高速逆流色谱分离制备高纯度DHA方法技术

本发明专利技术公开了高速逆流色谱分离制备高纯度DHA方法。本发明专利技术提供了一种提取DHA的方法，包括如下步骤：1）将微藻油在氢氧化钾–甲醇溶液中进行皂化处理，得到皂化处理后溶液；2）将所述皂化处理后溶液进行高速逆流色谱分离，得到二十二碳六烯酸；所述微藻油为从微藻细胞中提取的油脂。本发明专利技术的实验证明，本发明专利技术首次利用高速逆流色谱技术从微藻油中分离纯化得到高纯度的DHA，其工艺更加简单、操作方便、样品无损失、高效快速、制备量大及纯度高，是一种适合大量制备生产高纯度不饱和脂肪酸的良好方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术生物
，尤其涉及一种高速逆流色谱分离制备高纯度DHA方法。
技术介绍
二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid, DHA)在改善人脑记忆、治疗心血管疾病、防治老年痴呆以及抗肿瘤等方面有着重要的生理调节功能，在疾病预防及治疗方面已经引起了人们的广泛关注。目前，DHA的主要商业来源为深海鱼油，由于渔业资源的日益枯竭，加之鱼油产品提纯工艺复杂且具有难以去除的鱼腥味等，使得人们渐渐把目光转向新的DHA资源。微生物发酵生产DHA以其独特的优势而成为国内外研究的热点之一，其中利用微藻培养生产DHA具有更大的优势和生产潜能。微藻具有生长周期短，繁殖速度快，可塑性强，对营养要素要求简单等特点，而且部分可以通过生物工程方法和培养条件的控制达到高密度发酵培养。目前已发现多种微藻中富含多不饱和脂肪酸(PUFAs)，如裂壶藻、隐甲藻等。微藻是海洋食物链中多不饱和脂肪酸的最初生产者，有些藻细胞中多饱和脂肪酸DHA、EPA含量较高，其相对含量高达细胞干重的5%飞％，而且所含的多不饱和脂肪酸种类比较单纯，进行单一成分的分离提纯相对容易一些，因而利用海洋微藻生产多不饱和脂肪酸是一个本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种提取二十二碳六烯酸的方法，包括如下步骤：1）将微藻油进行皂化处理，得到皂化处理后溶液；2）将所述皂化处理后溶液进行高速逆流色谱分离，得到二十二碳六烯酸；所述微藻油为从微藻细胞中提取的油脂。

【技术特征摘要】
1.一种提取二十二碳六烯酸的方法，包括如下步骤: 1)将微藻油进行皂化处理，得到皂化处理后溶液； 2)将所述皂化处理后溶液进行高速逆流色谱分离，得到二十二碳六烯酸； 所述微藻油为从微藻细胞中提取的油脂。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于: 步骤2)中，所述高速逆流色谱采用的溶剂为正庚烷-乙腈-乙酸-甲醇混合液；所述正庚烷-乙腈-乙酸-甲醇混合液为将正庚烷、乙腈、乙酸和甲醇按照体积比为4:5:1:1混合得到； 所述高速逆流色谱的转速为850-900rpm ;所述高速逆流色谱的溶剂的流速为2_3mL/min ； 所述高速逆流色谱的溶剂的下相为流动相，溶剂的上相为固定相。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于: 步骤I)中，所述皂化处理为将微藻油在氢氧化钾-甲醇溶液中进行皂化处理，具体按照包括如下步骤的方法进行: A、将所述微藻油与所述氢氧化钾-甲醇溶液混合后，调pH值为酸性，得到酸性混合 液； B、用乙醚萃取所述酸性混合液，收集乙醚相； C、去除所述乙醚相中的乙醚，再溶解，得到皂化处理后溶液； 步骤2)中，所述高速逆流色谱的转速为900rpm ； 所述高速逆流色谱的溶剂的流速为3mL/min。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于: 步骤A中，所述氢氧化钾-甲醇溶液的浓度为0.4-0.6mol/L ； 所述微藻油...

【专利技术属性】
技术研发人员：林祥志，荣辉，马瑞娟，林汝榕，杨善军，王昭凯，马勇，陈水波，
申请(专利权)人：国家海洋局第三海洋研究所，
类型：发明
国别省市：