)、氰基、卤代烷基、苯基、环烷基、杂
芳基和环杂烷基；
R16选自低级烷基、低级羧基、羰基、烷氧基乙酮、氨基甲酸酯、磺酰基、
杂芳基、环烷基、杂芳基烷基、芳基、芳基烷基和杂环烷基羰基，其任何一
个可任选地被取代，且当X3是O时，R16为无。
37.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中R3选自苯并噻唑基、
吡咯并吡啶基、茚满基、环丙基、环戊基、苯基、吡啶基、嘧啶基和吲哚基，
其任何一个任选地被一个或多个选自以下的取代基取代：氟、氯、羟基、NH2、
NH(CH3)、N(CH3)2、C(O)NH2、C(O)NHCH3、吗啉代、哌嗪基、甲基哌嗪基、
乙酰胺基、甲基乙酰胺基、甲基丙酰胺基、苯基乙酰胺基亚甲基、苯甲酰胺
基亚甲基、苯基丙酰胺基亚甲基、甲氧基和甲基。
38.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中X3是N。
39.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中R3是任选地被一个或
多个选自以下的取代基取代的苯基：羟基、低级烷基、低级烷氧基、低级卤

\t代烷基、低级卤代烷氧基、卤素、低级氨基、低级羧基和氰基。
40.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中R3选自茚满基、吲哚
基、吲唑基、吲哚酮基、苯并噻吩基、喹啉基、异喹啉基、吡咯并吡嗪基和
吡咯并吡啶基，其任何一个任选地被一个或多个选自以下的取代基取代：羟
基、低级烷基、低级烷氧基、低级卤代烷基、低级卤代烷氧基、卤素、低级
氨基和低级羧基。
41.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中R3是吲哚基。
42.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中R3是任选地在一个碳
原子处被一个或多个选自以下的取代基取代的茚满基：氘、卤素和低级烷基。
43.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中R16是低级烷基。
44.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中X3是N且R16是CH3。
45.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中R3是任选地被一个或
多个选自以下的取代基取代的茚满基或苯基：羟基、低级烷基、低级烷氧基、
低级卤代烷基、低级卤代烷氧基、卤素、低级氨基和低级羧基。
46.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述化合物在所述吡
咯并吡啶基核心上的碳原子处被一个或多个选自氘、氟和甲基的取代基取代。
47.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述化合物选自化合
物A至JD。
48.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述化合物是化合物
AH
49.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述混合谱系激酶抑
制剂与所述抗逆转录病毒药物同时施用。
50.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中在施用所述混合谱系

\t激酶抑制剂之前至少一周时，定期在没有所述混合谱系激酶抑制剂的情况下
施用所述抗逆转录病毒药物。
51.一种组合物，其包含：抗逆转录病毒药物、混合谱系激酶抑制剂和
表面活性剂，其中所述组合物是结晶纳米颗粒。
52.根据权利要求51所述的组合物，其中所述纳米颗粒用叶酸包衣。
53.根据权利要求51-52中任一项所述的组合物，其中所述抗逆转录病
毒药物包括进入抑制剂、CCR5受体拮抗剂、核苷逆转录酶抑制剂、非核苷
逆转录酶抑制剂、整合酶抑制剂和成熟抑制剂中的一种或多种。
54.根据权利要求51-53中任一项所述的组合物，其中抗逆转录病毒药
物包括一种或多种下列抗逆转录病毒化合物：拉米夫定、齐多夫定、恩曲他
滨、阿巴卡韦、硫酸阿巴卡韦、齐多夫定、替诺福韦、地丹诺辛、司他夫定、
地拉韦啶、依法韦仑、奈韦拉平、依曲韦林、马拉维若、利匹韦林和雷特格
韦。
55.根据权利要求51-54中任一项所述的组合物，其中所述抗逆转录病
毒药物包括蛋白酶抑制剂。
56.根据权利要求51-55中任一项所述的组合物，其中所述抗逆转录病
毒药物包括一种或多种下列抗逆转录病毒化合物：阿扎那韦、依法韦仑、印
地那韦和利托那韦。
57.根据权利要求51-56中任一项所述的组合物，其中所述混合谱系激
酶抑制剂包括一种或多种下列化合物：CEP-1347[3,9-双[(乙基硫基)甲
基...

【专利技术属性】
技术研发人员：哈里斯·A·格尔巴德，斯蒂芬·杜赫斯特，霍华德·E·根德尔曼，
申请(专利权)人：罗切斯特大学，内布拉斯加大学董事会，
类型：发明
国别省市：美国;US