一种蛋白酶在皮革处理中的可视化跟踪检测方法技术

一种蛋白酶在皮革处理中的可视化跟踪检测方法，首先在碱性条件下用异硫氰酸荧光素对蛋白酶进行标记得到FITC标记酶；然后将标记酶在室温避光条件下对剪掉毛的皮块进行处理，将标记酶处理后皮块制备切片在荧光显微镜下观察酶在皮中的分布状态。本发明专利技术利用FITC的强荧光特性实现对酶在皮中的渗透及其对皮作用程度的检测，根据处理时间的不同获得酶在皮中的渗透方式：酶首先通过毛孔及毛囊周围渗透进入皮中，然后逐渐扩散于皮基质中对纤维间质蛋白作用。本发明专利技术为酶在制革中的应用提供理论支持，根据制革不同处理阶段皮胶原纤维结构，选择合适分子量的酶处理皮胶原，通过分析酶在皮胶原中的渗透性和作用程度，达到酶对皮蛋白及胶原的可控处理。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】，首先在碱性条件下用异硫氰酸荧光素对蛋白酶进行标记得到FITC标记酶；然后将标记酶在室温避光条件下对剪掉毛的皮块进行处理，将标记酶处理后皮块制备切片在荧光显微镜下观察酶在皮中的分布状态。本专利技术利用FITC的强荧光特性实现对酶在皮中的渗透及其对皮作用程度的检测，根据处理时间的不同获得酶在皮中的渗透方式：酶首先通过毛孔及毛囊周围渗透进入皮中，然后逐渐扩散于皮基质中对纤维间质蛋白作用。本专利技术为酶在制革中的应用提供理论支持，根据制革不同处理阶段皮胶原纤维结构，选择合适分子量的酶处理皮胶原，通过分析酶在皮胶原中的渗透性和作用程度，达到酶对皮蛋白及胶原的可控处理。【专利说明】
本专利技术涉及一种酶在皮胶原纤维中的检测方法，具体涉及。
技术介绍
随着制革业污染问题的日趋严重，环保型制革用材料的研究引起了制革研究者的广泛关注。其中，酶制剂作为一种高效、环保的材料，在制革中的应用历史已久，主要利用水解酶去除皮中的蛋白质、脂肪等非胶原成分，为后期工序中材料的渗透与结合做准备(Swarna V.Kanth;R.Venba;B.Madhan;N.K.Chandrababu;S.S本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蛋白酶在皮革处理中的可视化跟踪检测方法，其特征在于，包括以下步骤：1）以pH值为7.0～9.0的缓冲液为溶剂，分别配制酶溶液和异硫氰酸荧光素溶液；2）向酶溶液中滴加异硫氰酸荧光素溶液混合均匀，使得到的反应体系中酶与异硫氰酸荧光素的质量比为100：（0.5～5.0），然后于4℃下避光反应10h，得到反应液；3）将反应液装入分子截流范围小于酶分子量的透析袋中，然后放入pH值为7.0～9.0的缓冲液中震荡透析直到透析得到的析出液中不存在游离的异硫氰酸荧光素，停止透析，此时透析袋中剩余物为FITC标记酶溶液；4）将透析袋中的FITC标记酶溶液取出后用pH值为7.0～9.0的缓冲液稀释，得到浓度为0...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：马建中，侯雪艳，高党鸽，吕斌，
申请(专利权)人：陕西科技大学，
类型：发明
国别省市：