本发明专利技术属医药领域，具体涉及人sDR5（可溶性死亡受体5，solubleDR5，简称sDR5）蛋白和sDR5-Fc抗体融合蛋白（sDR5-Fc）的药用用途，尤其是人sDR5和sDR5-Fc抗体融合蛋白作为心肌梗死急救和治疗药物的应用。本发明专利技术经实验证实，所述的人sDR5蛋白和sDR5-Fc抗体融合蛋白在大鼠心肌缺血模型和缺血-再灌注模型中可明显减少心肌梗死面积，并显著降低心肌细胞凋亡率。本发明专利技术作为治疗心肌梗死的新型候选药物，极具开发潜力。?
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药领域，具体涉及人sDR5 (soluble death receptor 5, sDR5)蛋白和sDR5-Fc抗体融合蛋白(sDR5-Fc)的药用用途，尤其是人sDR5蛋白和sDR5_Fc抗体融合蛋白作为心肌梗死急救和治疗药物的应用。
技术介绍
急性心肌梗死(acute myocardial infarction, AMI)是指心肌的缺血性坏死,为在冠状动脉病变的基础上，冠状动脉的血流急剧减少或中断，使相应的心肌出现严重而持久的急性缺血，最终导致心肌的缺血性坏死。·急性心肌梗死是严重危害人类健康的心血管急危重症。我国心肌梗死的发病率为50/10万左右，每年死于心肌梗死及其并发症的人数已超过100万，且随着人口老龄化程度的加剧，AMI发病率逐年攀升。另外值得注意的是，AMI发病年龄年轻化趋势也日趋严重。世界卫生组织有报告指出，即使从现在开始就采取有力的预防措施，我国心血管疾病发病率的上升趋势也将持续到2020年左右。临床研究证明心肌缺血及缺血-再灌注过程均会造成严重的损伤，引起心肌细胞死亡。目前，临床对于急性心肌梗死的治疗仅包括1)监护和一般治疗；2)解除疼痛；3)心肌血流再灌注，包括介入(PTA)和溶栓；4)消除心律失常；5)控制休克等在内的对症治疗和血运重建，尚没有直接基于心肌细胞死亡机制的治疗药物，这主要受限于对心肌细胞的死亡机制还不够清楚。所以，对心肌细胞的死亡机制进行深入研究，并在此基础上开发效果好、特异性强、作用快、副作用少的心肌梗死治疗药物迫在眉睫。细胞死亡包括坏死(necrosis)和凋亡(apoptosis),其中坏死曾一度被认为是心肌梗死的主导因素。近年来，凋亡在心肌梗死中的作用日益受到重视。死亡受体5 (Death receptor, DR5)与肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF — relatedapoptosis-inducing ligand, TRAIL)结合所激活的死亡受体通路,可通过招募相关蛋白形成DISC(death-inducing signaling complex),进而级联式活化Caspase_8、3等，引起细胞凋亡。全长的DR5是含有411个氨基酸的I型跨膜糖蛋白。可溶性死亡受体5( solubleDR5，sDR5)因缺乏跨膜区域不能在细胞膜上表达而被分泌至细胞外。sDR5在正常人外周血中表达较低，因其具有与TRAIL配体相结合的胞外段完整结构，可与细胞膜上的死亡受体竞争性结合TRAIL分子，从而阻断TRAIL诱导的细胞凋亡。有研究表明sDR5可通过阻断TRAIL诱导的细胞凋亡来减轻乙型肝炎病毒(HBV)感染引起的肝细胞损伤(参见Yu_Gang Liu , Su-Xia Liu , Xiao-Hong Liang et al.Blockade of TRAIL pathway ameliorates HBV-induced hepatocyte apoptosis in anacute hepatitis model. Biochemical and Biophysical Research Communications352 (2007) 329 - 334)及改善因缺血造成的中枢系统损伤(参见Min Cui，Limei Wang,Xiaohong Liang et al. Blocking TRAIL-DR5 signaling with soluble DR5 reducesdelayed neuronal damage after transient global cerebral ischemia. Neurobiologyof Disease 39 (2010) 138 - 147)。目前，sDR5对于同样因缺血引起的心肌梗死是否存在治疗作用，国内外尚无报 道。急性心肌梗死及血运重建后再灌注损伤的发生与心肌细胞的过度凋亡密切相关，针对凋亡发生的信号转导通路，利用sDR5与膜型DR5竞争结合TRAIL，使TRAIL不能启动凋亡程序的发生，这样可减少心肌梗死范围，延长心肌细胞死亡“窗口期”，改善患者长期预后。
技术实现思路
本专利技术目的在于研究人sDR5和sDR5-Fc抗体融合蛋白通过阻断/封闭TRAIL-死亡受体通路来减少心肌细胞凋亡的作用，并进一步提供人sDR5和sDR5-Fc抗体融合蛋白作为心肌梗死治疗药物的应用。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案 人sDR5蛋白或sDR5-Fc抗体融合蛋白作为心肌梗死治疗药物的应用，尤其是作为急性心肌梗死或心肌梗死-再灌注损伤治疗药物的应用。人SDR5蛋白或SDR5-FC抗体融合蛋白在制备阻断TRAIL诱导的细胞凋亡药物中的应用。所述人SDR5蛋白或SDR5-FC抗体融合蛋白通过阻断TRAIL/DR5通路诱导的细胞凋亡，来减少心肌梗死面积，以达到保护心肌细胞的作用。人sDR5蛋白或sDR5_Fc抗体融合蛋白与其它药物在急性心肌梗死中的协同治疗应用。人sDR5蛋白或sDR5_Fc抗体融合蛋白的蛋白序列、序列修饰及相关生物工程产品在制备治疗心肌梗死药物中的应用。本专利技术利用酵母来源的人sDR5蛋白，在Wistar大鼠心肌梗死模型中测试了人sDR5对心肌梗死的治疗作用，分别获得所述人sDR5能够减少心肌梗死面积、降低心肌细胞凋亡率的结果。实验结果显示通过单次尾静脉注射,在心肌缺血6h模型中，O. 5 - 2mg/只所述的人sDR5与对照组相比均可明显减少心肌梗死面积，最佳剂量为I. 5mg/只，可减少心肌梗死面积50% (见图3)。另外，所述的人sDR5可明显降低缺血模型中心肌细胞凋亡率(见图4)。在心肌缺血72小时模型中，通过多次(Img/次)尾静脉注射(_5、0、24h、48h，结扎冠脉时间计为0)，72h取材，实验结果显示所述的人sDR5与对照组相比可减少心肌梗死面积24% (见图5);同样的给药方式在心肌缺血-再灌注模型中可减少心肌梗死面积32% (见图6)。另外，本专利技术利用中国仓鼠卵巢细胞(CHO)来源的人sDR5_Fc抗体融合蛋白在大鼠心肌缺血6小时模型中通过3mg/只单次尾静脉注射，与对照组相比可减少心肌梗死面积42. 7%，并且能显著降低缺血模型中心肌细胞凋亡率(见图8、9)。本专利技术通过动物实验证实，所述的人sDR5和SDR5-FC抗体融合蛋白能阻断TRAIL/DR5通路诱导的细胞凋亡，减少心肌梗死面积，达到保护心肌细胞的作用，对心肌梗死和心肌梗死-再灌注损伤有治疗作用，作为新型候选药物极具开发潜力和临床应用前景。为了更好地理解本专利技术的实质及本专利技术所述人sDR5和sDR5_Fc抗体融合蛋白的作用效果，以下将通过具体的附图和实施例对本专利技术在制备治疗急性心肌梗死的药物中的应用进行详细地描述。需要特别指出的是，具体实例和附图仅是为了理解和说明，本领域的技术人员或其他人员可以根据本文说明，在本专利技术的范围内对其做出各种各样的修正和改变，这些修正和改变也纳入本专利技术的范围内。附图说明 图I纯化的人SDR5蛋白对TRAIL诱导Jurkat细胞凋亡的阻断效应；A为纯化前后蛋白考马斯亮蓝染色；B. 200ngTRAIL单独或与Img人sDR5蛋白同时加入5 X IO6Jur本文档来自技高网...
【技术保护点】
人sDR5蛋白或sDR5?Fc抗体融合蛋白作为心肌梗死治疗药物的应用。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：马远方，陈有海，王明丽，王耀辉，张军，刘广超，李淑莲，刘峰涛，胡延忠，
申请(专利权)人：河南大学，
类型：发明
国别省市：
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