一种高速逆流色谱和高效液相色谱联用制备高纯度聚戊烯醇类脂的方法技术

本发明专利技术公开了一种高速逆流色谱和高效液相色谱联用制备高纯度聚戊烯醇类脂的方法，以银杏叶、松针叶和桑叶为原料，用无水丙酮或无水C1～C3的醇为提取溶剂，在低温微波或超声波提取，制备聚戊烯醇软膏。以正己烷、乙腈和丙酮等溶剂按比例混合作为高速逆流溶剂体系，混合充分后静置，上相为固定相，下相为流动相，取聚戊烯醇类脂软膏溶于下相中作为供试品，将固定相充满高速逆流色谱仪的分离柱，设定在500～1000r/min转速下，以1～5mL/min的流速注入流动相，在波长210～230nm的紫外检测器检测，离心过程先用正相离心旋转180～240min，再用反相离心旋转30～60min，待流动相开始流出色谱柱时，收集馏出液，将不同组分收集合并，经HPLC检测，制备纯度为60～90％的聚戊烯醇类脂。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种应用高速逆流色谱法联用高效液相色谱从植物叶子提取分离聚戊烯醇类脂化合物的方法，属于天然药物分离和医药保健品应用领域。
技术介绍
目前国际上对于天然产物的分离技术大多采用超临界萃取技术、大孔树脂柱层析技术、分子蒸馏技术、膜分离技术等，但对于含量很低且生物活性高的天然产物，面对社会的进步和人类对高科技含量精制产品的要求，极其缺乏既能实现高纯度物质的分离纯化，又能实现相当量级制备能力的新技术。如果没有这样的新技术，就很难实现新一代产物的研发与生产，就不能实现高纯度标准物质的制备和高精度质量检定与控制方法的建立。因此，面对分离技术这一技术瓶颈，高速逆流色谱技术(HSCCC)的出现，为天然药物活性成分的分离纯化与制备带来了更优的解决方案。高速逆流色谱技术(HSCCC)，是一种以液液分配为基本原理，不采用任何固态的支撑体(如柱填料、吸附剂、亲和剂、板床、筛膜，等)，因此，对于天然产物复杂混合物中某些特定成分的高纯度单体的分离纯化与制备中有如下优势特点:1.高分离效率:分离在旋转运动中进行，两相溶剂都被剧烈振动的离心力场甩成微小的颗粒，样品各组分会在两相微粒的极大表面上分配，并本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高速逆流色谱和高效液相色谱联用制备高纯度聚戊烯醇类脂的方法，其特征在于由以下步骤组成：第一步，聚戊烯醇类脂提取将富含聚戊烯醇类脂的新鲜植物叶子，室温阴干，破碎至100目以下粉末，加入无水丙酮或C1～C3醇中任一种溶剂，叶子与溶剂按质量比为1∶8～30，在室温～80℃浸泡10～72小时，或经微波提取或超声波提取10～60分钟，提取两次，合并提取液，真空回收有机溶剂，浓缩物为聚戊烯醇类脂软膏，聚戊烯醇类脂含量5～20％；第二步，高速逆流色谱分离1)按体积比选择正己烷∶乙腈∶丙酮＝3～4∶0.5～1∶0.8～1.5溶液作为高速逆流萃取溶剂体系，三种溶剂混合充分后静置，按上下两相分开，取上相为固定...

【技术特征摘要】
1.一种高速逆流色谱和高效液相色谱联用制备高纯度聚戊烯醇类脂的方法，其特征在于由以下步骤组成: 第一步，聚戊烯醇类脂提取 将富含聚戊烯醇类脂的新鲜植物叶子，室温阴干，破碎至100目以下粉末，加入无水丙酮或Cl C3醇中任一种溶剂，叶子与溶剂按质量比为1: 8 30，在室温 80°C浸泡10 72小时，或经微波提取或超声波提取10 60分钟，提取两次，合并提取液，真空回收有机溶齐U，浓缩物为聚戊烯醇类脂软膏，聚戊烯醇类脂含量5 20% ; 第二步，高速逆流色谱分离 1)按体积比选择正己烷:乙腈:丙酮=3 4: 0.5 1: 0.8 1.5溶液作为高速逆流萃取溶剂体系，三种溶剂混合充分后静置，按上下两相分开，取上相为固定相，下相为流动相，超声脱气； 2)取聚戊烯醇类脂软膏溶于下相中作为供试样品，所述聚戊烯醇的软膏与下相的质量体积比(g/mL)为1: 20 80 ; 3)将固定相充满高速逆流色谱仪的多层线圈分离柱，高速逆流色谱仪分离条件在500 1000r/min转速下，以I 5mL/min的流速注入流动相,在波长210 230nm的紫外检测器检测，当明显有流动相流出时，开始供试样品溶液进样，整个离心过程先采用正相离心旋转，时间为180 240min，再采用反相离心旋转，时间为30 60min，用自动馏分收集器收集馏出液；第三步，高效液相色谱检测 将第二步自动馏分收集器收集馏出液，用高效液相色谱进行检测聚戊烯醇类脂部位集分，合并聚戊烯醇类脂集分，回收有机溶剂，浓缩物为黄色聚戊烯醇类脂油状物，聚戊烯醇类脂含量60% 90%。2.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：王成章，闵凡芹，何源峰，原姣姣，陈虹霞，叶建中，周昊，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院林产化学工业研究所，
类型：发明
国别省市：