一种萃取分离海洋微藻发酵液提取DHA的方法技术

本发明专利技术涉及一种萃取分离海洋微藻发酵液提取DHA的方法，包括以下步骤：（1）将DHA微藻发酵液脱水干燥，得DHA藻粉；（2）选取低沸点的萃取剂萃取DHA藻粉，得到萃取液；（3）对萃取液进行真空浓缩，脱除溶剂后得到DHA毛油；（4）将DHA毛油进行脱色和蒸汽除臭，然后浓缩得到DHA藻油成品。本发明专利技术可提高微藻发酵生产DHA的提取总收率，降低生产成本，减少三废排放量，同时萃取剂可回收再利用，减少环境污染。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物油脂的提取方法，具体地说，涉及一种萃取分离海洋微藻发酵液提取DHA的方法。
技术介绍
DHA，全名二十二碳六烯酸，俗称脑黄金，是一种对人体非常重要的多不饱和脂肪酸，属于Omega-3不饱和脂肪酸家族中的重要成员。DHA是神经系统细胞生长及维持的一种主要元素，是大脑和视网膜的重要构成成分，在人体大脑皮层中含量高达20%，在眼睛视网膜中所占比例最大，约占50%，因此，对胎儿、婴儿的智力和视力发育至关重要。医学研究表明，DHA的主要作用可促进胎儿大脑发育、促进视网膜光感细胞的成熟、增进大脑细胞之发育，还可以用于癌症治疗、抑制炎症、降低血脂、预防心脏血管疾病、改善老年痴呆症等。 早期DHA产品多以富含DHA和EPA的深海鱼油(通常为金枪鱼油)为原料制得，以二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)的混合形式存在,我们通常叫做Omega-3或多烯酸乙脂。鱼油DHA生产过程简单，价格便宜，在过去较长一段时间作为主要的DHA来源，广泛用做婴幼儿和孕妇食品中的营养添加剂，但是由于近年来渔业资源的逐步耗竭及萎缩，原料来源受气候及自然环境影响很大。随着世界范围内的污染加剧，鱼油中所含有的持续性有机污染物(POPs)及其危害逐步引起公众的重视，例如滴滴涕(DDT)、化学杀虫剂、多氯联苯类物质(PCBs)、二恶英(Dioxin)和六氯苯(HCB)等，使得鱼油来源的DHA面临越来越大的困境。与鱼油的境遇相反，微藻来源的DHA因为整个生产过程可全程进行严格的人工控制，从微藻纯种培养到精炼都需严格消毒，无菌操作，并可采用国际认可的食品安全生产及控制管理技术，所生产的DHA纯度高、无污染，不含鱼腥味，质量远胜鱼油DHA。微藻DHA也是美国FDA唯一批准的婴幼儿食品中的DHA补充剂，一些知名企业如美国亨氏、美国惠氏、福临门等企业的产品中所添加的DHA都是微藻DHA。因此，微藻DHA取代鱼油DHA是势在必行的趋势。目前，实际生产中所用的分离微藻DHA的方法主要有低温分级法、尿素包合法、溶剂法、超临界气体萃取法等。其中，低温分级法需要有大型制冷设备，耗能高，提取效率低；尿素包合法是一种比较简便有效的分离方法，但在实际生产中应用时，存在溶剂损耗大、排水和因尿素添加物而引起的废物处理等问题。超临界气体萃取法能分离出高纯度的DHA，但对碳数相同而双键数不同的脂肪酸的分离效果较差，且设备投资大，技术要求高，耗能亦较大。现有技术中也公开了多种发酵法生产DHA微藻油的工艺。如黄和，任路静等人在中国专利技术专利CN101168501A中公开了一种从隐甲藻中提取并精制富含DHA脂肪酸的工艺，先将隐甲藻发酵液絮凝处理再进行固液分离，通过碱破壁后再将细胞机械破碎，然后对破碎的菌体采用有机溶剂萃取，获得DHA粗油；DHA粗油经过脱胶、碱炼、脱色、脱臭后得到DHA精油。该工艺的不足之处在于，操作过程中对菌体先絮凝然后破壁，由于絮凝剂都是有机或无机的高分子物质，会将发酵液中的菌体聚集联结形成较大的絮状团粒，并附着在菌体表层形成一层包覆物，导致后续操作过程中破壁不充分，从而导致油脂的提取率偏低。詹光煌，吴轶等人在中国专利技术专利CN101585759中公开了一种从双鞭甲藻发酵液中提取DHA不饱和脂肪酸的方法，主要工艺过程是先将双鞭甲藻发酵液用盐酸溶液调节PH值，以无残留单体聚丙烯酰胺为絮凝剂絮凝，凝板框过滤得到滤饼，滤饼用复合纤维素水解酶加水配成的破壁液破壁，破壁后用离心机实现渣、水相、油相三相分离，重复2-5次后基本无油相，合并油相并水洗后即为含DHA毛油，毛油进入五级连续分子蒸馏，最终得DHA含量40-50%的不饱和脂肪酸。本专利技术采用转速8000-12000转/分钟的高速离心机进行分离直接得到毛油，而且毛油精制采用五级分子蒸馏，可有效地达到脱色、脱酸、脱臭的作用，但该技术的缺点是制备过程中需要首先进行生物酶破壁，再进行五级分子蒸馏，使得整个提取工艺路线长、流程复杂、能耗高
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术提供一种萃取分离海洋微藻发酵液提取DHA的方法，该方法可提高DHA的提取率，同时降低生产成本，减少三废排放量。其技术解决方案是一种萃取分离海洋微藻发酵液提取DHA的方法，其特征在于，包括以下步骤(1)将DHA微藻发酵液脱水干燥，得DHA藻粉；(2)选取低沸点的萃取剂萃取DHA藻粉，得到萃取液；(3)对萃取液进行真空浓缩，脱除溶剂后得到DHA毛油；(4)将DHA毛油进行脱色和蒸汽除臭，然后浓缩得到DHA藻油成品。优选地，步骤(I)中的脱水干燥包括三级脱水一级脱水是向微藻发酵液中加入絮凝剂，使藻液与藻体分离；二级脱水是将一级脱水得到的藻体沉淀进行离心分离，去除絮凝剂和水份，得到泥状藻体；三级脱水是将泥状藻体进行冷冻干燥，得到藻粉。优选地，所述絮凝剂为壳聚糖、聚合氯化铝、聚丙烯酰胺、明矾、硫酸铝、无水氯化钙、聚合硫酸铁的水溶液中的一种或任意几种的混合物，其加入量为发酵液质量的I.0-2. 0%。优选地，以质量百分比计，步骤(I)中所述DHA藻粉的含水量彡5%。优选地，步骤(2)所述低沸点的萃取剂为6#有机溶剂、石油醚、乙醚、己烷、丙酮、氯仿、乙醇、甲醇、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丙酸乙酯中的一种或任意几种的混合物。优选地，步骤(2)所述萃取剂的加入量占发酵液质量的40% 60%，萃取温度为45 60°C,萃取次数为2-4次。优选地，步骤(3)所述真空浓缩的真空度彡O. 4Kpa，且溶剂的脱除时间为I 5小时。优选地，在进行步骤(4)之前，可以先对步骤(3)所得到的DHA毛油进行纯化向毛油中加入质量百分比浓度分别为50-85%磷酸溶液和30-70%的NaCl溶液，加入量分别为发酵液质量的5% 20%，在50 65°C温度下搅拌均匀后静置O. 5 I小时，取上层油液，水洗至中性，然后加入质量百分比浓度为5-10%的NaOH溶液，搅拌40_50min，搅拌速度为30 80r / min，使皂粒絮凝，然后将油升温到80 100°C，当皂粒明显沉降时，停止搅拌，静置沉降，分离皂脚，再用80 100°C的热水水洗，然后真空干燥。应当指出的是，本专利技术步骤(4)所述DHA毛油的脱色、蒸汽除臭以及浓缩工艺为本领域技术人员的熟知工艺。优选地，所用脱色剂为活性白土，其加入量占毛油质量的I 5%，脱色温度为75 85°C，脱色时间为20 40分钟；水蒸气除臭温度为75 85°C，真空度小于O. 4Kpa，脱臭时间为O. 5 I小时。本专利技术采用微藻发酵液为原料提取DHA微藻油。其中所述微藻为海洋微生物微藻和藻状菌，如金藻、甲藻、隐藻、硅藻、隐甲藻、海洋小球藻、吾肯氏壶藻、破囊壶菌或裂殖壶菌等，其中优选隐甲藻发酵液、吾肯氏壶藻发酵液、破囊壶菌发酵液或裂殖壶菌发酵液。这些微藻和藻状菌经过常规发酵后，得到含有DHA的发酵液。本专利技术对所述发酵过程也没有特别的限制，可以采用本领域技术人员熟悉的斜面 培养、摇床液种培养、种子罐培养、发酵罐培养等。本专利技术的有益技术效果是本专利技术选取低沸点的萃取剂，采用干燥、萃取、蒸馏、脱色、除臭、浓缩工艺步骤提取DHA，其中萃取步骤可降低母液的产生量，减少DHA在母液中的含量，使DHA提取率大大提高，降低生产成本，减少三废排放量；蒸馏步本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种萃取分离海洋微藻发酵液提取DHA的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将DHA微藻发酵液脱水干燥，得DHA藻粉；（2）选取低沸点的萃取剂萃取DHA藻粉，得到萃取液；（3）对萃取液进行真空浓缩，脱除溶剂后得到DHA毛油；（4）将DHA毛油进行脱色和蒸汽除臭，然后浓缩得到DHA藻油成品。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李悦明，张希铭，徐建春，夏修峦，
申请(专利权)人：青岛琅琊台集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：