一种罗素伐他汀中间体的制备方法技术

本发明专利技术涉及罗素伐他汀中间体(R)-3-羟基戊二酸单甲酯和羟基被保护的(R)-3-羟基戊二酸单甲酯的制备方法，该方法以(R)-4-氰基-3-羟基丁酸甲酯为底物，使其在酶的作用下反应生成所述(R)-3-羟基戊二酸单甲酯，特别是，所述的酶为重组腈水解酶，所述的反应在pH为7.0~9.0的水相缓冲液中以及温度25℃~35℃下进行。本发明专利技术方法通过采用特定的重组腈水解酶，解决了现有生物法中底物浓度过低，转化率低的问题。该方法反应条件温和，反应效率高，操作简便，具有重要的工业应用价值。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种(R)?3?羟基戊二酸单甲酯的制备方法，该方法以(R)?4?氰基?3?羟基丁酸甲酯为底物，使其在酶的作用下反应生成所述(R)?3?羟基戊二酸单甲酯，其特征在于：所述的酶为重组腈水解酶，该重组腈水解酶的制备方法为：将含有腈水解酶基因的重组大肠杆菌单菌落接种到含氨苄青霉素抗性的液体LB培养基中，于35～40℃下活化8～12小时，将活化后得到的培养物接种到含氨苄青霉素抗性的液体LB培养基中，于35～40℃下振荡培养，培养至OD600值达到0.6～0.8时，加入诱导剂，于25～33℃下继续培养8～12小时，离心，收集沉淀物，加入磷酸盐缓冲液得悬浮液，将悬浮液置于冰水浴中超声破碎8～12分钟，再离心，将上清液预冻至温度降至?10℃～?25℃，然后冷冻干燥24～48小时，即得冻干的粉状重组腈水解酶；所述的反应在pH为7.0～9.0的水相缓冲液中以及温度25℃～35℃下进行。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陶军华，唐苏苏，李斌，刘根，
申请(专利权)人：苏州汉酶生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：