本发明专利技术涉及药物领域，具体涉及具有抑制紧密连接蛋白，预防和治疗乳腺癌术后癌症的复发和转移的多肽。其序列为FILAFLAILVAAWYTAWYFYD是全新的序列，它们可以在体外抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移，并在体内试验中提高荷瘤小鼠生存率，具有潜在的新药开发价值。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及，具体涉及具有抑制紧密连接蛋白，预防和治疗乳腺癌术后癌症的复发和转移的多肽。
技术介绍
女性乳腺是由皮肤、纤维组织、乳腺腺体和脂肪组成的，乳腺癌是发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤。乳腺癌中99%发生在女性，男性仅占1%。目前乳腺癌已成为威胁女性身心健康的常见肿瘤。乳腺并不是维持人体生命活动的重要器官，原位乳腺癌并不致命；但由于乳腺癌细胞丧失了正常细胞的特性，细胞之间连接松散，容易脱落。癌细胞一旦脱落，游离的癌细胞可以随血液或淋巴液播散全身，形成转移，危及生命。如何消灭某种癌症的远处转移或防止复发，是癌症治疗方法中不可缺少的组成部分，也是目前正在探讨的治疗乳腺癌热点问题。紧密连接蛋白与恶性肿瘤的发生和发展有着密切关系，Claudin蛋白是细胞间的紧密连接蛋白的主要结构之一。早期研宄确定蛋白紧密连接-2 (claudin-2)是乳腺癌肝转移的重要功能性调解因子。近来的一项研宄发现claudin-2在肝脏转移性乳腺癌细胞中特异表达。最后，研宄表明，claudin-2的细胞外循环部位对介导肿瘤细胞/肝细胞相互作用以及乳腺癌细胞在体内形成肝转移的能力是必不可少的。因此，在乳腺癌肝转移过程中，claudin-2在乳腺癌细胞和肝细胞之间相关作用过程中从紧密连接复合体状态转变成粘附分子来发挥作用。减少claudin-2的表达，无论是在肿瘤细胞或原代肝细胞中，都会抑制这些异型细胞与肝细胞之间的相互作用，从而，抑制肿瘤的转移，可以预防和治疗乳腺癌术后癌症的复发和转移。目前，没有成熟开发的紧密连接蛋白抑制剂多肽问世，用于预防和治疗乳腺癌术后癌症的复发和转移。
技术实现思路
专利技术目的 本专利技术提供全新的序列，该序列为紧密连接蛋白抑制剂，对乳腺癌具有很好的疗效。技术方案 紧密连接蛋白抑制剂多肽，其特征在于其序列为FILAFLAILVAAWYTAWYFYD。紧密连接蛋白抑制剂多肽在预防和治疗乳腺癌术后癌症的复发和转移药物中的应用。有益效果 利用固相合成法化学合成紧密连接蛋白抑制剂多肽，该多肽具有全新的序列，该多肽可体外抑制紧密连接蛋白，预防和治疗乳腺癌术后癌症的复发和转移。我们发现的紧密连接蛋白抑制剂多肽可以同时抑制乳腺癌细胞迀移和增殖的活力，并在体内试验中提高荷瘤小鼠生存率，具有潜在的新药开发价值。【具体实施方式】实施例1 紧密连接蛋白抑制剂多肽乳腺癌细胞MCF-7迀移的作用。采用划痕实验。先用marker笔在24孔板背后，用直尺比着，均匀得划横线，大约每隔0.5~lcm—道，横穿过孔。每孔穿过3条线；将成对数生长的MCF-7细胞，以1.0X105加入24孔培养板中，培养24h。第二天用10 μ I枪头比着直尺，垂直于背后的横线划痕，以划痕和背后横线的交叉点为固定观察位点；实验孔、阳性药物对照孔分别加入不同浓度的实验药物紧密连接蛋白抑制剂多肽(上海生工合成)和阳性对照药物长春新碱；空白组加入相同体积的溶剂，每孔设五个复孔?’放入37°C、5%C02培养箱，培养。按0，6，12，24，36小时，拍照；测量0，6，12，24，36h划痕宽度。以不同的时间点，记录每孔三个固定位置处划痕宽度的变化，即为细胞迀移距离。按照公式计算迀移率(migrat1n rate，MR):迀移率(MR)=(实验第η小时的划痕宽度一实验第O小时的划痕宽度)X 100%/实验第O小时的划痕宽度。结果，随紧密连接蛋白抑制剂多肽浓度增加，迀移抑制率逐渐下降，说明紧密连接蛋白抑制剂多肽能够抑制乳腺癌细胞MCF-7迀移，抑制率为92.1%。实施例2 紧密连接蛋白抑制剂多肽对体外培养人乳腺癌细胞的生长和存活IC50。采用MTT比色法。将对数生长的人乳腺癌细胞，以1.0X 15加入96孔培养板中，培养24h，实验孔、阳性药物对照孔分别加入不同浓度的实验药物紧密连接蛋白抑制剂多肽(上海生工合成)和阳性对照药物紫杉醇；空白组加入相同体积的溶剂。每孔设五个复孔，培养4811，分别在他、211、811、1411、2011、2411、3611、，4811每孔加入MTT，作用4h后，加入DMS0，孵育30min，在酶标仪620nm处测定吸光度A值，按公式人乳腺癌细胞生长抑制率=(1-实验组吸光值/对照组吸光值)X 100%。计算出实验药物的IC50为6.21 μ M。实施例3 用肿瘤模型检测紧密连接蛋白抑制剂多肽的体内活力。建立MCF-7肿瘤模型，阳性对照药物紫杉醇；空白组加入相同体积的溶剂，实验组多肽(上海生工合成)设3个剂量:0.25、0.5、1.0μΜ /Kg。21天后，观察小鼠存活数量，计算存活率。结果显示，紧密连接蛋白抑制剂多肽可有效地保护小白鼠，提高荷瘤小鼠的生存率，生存率达到69.0%。【主权项】1.紧密连接蛋白抑制剂多肽，其特征在于其序列为FILAFLAILVAAWYTAWYFYD。2.如权利要求1所述的紧密连接蛋白抑制剂多肽在预防和治疗乳腺癌术后癌症的复发和转移药物中的应用。【专利摘要】本专利技术涉及药物领域，具体涉及具有抑制紧密连接蛋白，预防和治疗乳腺癌术后癌症的复发和转移的多肽。其序列为FILAFLAILVAAWYTAWYFYD是全新的序列，它们可以在体外抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移，并在体内试验中提高荷瘤小鼠生存率，具有潜在的新药开发价值。【IPC分类】A61P35-04, A61P35-00, C07K14-00, A61K38-16【公开号】CN104725487【申请号】CN201510157188【专利技术人】罗瑞雪 【申请人】苏州普罗达生物科技有限公司【公开日】2015年6月24日【申请日】2015年4月6日本文档来自技高网...
【技术保护点】
紧密连接蛋白抑制剂多肽，其特征在于其序列为FILAFLAILVAAWYTAWYFYD。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：罗瑞雪，
申请(专利权)人：苏州普罗达生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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