抗血管生成药剂及使用这种药剂的方法技术

抗血管生成药剂或多肽，其包含与CD2第一结构域基本相似的氨基酸片段，其中多肽包含由两个片段所形成的β-折叠。也包括使用这种药剂和多肽的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗血管生成药剂及使用这种药剂的方法先前相关申请数据本申请对2010年7月13日提交的序列号为61/363,933的美国临时专利申请要求优先权，其内容通过引用包含于此。
本公开内容涉及抑制或预防血管生成从而控制或治疗依赖血管生成的疾病，该疾病以血管增生或以依赖于血管增生为特征。本公开内容还涉及抗血管生成药剂与化学治疗剂的联合应用。
技术介绍
血管生成是从已有毛细血管形成新血管的过程，血管生成包括源自内皮祖细胞的血管生长。血管生成是一个由促血管生成分子和抗血管生成分子之间平衡调节的联合过程。血管生成的刺激（如缺氧或炎症细胞因子）导致血管生成生长因子，如血管内皮生长因子（VEGF）或成纤维细胞生长因子（FGF）的诱导表达和释放。这些生长因子刺激已存在的脉管系统中的内皮细胞（EC）增生并从组织中迁移出来形成新的内皮通路。血管生成包括内皮细胞增殖。粥样硬化斑块生长、糖尿病性视网膜病、退化性黄斑病、晶状体后纤维组织增生症、特发性肺纤维变性、急性成人呼吸窘迫综合征以及哮喘均与不适当或病理性的血管生成相关。此外，肿瘤进展与新血管形成相关联，新血管形成提供了一种结构向持续生长的肿瘤组织输送营养。尽管远在30多年前就首先提有提议以血液供给为靶点来减缓甚至中止癌症的进展，直到最近血管生成抑制剂才进入癌症治疗的主流。因此，本领域对减少病理性血管生成的方法和药剂有着持续的需求。本公开内容的目的正是为了满足这一需求。附图说明图1A为抗血管生成的示意图，显示了该蛋白中反平行β-折叠的两段短链。图1B是抗血管生成的另一示意图，显示了该蛋白中反平行β-折叠的两段短链，其中疏水面朝外。图1C为抗血管生成的另一示意图，显示了该蛋白中反平行β-折叠的两段短链，其中疏水面朝内。图2为折叠（上）及非折叠（下）的抗血管生成的药剂和宿主蛋白的核磁共振（NMR）谱。图3A显示抗血管生成药剂和本领域现有药剂（Anginex）相比对HUVEC细胞的增殖分析。图3B显示抗血管生成药剂和本领域现有药剂（Anginex）相比对M4A4癌症细胞的增殖分析。图4A图示在使用抗血管生成药剂开始治疗后8天的治疗的疗程里，肿瘤体积保持相对不变。图4B图示在使用抗血管生成药剂开始治疗后22天的治疗的疗程里，肿瘤体积保持相对不变。图5图示了首次使用抗血管生成药剂治疗结束时肿瘤重量有着显著的差异。图6以图片方式展示用缓冲液和宿主蛋白治疗的小鼠肿瘤以正常的速率生长，而用抗血管生成药剂治疗的小鼠肿瘤生长速度则显著缓慢。图7显示了用抗血管生成药剂治疗小鼠的血管密度试验结果。图8显示任一治疗组的小鼠体重没有显著变化。图9显示细胞存活力可随剂量而变。图10显示了使用不同剂量的抗血管生成药剂治疗14天或以上的肿瘤生长曲线。图11为和rProAgio-PEG的肿瘤生长曲线。图12图示了14天疗程结束时的肿瘤重量。定义为帮助理解本文所使用的特定术语，本文作如下定义。“血管生成”定义为已有血管床的任何改变或有助于组织灌注的新脉管系统形成。它包括内皮细胞从已存在血管萌牙而成的新脉管或已有脉管改变大小、成熟方向或流动属性从而改善组织血流灌注的重构。术语“氨基酸”指天然存在的氨基酸或非天然氨基酸，也指以与天然氨基酸相似的方式发挥功能的氨基酸类似物及氨基酸模拟物。天然编码的氨基酸为20种常见的氨基酸（丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天门冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸）及吡咯赖氨酸和硒半胱氨酸。氨基酸类似物指基本化学结构与天然存在的氨基酸相同的化合物，例如其α-碳与氢、羧基、氨基和R基结合。此类类似物可具有修饰过的R基团（如正亮氨酸）或是修饰过的肽链骨架，但仍保持其基本化学结构与天然存在的氨基酸相同。非限制性的氨基酸类似物实例包括高丝氨酸、正亮氨酸、蛋氨酸亚砜和甲硫蛋氨酸。术语“保守修饰变体”同时适用于天然和非天然氨基酸、天然和非天然核酸序列，以及它们的组合。对于特定的核酸序列来说，“保守修饰变体”指编码相同或基本相同的天然及非天然氨基酸序列的那些天然和非天然核酸，或不编码基本相同序列的天然和非天然核酸序列的天然和非天然核酸。例如，由于遗传密码的简变性，大量功能相同的核酸可编码任意特定的蛋白质。比如密码子GCA、GCC、GCG和GCU都编码氨基酸丙氨酸。因此，在密码子指定为丙氨酸的每一个位点，密码子可以变成相应密码子的任一简变密码子而不改变所编码的多肽。这样的核酸变异为“沉默变异”，属于保守修饰变异的一种。同样举例来说，本文所述的编码天然或非天然多肽的每一天然或非天然核酸序列也描述了该天然或非天然核酸的每一可能沉默变异。技术人员将认识到可以将天然或非天然核酸的每一密码子（AUG和TGG除外，通常AUG是蛋氨酸的唯一密码子，TGG是色氨酸的唯一密码子）加以修饰得到功能完全相同的分子。因此，编码天然和非天然多肽的天然和非天然核酸其每一沉默变异也隐含于所述各序列中。本文所用的术语“有效量”指所给药的药剂或化合物的量足以使所治疗的不适或疾病的一个或多个症状得到一定程序的缓解。其结果可以是疾病信号、症状或病因的减少及/或缓解，或是生物系统的任何其它期望的改变。举例来说，所给药的药剂或化合物包括但不限于天然氨基酸多肽、非天然氨基酸多肽、修饰过的天然氨基酸多肽或修饰过的非氨基酸多肽。含有这些天然氨基酸多肽、非天然氨基酸多肽、修饰过的天然氨基酸多肽或修饰过的非天然氨基酸多肽的组合物可以给药用于预防、增强及/或治疗性的处理。任一个体病例的适当“有效”量可以用技术，如剂量升级（爬坡）试验加以确定。本文所用术语“核酸序列”指构成核酸的核苷酸顺序和标识。“核酸”指脱氧核糖核苷酸或核糖核苷酸及其单链或双链形态的聚合体。本术语包括含有已知核苷酸类似物或已修饰的骨架残基或连锁的核酸，其可以是合成而得，也可是天然存在或非天然存在，结合特性与参照核酸相似，代谢方式也与参照核酸相似。这样的类似物实例包括但不限于硫代磷酸酯、氨基磷酸酯、甲基磷酸盐、手性甲基磷酸酸盐、2-O-甲基核糖核苷酸和肽核酸（PNAs）。除非另外特指，特定的核酸序列也隐含了其保守修饰变体（如简变密码子置换体）和互补序列，以及明确指明的序列。具体来说，简变密码子置换体可以由一个或多个指定或全部密码子的第三个位点被混合碱基及/或脱氧次黄苷残基取代而来生成序列而得。术语核酸可以与基因、cDNA、mRNA、寡核苷酸和多核苷酸互换使用。特定的核酸序列也隐含了“剪接变体”。类似地，核酸编码的特定的蛋白也隐含了该核酸剪接变体所编码的任意蛋白质。正如其字面所提示的那样，“剪接变体”是基因替代剪接的产物。经过转录后，初始核酸转录本可被剪接成不同（替代）的核酸剪接产物来编码不同的多肽。剪接变体产生的机制各式各样，其中包括了外显子的替代剪接。此定义也包括了连读转录而得的源自同一核酸的替代多肽。此定义也包括剪接反应的任意产物，包括剪接产物的重组型。本文中术语“多肽”、“肽”和“蛋白”可以互换使用，指代氨基酸残基的聚合体。此术语适用于一个或多个氨基酸残基为相应天然存在的氨基酸的人工化学模拟物的氨基酸聚合体，也适用于天然存在的氨基酸聚合体及非天然存在的氨基酸聚合体。本文所用术本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.07.13 US 61/363,9331.修饰的人类或小鼠CD2多肽第一结构域在制备用于减少个体中血管生成的抗血管生成药剂的用途，其中来源于人类或小鼠CD2多肽第一结构域的修饰的人类或小鼠CD2多肽第一结构域包含由两个片段、反向平行折叠、朝内的疏水面和朝外的亲水面所形成的β-折叠；两个片段包含在亲水性和疏水性之间交替的至少五个氨基酸。2.根据权利要求1所述的用途，其中个体中血管生成相关的病症选自：肿瘤生长、动脉粥样硬化、糖尿病性视网膜病、衰老相关的黄斑病以及晶状体后纤维组织形成。3.根据权利要求1所述的用途，其中修饰的人类或小鼠CD2多肽第一结构域选自：序列IdNo.3、序列IdNo.6、序列IdNo.9、序列IdNo.10及序列IdNo.11。4.根据权利要求1所述的用途，其中抗血管生成药剂诱导哺乳动物的细胞凋亡。5.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘志仁，詹妮·J·杨，鲁荫，
申请(专利权)人：乔治亚州立大学研究基金会，
类型：
国别省市：