本发明专利技术涉及生物检测领域，特别是涉及一种定量检测类风湿因子、抗链球菌溶血素O的检测试剂盒及其制备方法和用途。本发明专利技术提供一种检测试剂盒，包括互相独立的类风湿因子检测试纸卡和抗链球菌溶血素O检测试纸卡，所述类风湿因子检测试纸卡和抗链球菌溶血素O检测试纸卡均各自包括底板、及位于底板表面的从加样端开始依次排列的样品垫、荧光标记物结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫。本发明专利技术所提供的检测试剂盒首次将风湿三项中的类风湿因子、抗链球菌溶血素O通过荧光微球免疫层析技术同时进行检测，通过一次加样操作就能检测出样本中类风湿因子、抗链球菌溶血素O的含量，简化了操作过程，兼具灵敏性和特异性，快速准确评估类风湿关节炎临床症状。
【技术实现步骤摘要】
-种定量检测类风湿因子、抗链球菌溶血素O的检测试剂 合 Sl
本专利技术涉及生物检测领域，特别是涉及一种定量检测类风湿因子、抗链球菌溶血 素0的检测试剂盒及其制备方法和用途。
技术介绍
类风湿因子（rheumatoid factor, RF)可分为 IgM、IgA、IgG、IgD、IgE 五型（注： 在临床内科学中描述为四型，没有IgD型；但在实验室诊断学中描述为5型），是类风湿关 节炎血清中针对IgG FC片段上抗原表位的一类自身抗体，类风湿因子阳性患者较多伴有关 节外表现，如皮下结节及血管炎等。IgM型RF阳性率为60% -78%。 机体因咽炎、扁桃体炎、猩红热、丹毒、脓皮病、风湿热等感染A组链球菌后，可产 生链球菌溶血素〇抗体，即Anti-Streptolysin O(ASO) 。
技术实现思路
鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种定量检测类风湿因 子、抗链球菌溶血素0的检测试剂盒及其制备方法和用途，用于解决现有技术中的问题。 为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术提供一种定量检测类风湿因子（RF)、抗 链球菌溶血素O(ASO)的检测试剂盒，包括互相独立的类风湿因子检测试纸卡和抗链球菌 溶血素0检测试纸卡，所述类风湿因子检测试纸卡和抗链球菌溶血素0检测试纸卡均各自 包括底板、及位于底板表面的从加样端开始依次排列的样品垫、突光标记物结合垫、硝酸纤 维素膜和吸水垫，所述类风湿因子检测试纸卡的荧光标记物结合垫上包含人变性IgG，所述 抗链球菌溶血素〇检测试纸卡的荧光标记物结合垫上包含链球溶菌素O(SLO)，所述各硝 酸纤维素膜上包被有检测线和质控线，所述荧光标记物结合垫上的链球溶菌素〇和人变性 I gG米用突光微球标记。 优选的，为了使得试剂盒具有更佳的灵敏度和显色效果，本专利技术中所述的荧光标 记物结合垫还经过预处理，预处理中所使用的预处理缓冲液包括下列组分：水苏糖、明矾、 果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠和甘氨酸，且水苏糖、明矾、果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠、甘氨酸 的总浓度为3. 5 - 7. 5g/L，缓冲液的pH值为7. 2 - 7. 6。 优选的，各组分在缓冲液中的浓度为： 水苏糖 0.8-3g/L; 明石凡 O.l-lg/L； 果糖二磷酸钠 0.8-3 g/L; 六偏磷酸钠 0.05-0.5 g/L; 甘氨酸 1.5-2.25g/L; 所述预处理缓冲液的溶剂为水。 所述预处理的具体步骤为：将突光标记物结合垫在预处理液中浸泡I. 5-2. 5h,取 出放于36-38 °C烘干。 所述预处理缓冲液可使用本领域各种常用的pH调节剂进行pH值的调节。 优选的，所述底板为PVC底板。 优选的，所述硝酸纤维素膜上，检测线位于离加样端较近一侧，质控线位于离加样 端较远一侧。 优选的，所述类风湿因子检测试纸卡的检测线上包被有人变性IgG。。 优选的，所述抗链球菌溶血素0检测试纸卡的检测线上包被有链球菌溶血素0。 优选的，质控线上包被羊抗鼠抗体。 优选的，还包括卡壳，所述卡壳包括背卡和上盖，所述背卡设有两个平行的试纸卡 卡槽，所述试纸卡分别嵌于所述试纸卡卡槽内，所述上盖设有两个测试窗和两个加样孔，所 述两个测试窗的位置分别与两个试纸卡的检测线和质控线的位置相配合，所述两个加样孔 的位置与两个试纸卡的样品垫的位置相配合。 更优选的，所述卡壳为塑料卡壳。 更优选的，所述两个加样孔之间还设有连接两个加样孔的横槽。 优选的，所述检测试剂盒用于同时定量检测类风湿因子、抗链球菌溶血素0的含 量。 本专利技术所提供的定量检测类风湿因子、抗链球菌溶血素0的检测试剂盒在检测时 采用双抗原夹心免疫层析法，配套免疫定量分析仪器使用。免疫分析仪器通过采集检测线 (T)和质控线（C)条带荧光信号，计算T/C信号值。使用前先将不同标准品滴加到试纸卡 上，分析处理建立定标曲线（T/C信号值与标准品真实值的关系），再将检测样品时获得的 T/C值与标准曲线比较，即可获得检测样品中的类风湿因子、抗链球菌溶血素0的含量。 本专利技术第二方面提供所述定量检测类风湿因子、抗链球菌溶血素0的检测试剂盒 的制备方法，包括如下步骤： 1)用荧光微球标记的SLO和人变性IgG溶液分别喷涂抗链球菌溶血素0、类风湿 因子荧光标记物结合垫； 2)在抗链球菌溶血素0硝酸纤维素膜的检测线和质控线上分别喷涂SLO及羊抗 鼠抗体，在类风湿因子硝酸纤维素膜的检测线和质控线上分别喷涂人变性IgG及羊抗鼠抗 体； 3)将两套样品垫、步骤1制备的荧光标记物结合垫、步骤2制备的硝酸纤维素膜、 吸水垫依次粘贴在各自的底板上，切裁制得检测试纸卡；最后将检测试纸卡装入卡壳制得 检测试剂盒。 优选的，为了使得试剂盒具有更佳的灵敏度和显色效果，本专利技术中所述的荧光标 记物结合垫还经过预处理，预处理中所使用的预处理缓冲液包括下列组分：水苏糖、明矾、 果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠和甘氨酸，且水苏糖、明矾、果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠、甘氨酸 的总浓度为3. 5 - 7. 5g/L，缓冲液的pH值为7. 2 - 7. 6。 优选的，各组分在缓冲液中的浓度为： 水苏糖 0.8-3g/L; 明矾 0.1-lg/L; 果糖-憐fe納 0.8-3 g/L; 六偏磷酸钠 0.05-0.5 g/L; 甘氨酸 1.5-2.25g/L; 所述预处理缓冲液的溶剂为水。 所述预处理的具体步骤为：将荧光标记物结合垫在预处理液中浸泡2h，取出放于 37°C烘干。 本专利技术第三方面提供所述定量检测类风湿因子、抗链球菌溶血素0的检测试剂盒 在类风湿因子、抗链球菌溶血素〇检测领域的用途。 本专利技术所提供的定量检测类风湿因子、抗链球菌溶血素0的检测试剂盒首次将风 湿三项中的类风湿因子、抗链球菌溶血素〇通过荧光微球免疫层析技术同时进行检测，通 过一次加样操作就能检测出样本中类风湿因子、抗链球菌溶血素〇的含量，简化了操作过 程，兼具灵敏性和特异性，快速准确评估类风湿关节炎临床症状。此外，所述检测试剂盒具 有操作快速简便、结果准确、经济适用等优点，受血清（或血浆）严重血脂、溶血干扰小，当 血清（或血浆）血红蛋白彡600mg/L、甘油三酯彡lOOmg/dL时、胆红素彡20mg/dL，对准确 度的影响变差< 10%。 【具体实施方式】 以下通过特定的具体实例说明本专利技术的实施方式，本领域技术人员可由本说明书 所揭露的内容轻易地了解本专利技术的其他优点与功效。本专利技术还可以通过另外不同的具体实 施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离 本专利技术的精神下进行各种修饰或改变。 在进一步描述本专利技术【具体实施方式】之前，应理解，本专利技术的保护范围不局限于下 述特定的具体实施方案；还应当理解，本专利技术实施例中使用的术语是为了描述特定的具体 实施方案，而不是为了限制本专利技术的保护范围；在本专利技术说明书和权利要求书中，除非文中 另外明确指出，单数形式一个、一和这个包括复数形式。 当实施例给出数值范围时，应理解，除非本专利技术另有说明，每个数值范围的两个端 点以及两个端点之间本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种定量检测类风湿因子、抗链球菌溶血素O的检测试剂盒，包括互相独立的类风湿因子检测试纸卡和抗链球菌溶血素O检测试纸卡，所述类风湿因子检测试纸卡和抗链球菌溶血素O检测试纸卡均各自包括底板、及位于底板表面的从加样端开始依次排列的样品垫、荧光标记物结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述类风湿因子检测试纸卡的荧光标记物结合垫上包含人变性IgG，所述抗链球菌溶血素O检测试纸卡的荧光标记物结合垫上包含链球溶菌素O，所述各硝酸纤维素膜上包被有检测线和质控线，所述荧光标记物结合垫上的链球溶菌素O和人变性IgG采用荧光微球标记。
【技术特征摘要】
1. 一种定量检测类风湿因子、抗链球菌溶血素0的检测试剂盒，包括互相独立的类风 湿因子检测试纸卡和抗链球菌溶血素0检测试纸卡，所述类风湿因子检测试纸卡和抗链球 菌溶血素0检测试纸卡均各自包括底板、及位于底板表面的从加样端开始依次排列的样品 垫、荧光标记物结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述类风湿因子检测试纸卡的荧光标记物 结合垫上包含人变性IgG，所述抗链球菌溶血素0检测试纸卡的荧光标记物结合垫上包含 链球溶菌素〇,所述各硝酸纤维素膜上包被有检测线和质控线，所述荧光标记物结合垫上的 链球溶菌素〇和人变性IgG采用荧光微球标记。2. 如权利要求1所述的定量检测类风湿因子、抗链球菌溶血素0的检测试剂盒，其特征 在于，所述各硝酸纤维素膜上，检测线位于离加样端较近一侧，质控线位于离加样端较远一 侧。3. 如权利要求1所述的定量检测类风湿因子、抗链球菌溶血素0的检测试剂盒，其特征 在于，所述类风湿因子检测试纸卡的检测线上包被有人变性IgG。4. 如权利要求1所述的定量检测类风湿因子、抗链球菌溶血素0的检测试剂盒，其特征 在于，所述抗链球菌溶血素〇检测试纸卡的检测线上包被有链球菌溶血素0。5. 如权利要求1所述的定量检测类风湿因子、抗链球菌溶血素0的检测试剂盒，其特征 在于，所述各质控线上包被羊抗鼠抗体。6. 如权利要求1所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员：段继凤，
申请(专利权)人：重庆乾德生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆;85
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