本发明专利技术提供了一种臭茉莉HPLC标准指纹图谱及其建立方法与应用，所述方法包括供试品溶液的制备，对照品溶液的制备，色谱条件的选择，并用高效液相色谱仪进行测定，得到臭茉莉药材的指纹图谱。通过对11批次臭茉莉药材HPLC指纹图谱的对比，确定其共有指纹特征，得到标准指纹图谱。本发明专利技术具有方法简便、重现性好、特征峰多、准确可靠等特点。所建立的标准指纹图谱能有效地表征臭茉莉药材的质量。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物分析
，更为具体地，涉及臭茉莉HPLC指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱。
技术介绍
臭茉莉(别名:臭矢茉莉，臭茉莉，大髻婆，单茉莉，过墙风)，为马鞭草科植物臭茉莉的干燥茎或根，为常用中草药，现收载于《广东省中药材标准》，具有祛风除湿，利水消肿的功效，常用于治疗风湿骨痛，脚气水肿，支气管炎、高血压症及湿疹疥疮，皮肤瘙痒等皮肤疾病。广东省各地有产，以阳山，宝安，三水等地产出较多。其根茎均可入药微苦，平。归肝、脾、肾经，有祛风除湿，利水消肿的功效。用于风湿骨痛，脚气水肿；可治疗支气管炎、高血压病。外用治湿疹疥疮，皮肤瘙痒。臭茉莉原定名为Clerodendron fragrans auct.non.Vent., Clerodendronphilippinum Schauer var.simplex Moldenke,变种臭茉莉Clerodendron lindleyi Decne.ex Planch.和原变种重瓣臭茉莉 C.phi lippinum Schauer Var.philippinum。现有标准对臭茉莉质量控制只有性状鉴别及显微鉴别，国内外关于臭茉莉的研究报道极少见，尚没有对臭茉莉的指纹图谱的质量控制方法的相关报道。本专利技术是在对臭茉莉根和茎进行了系统的化学成分研究上，采用HPLC方法，建立能较全面反映臭茉莉药材质量的指纹图谱，对控制臭茉莉原料和产品的质量有重要意义。
技术实现思路
现有标准对臭茉莉质量控制只有性状鉴别及显微鉴别，质量控制方法水平不高，本专利技术所要解决的是对现有的臭茉莉的质量控制方法水平不高，提供了一种臭茉莉的标准指纹图谱，利用该标准图谱更好的控制臭茉莉的质量，保证药品使用的安全有效，同时本专利技术还提供了一种臭茉莉标准指纹图谱的建立方法和应用。本专利技术通过以下技术方案予以实现上述目的: 一种臭茉莉HPLC标准指纹图谱，其特征在于，包括13个共有特征峰，保留时间分别为:0.183,0.204,0.243,0.493,0.514,0.669,0.718,0.892,1.151,1.179,1.245,1.482、18.541min。—种臭茉莉HPLC标准指纹图谱，其特征在于，包括21个共有特征峰:以9号峰为对照峰(9号峰为毛蕊花糖苷峰，保留时间为18.54Imin )，其他的20个共有峰的相对保留时间为:0.183,0.204,0.243,0.493,0.514,0.669,0.718,0.892,1.151,1.179,1.245,1.482、1.493,1.517,1.605,1.635,1.743,1.795,2.044,2.203。一种臭茉莉HPLC标准指纹图谱的建立方法，包括如下步骤: 51.供试品溶液的制备:称取样品，加入提取溶剂，浸润1(Γ60分钟，超声提取3(Γ60分钟，过滤蒸干后溶解即得供试品溶液；52.指纹图谱的制作:将SI所得溶液过色谱分离柱，加入乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱，流速0.8 1.2mL/min,乙腈在洗脱过程中体积分数变化规律:(Tl2min, 14 17%; 12 18miη, 17 20%18 20min, 20 20%2(T35min，20 40%; 35 40min, 40 78%; 40 50min，78 88% ;检测波长327nm，柱温25 35°C ;在此条件下分析供试品溶液，得到臭茉莉的指纹图谱； S3.标准指纹图谱的确定:对11批臭茉莉建立HPLC指纹图谱，通过分析比较，确定共有特征峰，这些共有特征峰作为臭茉莉的标准指纹图谱。优选地，SI中所述提取溶剂为石油醚、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、50%甲醇、70%甲醇或70%乙醇；更为优选地，SI中所述提取溶剂为甲醇。优选地，SI中所述样品与提取溶剂的重量与体积比为1:25 50。优选地，SI中所述浸润的时间为30分钟，超声提取的时间为45分钟。优选地，S2中所述色谱分离柱为安捷伦Z0RBAX-C18 (250 mmX4.6 mm，5ym)、赛默飞 Hypersil 0DS2 (4.6mmX 250mm, 5 μ m)或菲罗门 Phenomenex Synergi 4uFusion-RP 80A (250 mmX4.6 mm)。优选地，S2中所述色谱分离柱为安捷伦Z0RBAX-C18 (250 mmX4.6 mm, 5 μ m)。优选地，S2中所述流速为1.0mL/min。优选地，S2中所述柱温为35 °C。一种如上所述臭茉莉HPLC标准指纹图谱在臭茉莉质量控制中的应用。利用臭茉莉HPLC标准指纹图谱控制臭茉莉质量的具体步骤如下: Sll.待测样品溶液的制备:称取样品，加入提取溶剂，浸润(Γ60分钟，超声提取3(Γ60分钟，过滤蒸干后溶解即得供试品溶液；S12.指纹图谱的制作:将SI所得溶液过色谱分离柱，加入乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱，流速0.8^1.2mL/min,乙腈在洗脱过程中体积分数变化规律:(Tl2min， Γ 7%; 12 18min, 17 20%18 20min, 2(T20%2(T35min，20 40%; 35 40min, 40 78%; 4(T50min, 78 88% ;检测波长327nm，柱温25 35°C ;在此条件下分析待测样品溶液，得到待测臭茉莉的指纹图谱； S2.将待测样品的HPLC图谱如上所述标准图谱对比，确定待测样品质量。本专利技术的有益效果是: (O目前执行的标准中尚无建立臭茉莉指纹图谱的检测方法标准，标准对臭茉莉质量控制只有性状鉴别及显微鉴别，质量控制方法水平不高，专利技术是在对臭茉莉根和茎进行了系统的化学成分研究上，采用HPLC方法，建立能较全面反映臭茉莉药材质量的标准指纹图谱。为药品生产及检测中提供了臭茉莉质量控制的高标准，可以更好的控制臭茉莉的质量，使质量可控，保证药品使用的安全有效。(2)本专利技术提供了一种建立臭茉莉标准指纹图谱的建立方法，提供了臭茉莉高水平的检测的操作标准和规范，方法简单，易操作，重复性好，可以全面监控臭茉莉的产品，以确保产品质量的稳定性。(3)本专利技术提供的臭茉莉的标准指纹图谱和检测方法，为行业内臭茉莉的质量控制提供了标准和操作规范，方法简单，易操作，重复性好，可以在原料采购、产品生产工艺流程中的各个步骤的质量进行监控，广泛推广应用。 (4)利用本专利技术的测定方法，可得到臭茉莉样品的指纹图谱色谱图。再借助计算机相似度辅助评价软件，将样品图与共有模式图谱比较，通过相似度计算，即可评价原料品种、产地、真伪优劣，以及判断产品质量的稳定性。附图说明图1.超声提取和热回流提取比较。图2.浸润时间的比较。图3.不同提取溶剂比较。图4.不同料液比提取比较。图5.不同洗脱系统的比较。图6.不同洗脱系统的比较。图7.不同流速的比较。图8.不同柱温的比较。图9.不同色谱柱的比较。 图10.臭末利指纹图谱；1.臭末利20100617 ；2.臭末利20100930 ；3.臭末利20101101；4.臭茉莉 20101102 ;5.臭茉莉 20110301 ;6.臭茉莉 220110302 ;7.臭茉莉20110303 ；8.臭茉莉 20110304 ;9.臭茉莉 20110501 ;10.臭茉莉 20120723 ;本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种臭茉莉HPLC标准指纹图谱，其特征在于，包括13个共有特征峰，保留时间分别为：0.183、0.204、0.243、0.493、0.514、0.669、0.718、0.892、1.151、1.179、1.245、1.482、18.541?min。
【技术特征摘要】
1.一种臭茉莉HPLC标准指纹图谱，其特征在于，包括13个共有特征峰，保留时间分别为:0.183,0.204,0.243,0.493,0.514,0.669,0.718,0.892,1.151,1.179,1.245,1.482、18.541min。2.一种臭茉莉HPLC标准指纹图谱，其特征在于，包括21个共有特征峰，保留时间分别为:0.183,0.204,0.243,0.493,0.514,0.669,0.718,0.892,1.151,1.179,1.245,1.482、1.493,1.517,1.605,1.635,1.743,1.795,18.541、2.044,2.203 min。3.一种臭茉莉HPLC标准指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括如下步骤: 51.供试品溶液的制备:精密称取样品，加入提取溶剂，浸润(Γ60分钟，超声提取3(Γ60分钟，过滤蒸干后溶解即得供试品溶液； 52.指纹图谱的制作:将SI所得溶液过色谱分离柱，加入乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱，流速0.8 .2mL/min,乙腈在洗脱过程中体积分数变化规律:(Tl2min, 14 17%; 12 18miη, 17 20%18 20min, 20 20%2(T35min，20 40%; 35 40min, 40 78%; 40 50min，78 88% ;检测波长327nm，柱温25 35°C ;在此...
【专利技术属性】
技术研发人员：成金乐，彭丽华，王慧玲，闵欢，
申请(专利权)人：中山市中智药业集团有限公司，
类型：发明
国别省市：
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