抗CD26抗体及其用途制造技术

本发明专利技术涉及能够结合CD26的新抗体，以及其作为药品的用途。此外，本发明专利技术提供给抗体用于治疗和/或治疗移植物抗宿主病(GvHD)、用于治疗再生障碍性贫血和/或用于在造血干细胞移植后促进植入。此外，本发明专利技术提供药物组合物，其包含至少一种本发明专利技术抗体，本发明专利技术还提供部件的套装。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗CD26抗体及其用途
本专利技术涉及能够结合CD26的新抗体，以及其作为药物的用途。此外，本专利技术涉及用于治疗和/或预防移植物抗宿主病(GvHD)和再生障碍性贫血中的至少一种的抗体，以及用于在造血干细胞移植后促进植入的抗体。
技术介绍
CD26是分布广泛的110kDa细胞表面糖蛋白，最初定义为T细胞激活抗原(Fox等人(1984)J.Immunol.(《免疫学杂志》)133,1250-1256,Fleischer(1987)J.Immunol.138,1346-1350以及Morimoto等人(1989)J.Immunol.143,3430-3439)。这种分子已证实其胞外域中具有二肽基肽酶IV(DPPIV；EC3.4.14.5)活性，并在组织中广泛分布(Hegen等人.(1990)J.Immunol.144,2908-2914以及Ulmer等人.(1990)J.Immunol.31,429-435；WO2007/014169A2)。CD26具有多项人T细胞生理学功能。例如，证据表明，CD26可传递激活T细胞的共刺激信号(Morimoto等人，(1994)Immunologist(《免疫学者》)2:4-7以及Fleischer(1994)Immunol.Today(《今日免疫学》)15:180-184)。此外，CD26被确定为ADA结合蛋白，并且CD26/ADA复合物在调节免疫系统功能中发挥关键作用(Dong等人.(1996)JImmunol.156(4):1349-55,Kameoka等人.(1993)Science(《科学》).261(5120):466-9，以及Morrison等人，(1993)JExpMed(《实验医学杂志》).177(4):1135-43)。CD26和细胞蛋白拓扑异构酶IIα之间的功能相关性也有报道(Aytac等人，(2003)BritishJournalofCancer(《英国癌症杂志》)88:455-462)。抗CD26抗体从例如WO2007/014169A2中获知。造血干细胞移植(HSCT)是用于许多血液学和大量上皮肿瘤以及用于相当数量的非肿瘤疾病的一种重要疗法(Ferrara等人,2009,Lancet.(《柳叶刀》)；373:1550–1561；Sun等人,2007,Transl.Res.(《转化性研究》)；150:197-214)。移植物抗宿主病(GvHD)是同种异体(allogeneic)造血干细胞移植(HSCT)的主要并发症，并因此限制了这些重要疗法的使用。有两种主要类型的造血细胞移植：自体和同种异体移植。自体移植包括来自患者的造血干细胞(HSC)分离、干细胞的储存、破坏留在体内的干细胞的患者的药物治疗，以及将患者自身储存的干细胞返回到其体内。自体移植具有移植物排斥、感染和其它相关疾病的风险较低的优点。同种异体移植包括两个个体：一个是健康捐献者，一个是患者或接受者。同种异体HSC捐献者的组织(HLA人白细胞抗原)类型必须与接受者的匹配，另外，接受者需要免疫抑制药物。用于移植的造血干细胞有三种可能的来源：骨髓(BM)、外周血(PB)和脐带血(UCB)。在过去几年里，新策略的开发有助于扩展同种异体HSCT的适应症(Sun等人，2007，见上文)。感染预防、免疫抑制药物、支持疗法和基于DNA的组织分型方面的改进也有助于改善同种异体HSCT后的结果(Ferrara等人，2009，见上文)。因为这些原因，同种异体造血干细胞移植的数量持续增加。但是，移植物抗宿主病(GvHD)仍然是同种异体HSCT的主要并发症。当捐献者T细胞将宿主细胞上基因限定的蛋白质识别为非自身时，发生GvHD，并引起免疫反应以破坏它们(Ferrara等人，2009，见上文)。根据HSCT后其出现的时间，GvHD可以是急性的或慢性的。急性GvHD(aGvHD)导致15％-40％的死亡率，并且是同种异体HCT后的主要死因，而慢性GvHD(cGvHD)发生在HCT后三个月存活的高达50％患者中(Sun等人，2007，Transl.Res.；150：197-214)。由于捐献者免疫细胞抗宿主组织的反应，急性移植物抗宿主病通常发生在同种异体HSCT后。受急性GvHD影响的三种主要组织是皮肤、肝脏和胃肠道。临床上，当HSCT的接受者出现任何或全部以下体征或症状时，诊断受到怀疑：皮炎(皮疹)、皮肤水疱、伴随或不伴随腹泻的痉挛性腹痛、持续恶心和呕吐、肝炎(胆红素和/或肝酶升高)。症状大多数以供体植入开始，在HSCT后100天前发生，但也可能迟发。急性GvHD是由组织学证据确证的临床诊断。急性GvHD可按照受累器官的数目和程度而分级。目前的分级系统衍生自1974年的Glucksberg第一aGvHD分类(Glucksberg等人，1974,Transplantation(《移植》)；18:4295-304)。近期的数据支持评级系统的使用，因为它能够将患者细分到并发症和死亡的风险类别。在这种系统中，根据三种器官受累的程度或阶段可将患者划分为四个级别(I-IV)之一。皮肤按照受累体表的百分比分级，肝脏按照胆红素升高程度分级，以及胃肠道按照腹泻量进行分级。使用这些标准，将每个患者分入单个级别(Jacobsohn等人，2007，OrphanetJ.ofRareDiseases(《罕见疾病Orphanet杂志》)；2:35)。GvHD的各种临床表现是已知的。最早和最常见的表现是皮肤GvHD。这实质上是斑丘疹，其可始于身体任何地方，但通常始于手掌并唯一受累。患者可能会抱怨受影响区域的瘙痒或触痛。在严重的情况下，可能会出现水泡。胃肠道表现包括腹泻，这可能变成流血、绞痛、恶心、呕吐以及不能运作。此外，来自高胆红素血症的黄疸是肝脏GvHD的标志(Jacobsohn等人，2007，见上文)，尽管已认识到伴随肝酶升高的GvHD的肝炎变形类似于急性病毒性肝炎(Akpek等人，2002，Blood(《血液》)；100:3903-3907)。即使甲泼尼龙未在任何欧洲国家注册用于这种指征，但是其被认为是急性GvHD一线治疗中当前的护理标准。用甲泼尼龙2mg/kg/天进行的急性GvHD一线治疗在超过50％的患者中是有效的，但仅在1/3患者中产生持续反应。无响应者进行二线治疗，所述二线治疗基于在这种指征下没有注册的免疫抑制剂组合。二线治疗很大程度上是不理想的，在大多数大型临床试验中一年存活率为30％。这些策略中没有一种达到变成护理标准的成功水平。经过30年移植经验后，类固醇难治的急性GvHD(aGvHD)大体上仍然是无法治愈的疾病。必须强调的是，耐类固醇治疗的aGvHD患者具有非常有限的治疗选择，目前对于这种临床情况没有权威的治疗。这种情况危及生命，特别是由于这种患者群体的死亡率增加，特别是继发于感染。这种患者群体的任何临床相关结果将具有明显益处，因为其会为类固醇耐药性aGvHD患者提供临床相关的优势。此外，用于造血干细胞移植后辅助植入的方法将会是有用的。植入是移植的干细胞在身体大骨中心找到进入骨髓空间的路径的过程。只有在那时，移植的干细胞才可以产生新的血细胞。专家们并不完全确定这一进程是如何发生的，但是一般认为这是一个漫长的过程：注入骨本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种特异性结合CD26的分离的抗体，所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，其中所述重链可变区包含序列WTVVGPGYFDV(SEQ ID NO:1)，和/或其中所述轻链可变区包含序列QQRSSYPNT(SEQ ID NO:2)和/或序列GQGYSYPYT(SEQ ID NO:3)。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.02.19 EP 13425029.91.一种特异性结合人CD26的分离的抗体，包含重链可变区和轻链可变区，其中a)重链可变区包含VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3，所述VHCDR1由SEQIDNO：133的序列组成，所述VHCDR2由SEQIDNO：134的序列组成，所述VHCDR3由SEQIDNO：1的序列组成；和b)轻链可变区包含VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3，所述VLCDR1由SEQIDNO：129的序列组成，所述VLCDR2由SEQIDNO：130的序列组成，所述VLCDR3由SEQIDNO：2的序列组成；和轻链可变区包含VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3，所述VLCDR1由SEQIDNO：131的序列组成，所述VLCDR2由SEQIDNO：132的序列组成，所述VLCDR3由SEQIDNO：3的序列组成。2.根据权利要求1所述的抗体，其中所述重链可变区包含保藏在热那亚(意大利)的CBA-ICLC、保藏为PD12002的杂交瘤细胞系产生的抗体的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3。3.根据权利要求1所述的抗体，其中所述轻链可变区包含保藏在热那亚(意大利)的CBA-ICLC、保藏为PD12002的杂交瘤细胞系产生的抗体的VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3。4.根据权利要求1所述的抗体，其中所述轻链可变区由氨基酸序列组成，所述氨基酸序列选自由SEQIDNOs：4和6-21，SEQIDNO：4的氨基酸序列的变体组成的组，所述SEQIDNO：4的变体具有与SEQIDNO：4至少90％的序列一致性。5.根据权利要求1-4中任一项所述的抗体，其中所述轻链可变区由选自SEQIDNOs：4的氨基酸序列组成。6.根据权利要求1-4中任一项所述的抗体，其中所述重链可变区由选自SEQIDNOs：22-47以及它们的变体的氨基酸序列组成，所述变体与选自SEQIDNOs：22-47的氨基酸序列具有至少90％的序列一致性。7.根据权利要求1-4中任一项所述的抗体，其中所述重链可变区由SEQIDNO：26的氨基酸序列组成。8.根据权利要求1-4中任一项所述的抗体，其中所述抗体由与保藏在热那亚(意大利)的CBA-ICLC、保藏为PD12002的杂交瘤细胞系产生的抗体相同的重链序列和相同的轻链序列组成。9.根据权利要求1-4中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含轻链恒定区，所述轻链恒定区由选自SEQIDNO：48及其变体的氨基酸序列组成，所述变体具有与SEQIDNO：48至少90％的序列一致性。10.根据权利要求1-4中任一项所述的抗体，其中所述抗体具有选自IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgM、IgA、IgD和IgE的抗体同型。11.根据权利要求1-4中任一项所述的抗体，所述抗体是IgG2B类，和/或其中所述抗体包含SEQIDNO：49给出的氨基酸序列或其变体，所述变体具有与SEQIDNO：49至少90％的序列一致性。12.根据权利要求1-4中任一项所述的抗体，其中所述抗体是重组抗体。13.根据权利要求1-4中任一项所述的抗体，其中所述抗体是嵌合抗体。14.根据权利要求1-4中任一项所述的抗体，其中所述抗体是人源化抗体。15.根据权利要求1-4中任一项所述的抗体，其中所述抗体是人抗体。16.根据权利要求1-4中任一项所述的抗体，其中所述抗体是抗体片段。17.根据权利要求1-4中任一项所述的抗体，其中所述抗体是双特异性抗体。18.根据权利要求1-4中任一项所述的抗体，其中所述抗体是单特异性抗体。19.根据权利要求1-4中任一项...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·F·迪纳罗，
申请(专利权)人：阿迪恩内有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士;CH