89Zr标记伊匹单抗的标记产物，为[89Zr]-Df-Bz-NCS-Ipilimumab，采用89Zr标记Df-Bz-NCS-Ipilimumab，并进一步提供了89Zr标记Df-Bz-NCS-Ipilimumab的质量控制方法。本发明专利技术的标记产物，正电子核素与抗体在血液中的半衰期相符、PET显像结果较为客观，且制备操作简单、成本低，可得到具有较为理想的稳定性与放射性化学纯度的伊匹单抗标记产物。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于放射性标记
，具体设及89Zr标记伊匹单抗的标记产物及其制 备方法、质量控制方法
技术介绍
黑色素瘤是临床上较为常见的皮肤黏膜和色素膜肿瘤，恶性程度极高，黑色素瘤 晚期患者的中位生存期为7~9个月，1年内的生存率仅为25%。在过去30年，黑色素瘤 发病率明显增加，死亡率也在持续性上升。据世界卫生组织（WHO)统计，每年死于皮肤癌的 患者大约有66000人，其中80%死于黑色素瘤。目前，对于晚期黑色素瘤的治疗主要有化学疗法和免疫疗法，化学疗法的效果通 常并不理想，非特异性的免疫疗法也很少能产生持续性的疗效。2011年3月25日美国抑A 批准百时美-施贵宝炬M巧公司推出的伊匹单抗，可用于治疗晚期黑色素瘤，其分子式为： C64n_H99n_Nl732_〇2004_S40。 伊匹单抗（Ipilimumab)是一种单克隆抗体，能有效阻滞一种叫做细胞毒性T细胞 相关抗原-4 (c}ftotoxic T lymphocyte-associated antigen-4,简称 CTLA-4,又名 CD152) 的分子。CTLA-4是一种白细胞分化抗原，是T细胞（胸腺依赖性淋己细胞）上的一种跨 膜受体，与CD28分子共同享有B7分子配体，即CTLA-4与CD28均可与B7分子结合，但是， CTLA-4与B7分子结合后会诱导T细胞无反应性，是T细胞活化时的负性调节蛋白。在正常 情况下，T细胞的激活依赖于第一信号（抗原-抗体复合物的形成）和第二信号炬7介导 的活化信号）双活化。CTLA-4与B7结合将产生抑制性信号，并抑制T细胞活化，而T细胞 介导的抗肿瘤免疫应答可发挥抗肿瘤作用，因此，CTLA-4会影响人体的免疫系统，削弱其杀 死癌细胞的能力。Ipilimumab对CTLA-4的阻滞作用即是与CTLA-4结合，进而阻碍CTLA-4 与其配体的相互作用，从而增加T细胞的活化和增殖。因此，Ipilimum油对于黑色素瘤的 作用是间接的，是通过阻滞CTLA-4与B7分子配体结合，进而保障T细胞的活化和增殖，最 终实现抗肿瘤作用。该作用机制可能是帮助人体免疫系统识别、瞄准并攻击黑色素瘤癌细 胞的途径之一。因此，利用Ipilimum油作为显像剂的载体可能会具有较好的祀向性，但是， 用正电子核素标记Ipilimum油过程中，标记产物在体外具有良好的稳定性、较高的放射性 化学纯度，可满足使用需要，用于体内显像时能够客观准确的反应体内代谢的情况等，均是 获得理想的伊匹单抗的标记产物需要综合考虑与解决的难题。[000引有研究用64化标记CTLA-4抗体进而制备生物探针用于肿瘤探测，但是由于 64化半 衰期为12h，与抗体在血液中的半衰期不相符，导致阳T显像不能真实反映肿瘤摄取抗体的 量。
技术实现思路
本专利技术所要解决的第一个技术问题是现有技术中的采用1中\64化正电子核素标记 抗体W探测黑色素瘤的探针与抗体在血液中的半衰期不相符、阳T显像结果不够客观的问 题，进而提供一种与抗体在血液中的半衰期相符、PET显像结果较为客观的正电子核素89Zr 标记伊匹单抗的标记产物。 本专利技术解决的第二个技术问题是采用正电子核素标记伊匹单抗不仅需要得到标 记产物，还需保证标记产物在体外具有良好的稳定性、较高的放射性化学纯度，可满足使用 需要，用于体内显像时能够客观准确的反应体内代谢的情况的问题，进而提供一种操作简 单、可得到具有较为理想的稳定性与放射性化学纯度的伊匹单抗标记产物的方法。 本专利技术还提供了上述方法得到的标记产物的质量控制方法。 本专利技术的89化标记伊匹单抗的标记产物为rZr]-Df-Bz-NCS-Ipilimum油。 本专利技术的89化标记伊匹单抗的方法，采用89Zr标记Df-Bz-NCS-Ipilimum油。 所述的89Zr标记伊匹单抗的方法，具体包括W下步骤：取Df-Bz-NCS-Ipilimumab 与含 89Zr4+离子溶液，混合均匀，调节混合液的抑值为6. 8-7. 2,形成反应液，在20-35°C下 反应至生成标记产物rZr]-Df-Bz-NCS-Ipilimum油。需要说明的是，本领域技术人员可根 据实际情况选择调节混合液的抑调节剂，只要使所述反应液的抑值在6. 8-7. 2的范围内 即可。[001引所述含89Zr4+离子溶液为89Zr草酸溶液。 进一步的，所述的89Zr标记伊匹单抗的方法，还包括向所述反应液中加入络合剂 的步骤。优选的，所述络合剂为醋酸-醋酸钢缓冲液、己二胺四己酸钢缓冲溶液中的一种。 所述的89Zr标记伊匹单抗的方法，还包括将所述标记产物 -Df-Bz-NCS-Ipi 1 imumab采用层析柱纯化的步骤。进一步的，将所述标记产物 -Df-Bz-NCS-Ipilimumab层析柱纯化后，采用0. 22 ym的无菌滤膜过滤，获得可用于 临床使用的无菌、热原符合规定的rZr]-Df-Bz-NCS-Ipi 1 imuma注射液。 本专利技术所述的-Df-Bz-NCS-Ipilimumab在制备PET显像剂中的应用。 本专利技术提供的PET显像剂，包含所述rZr]-Df-Bz-NCS-Ipilimum油。 本专利技术所述的标记产物-Df-Bz-NCS-Ipilimumab的质量控制方法，包括W 下步骤：-Df-Bz-NCS-Ipilimumab在TLC层析上点样，W抑值 为6. 5的巧樣酸-巧樣酸钢为展开剂，展开、干燥，扫描斑点位置，计算所述标记产物 rZr]-Df-Bz-NCS-Ipilimum油的放射性化学纯度；或者/和 采用高效液相色谱法检测所述标记产物rZr]-Df-Bz-NCS-Ipilimum油的放射性 化学纯度，色谱柱为300X7. 8mm规格的凝胶柱，流动相为0.Imol/L的PBS缓冲液-0. 5mol/ L的化C1，流速为Iml/min，检测波长为280nm。所述PBS缓冲液为磯酸缓冲盐溶液。 本专利技术所述的Df-Bz-NCS-Ipilimumab，即去铁敏-苯甲酯基-N-氯代了二酷亚 胺-伊匹单抗，是去铁敏B值f)Df衍生活性分子，其结构式如下：【主权项】1. 一种89Zr标记伊匹单抗的标记产物-Df-Bz-NCS-IpiIimumab。2. 权利要求1所述的标记产物-Df-Bz-NCS-Ipilimumab的制备方法，其特征在 于，米用89Zr标记Df-Bz-NCS-IpiIimumab〇3. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：取 Df-Bz-NCS-IpiIimumab与含89Zr4+离子溶液，混合均匀，调节混合液的pH值为6. 8-7. 2,形 成反应液，在20-35°C下反应至生成标记产物-Df-Bz-NCS-IpiIimumab。4. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述含89Zr4+离子溶液为89Zr草酸溶液。5. 根据权利要求2-4任一所述的方法，其特征在于，还包括向所述反应液中加入络合 剂的步骤；所述络合剂为醋酸-醋酸钠缓冲液、乙二胺四乙酸钠缓冲溶液中的一种。6. 根据权利要求2-5任一所述的方法，其特征在于，还包括将所述标记产物 -Df-Bz-NCS-Ipilimumab采用层析柱纯化的步骤。7. 根据权利要求6所述的方法，其特征本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种89Zr标记伊匹单抗的标记产物[89Zr]‑Df‑Bz‑NCS‑Ipilimumab。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王正，罗志刚，方鹏，虞善友，张京超，
申请(专利权)人：米度南京生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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