Tβ4-EGF融合基因的制备及其应用制造技术

技术编号:9334386 阅读:114 留言:0更新日期:2013-11-13 13:00
本发明专利技术涉及一种Tβ4-EGF融合基因的制备及其应用,根据人Tβ4基因库序列设计引物,以插入人Tβ4完整编码区基因的质粒pET-32a为模板进行PCR扩增;在T4DNA连接酶的作用下定向连接至载体pTXB1;再以重组质粒pTXB1-Tβ4为模板,设计引物,采用两步PCR法扩增获得Tβ4-EGF融合基因;所述引物含有NdeI和XhoI酶切位点。与现有技术相比,具有以下技术效果:本发明专利技术Tβ4-EGF融合蛋白以可溶性非包涵体形式存在,经几丁质亲和层析柱纯化,纯化操作简便,表达纯度高,经Tβ4-EGF融合蛋白处理后,培养的3T3细胞增殖速度加快,增殖得到促进。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种Tβ4?EGF融合基因的制备方法,其特征在于:根据人Tβ4基因库序列设计引物,以插入人Tβ4完整编码区基因的质粒pET?32a为模板进行PCR扩增;在T4DNA连接酶的作用下定向连接至载体pTXB1;再以重组质粒pTXB1?Tβ4为模板,设计引物,采用两步PCR法扩增获得Tβ4?EGF融合基因;所述引物含有Nde?I和Xho?I?酶切位点。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:唐旭东赵双杨永宋瑜丽谢志勇
申请(专利权)人:广州市容大生物技术有限公司深圳清华大学研究院
类型:发明
国别省市:

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