一种胎儿纤维连接蛋白检测试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及生物检测领域，特别是涉及一种定量检测胎儿纤维连接蛋白fFN的检测试剂盒及其制备方法和用途。本发明专利技术所提供的一种定量检测胎儿纤维连接蛋白fFN的检测试剂盒，包括试纸卡，试纸卡包括底板、及位于底板表面的从加样端开始依次排列的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述金标垫上包含胎儿纤维连接蛋白fFN抗体，所述硝酸纤维素膜上包被有检测线和质控线，所述金标垫上的胎儿纤维连接蛋白fFN抗体采用荧光微球标记。本发明专利技术所提供的定量检测胎儿纤维连接蛋白fFN的检测试剂盒首次将胎儿纤维连接蛋白fFN通过荧光微球免疫层析技术进行检测，兼具灵敏性和特异性，具有操作快速简便、结果准确、经济适用等优点。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及生物检测领域，特别是涉及一种定量检测胎儿纤维连接蛋白fFN的检测试剂盒及其制备方法和用途。本专利技术所提供的一种定量检测胎儿纤维连接蛋白fFN的检测试剂盒，包括试纸卡，试纸卡包括底板、及位于底板表面的从加样端开始依次排列的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述金标垫上包含胎儿纤维连接蛋白fFN抗体，所述硝酸纤维素膜上包被有检测线和质控线，所述金标垫上的胎儿纤维连接蛋白fFN抗体采用荧光微球标记。本专利技术所提供的定量检测胎儿纤维连接蛋白fFN的检测试剂盒首次将胎儿纤维连接蛋白fFN通过荧光微球免疫层析技术进行检测，兼具灵敏性和特异性，具有操作快速简便、结果准确、经济适用等优点。【专利说明】一种胎儿纤维连接蛋白检测试剂盒
本专利技术涉及生物检测领域，特别是涉及一种胎儿纤维连接蛋白检测试剂盒及其制 备方法和用途。
技术介绍
胎儿纤维连接蛋白（fetal Fibroneetin，fFN)是一种糖蛋白，分子量约500KD，有 20种不同的分子形式。胎儿纤维连接蛋白（fFN)为子宫绒毛膜细胞外的基质成分，主要由 滋养层细胞产生，存在于绒毛膜与蜕膜之间，为一种对绒毛膜和蜕膜起连接和黏附作用的 糖蛋白，可于孕产妇的阴道后穹窿部位的分泌物中检出。国内外均对fFN指标的临床应用 及临床意义进行了大量的研究，fFN相关同行评议文章超过300篇。一般认为fFN浓度与 早产及分娩相关性较强，检测时间段为孕22-35周（早产）或孕足月（分娩）。因此，在孕 22-35周之间，宫颈阴道分泌物中fFN的水平与是否发生早产有很好的相关性，fFN检测可 作为预测早产的一个重要客观指标。 胎儿纤维连接蛋白（fFN)检测是美国FDA批准，用于有早产症状的孕妇和有高危 因素孕妇的早产风险性评估，用于22-30孕周无症状孕妇的常规筛查和24-35孕周有早产 症状孕妇检查。fFN检测是美国妇产科医师协会（ACOG)推荐的常规用于早产诊断的项目。 目前已知的胎儿纤维连接蛋白（fFN)检测方法还存在较多缺陷，如操作较为繁 琐，耗时较长，不适宜临床上使用。前我国市场上的胎儿纤维连接蛋白（fFN)检测试剂盒准 确度、灵敏度、重复性仍然较差。
技术实现思路
鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种快速测定胎儿纤维连 接蛋白fFN含量的试剂盒，用于解决现有技术中的问题。 为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术提供一种快速测定胎儿纤维连接蛋白 fFN含量的试剂盒，包括试纸卡，所述试纸卡包括底板、及位于底板表面的从加样端开始依 次排列的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述金标垫上包含胎儿纤维连接蛋白 fFN单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜上包被有检测线和质控线，所述金标垫上的胎儿纤维连 接蛋白fFN单克隆抗体采用荧光微球标记。 优选的，所述金标垫上的胎儿纤维连接蛋白fFN单克隆抗体采用180nm突光微球 标记，EX(nm) = 650/Em(nm) = 670,具有信号受背景干扰小，检测灵敏度高，结果重复性好 的优点。 优选的，所述底板为PVC底板。 优选的，所述硝酸纤维素膜上，检测线位于离加样端较近一侧，质控线位于离加样 端较远一侧。 优选的，所述检测线上包被有胎儿纤维连接蛋白fFN单克隆抗体。所述金标垫上 的胎儿纤维连接蛋白FFN单克隆抗体与检测线上的胎儿纤维连接蛋白fFN单克隆抗体可以 是相同的抗体，也可以是不同的抗体。 优选的，质控线上包被羊抗鼠抗体。 优选的，所述样品垫采用缓冲液处理，所述缓冲液选自PBS缓冲液、TriS-HCl缓冲 液、甘氨酸缓冲液、硼酸盐缓冲液和柠檬酸-磷酸盐缓冲液中的一种或多种的组合，缓冲液 的浓度为20-200mM。 优选的，本专利技术所述的金标垫还经过预处理，预处理时所使用的预处理缓冲液选 自甘氨酸缓冲液、TriS-HCl缓冲液、硼酸盐缓冲液的一种或多种的组合，缓冲液的浓度为 5_50mM〇 优选的，所述缓冲液还包括反应增强剂，所述反应增强剂选自PEG4000、PEG6000、 PEG8000和PEG20000中的任意一种，所述反应增强剂的浓度为10?50g/L。 优选的，所述缓冲溶液还包括表面活性剂，所述表面活性剂选自S-19 TWEEN 20、 S-20 TWEEN 80、S-13 TRITON X-45、S-14 TRITON X-100、S-15 TRITON X305 中的任意一种 或多种的组合，所述表面活性剂的浓度为10?50g/L。 优选的，为了使得试剂盒具有更佳的灵敏度和显色效果，本专利技术所述的金标垫在 预处理时所使用的预处理缓冲液包括下列组分：水苏糖、明矾、果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠 和甘氨酸，且水苏糖、明矾、果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠、甘氨酸的总浓度为3. 5 - 7. 5g/L， 缓冲液的pH值为7. 2 - 7.6。 优选的，各组分在缓冲液中的浓度为： 【权利要求】1. 一种定量检测胎儿纤维连接蛋白fFN的检测试剂盒，包括试纸卡，试纸卡包括底板、 及位于底板表面的从加样端开始依次排列的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述 金标垫上包含胎儿纤维连接蛋白fFN抗体，所述硝酸纤维素膜上包被有检测线和质控线， 所述金标垫上的胎儿纤维连接蛋白fFN抗体采用荧光微球标记。2. 如权利要求1所述的定量检测胎儿纤维连接蛋白fFN的检测试剂盒，其特征在于，所 述硝酸纤维素膜上，检测线位于离加样端较近一侧，质控线位于离加样端较远一侧。3. 如权利要求1所述的定量检测胎儿纤维连接蛋白fFN的检测试剂盒，其特征在于，所 述检测线上包被有胎儿纤维连接蛋白fFN抗体。4. 如权利要求1所述的定量检测胎儿纤维连接蛋白fFN的检测试剂盒，其特征在于，质 控线上包被羊抗鼠抗体。5. 如权利要求1所述的定量检测胎儿纤维连接蛋白fFN的检测试剂盒，其特征在 于，所述样品垫采用缓冲液处理，所述缓冲液选自PBS缓冲液、Tris-HCl缓冲液、甘氨酸 缓冲液、硼酸盐缓冲液和柠檬酸-磷酸盐缓冲液中的一种或多种的组合，缓冲液的浓度为 20-200mM〇6. 如权利要求1所述的定量检测胎儿纤维连接蛋白fFN的检测试剂盒，其特征在于，所 述金标垫采用缓冲液处理，所述缓冲液选自甘氨酸缓冲液、Tris-HCl缓冲液、硼酸盐缓冲液 的一种或多种的组合，缓冲液的浓度为5-50mM。7. 如权利要求6所述的定量检测胎儿纤维连接蛋白fFN的检测试剂盒，其特征在 于，所述缓冲液中还包括反应增强剂，所述反应增强剂选自PEG4000、PEG6000、PEG8000或 PEG20000中的任意一种，所述反应增强剂的浓度为10?50g/L。8. 如权利要求1所述的定量检测胎儿纤维连接蛋白fFN的检测试剂盒，其特征在于，还 包括卡壳，所述卡壳包括背卡和上盖，所述背卡设有试纸卡卡槽，所述试纸卡嵌于所述试纸 卡卡槽内，所述上盖设有测试窗和加样孔，所述测试窗的位置与所述检测线和质控线的位 置相配合，所述加样孔的位置与所述样品垫的位置相配合。9. 如权利要求1所述的定量检测脂胎儿纤维连接蛋白fFN的检测试剂盒，其特征在于， 所述检测试剂盒用于定量检测胎本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种定量检测胎儿纤维连接蛋白fFN的检测试剂盒，包括试纸卡，试纸卡包括底板、及位于底板表面的从加样端开始依次排列的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述金标垫上包含胎儿纤维连接蛋白fFN抗体，所述硝酸纤维素膜上包被有检测线和质控线，所述金标垫上的胎儿纤维连接蛋白fFN抗体采用荧光微球标记。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：吴瑜佳，
申请(专利权)人：重庆乾德生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆;85