截短型溶血链球菌溶菌素O及利用其的检测试剂盒制造技术

技术编号:8409144 阅读:270 留言:0更新日期:2013-03-14 00:13
本发明专利技术提供一种截短型溶血链球菌溶菌素O基因与ASO检测试剂盒。本发明专利技术人克隆部分SLO基因片段,将该部分的SLO基因克隆到大肠杆菌等表达载体中,使之产量表达并利于纯化。具体而言,本发明专利技术人提供一种DNA序列,其碱基序列如SEQ?ID?NO:1所示。根据本发明专利技术,截短的SLO序列能使SLO蛋白的产量大大提高,每升细菌培养物能纯化得到150mg以上的SLO蛋白,纯度90%以上,经过免疫学实验证明,这一分段表达的SLO依然保持了特异的免疫原性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种重组蛋白基因以及试剂盒。更具体而言,涉及一种截短型溶血链球菌溶菌素O重组蛋白与ASO检测试剂盒。
技术介绍
溶血链球菌溶血素O (Sti^ptolysin 0,SL0)是多种溶血性链球菌都会表达的一种分泌型蛋白,人在感染溶血性链球菌后会对SLO产生特异抗体。抗链球菌溶血素O (ASO)的检测,是临床诊断溶血性链球菌感染的重要指标之一。提纯的SLO主要来源于溶血链球菌中SLO的提纯,以及在大肠杆菌表达菌株中表达SLO蛋白并纯化。以上两种方法均存在一些局限性,从溶血链球菌中提纯SL0,得率低,难以大规模生产,同时存在生物安全隐 患;利用原核表达系统表达纯化SL0,由于SLO蛋白对细菌细胞具有毒性,一般难以大量表达。在现有技术中已有人报道了,每升细菌培养物(7-8g菌体湿重/升)能纯化出38. Smg左右蛋白,而其中目的蛋白的纯度只有40% (参见非专利文献I :Sandra Camprub' I,Marc Bruguera, Francesca Canalias. International Journal of BiologicalMacromolecules,38本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种溶血链球菌溶血素O,其特征在于,(a)所述溶血链球菌溶血素O的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所示;或者(b)所述溶血链球菌溶血素O的氨基酸序列在(a)限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸,并且所述溶血链球菌溶血素O具有溶血链球菌溶血素O免疫原性。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:不公告发明人
申请(专利权)人:北京利德曼生化股份有限公司研发中心
类型:发明
国别省市:

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