本发明专利技术涉及生物检测领域，特别是涉及一种定量检测胰岛素样生长因子结合蛋白-1的检测试剂盒及其制备方法和用途。本发明专利技术所提供的一种定量检测胰岛素样生长因子结合蛋白-1的检测试剂盒，包括试纸卡，试纸卡包括底板、及位于底板表面的从加样端开始依次排列的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述金标垫上包含胰岛素样生长因子结合蛋白-1抗体，所述硝酸纤维素膜上包被有检测线和质控线，所述金标垫上的胰岛素样生长因子结合蛋白-1抗体采用荧光微球标记。本发明专利技术所提供的试剂盒首次将胰岛素样生长因子结合蛋白-1通过荧光微球免疫层析技术进行检测，兼具灵敏性和特异性，具有操作快速简便、结果准确、经济适用等优点。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物检测领域，特别是涉及一种胰岛素样生长因子结合蛋白-1检测试剂盒及其制备方法和用途。
技术介绍
胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1)是用于检测胎膜破裂的最佳方法，也是经美国FDA批准的金标准。世界各国临床上有胎膜早破试纸条、高磷酸化、低磷酸化及非磷酸化等不同称谓，均指胰岛素样生长因子结合蛋白-1检测方法。该法经临床证明优于其他类似检测方法，深蓝胰岛素样生长因子结合蛋白-1检测条准确性高(大于99％)，简单易用。无论在妇产科诊所、医院检查室、门诊或家庭，均可得道同样准确的结果。非磷酸化的IGFBP-1主要存在羊水中由蜕膜细胞合成，临产时蜕膜与绒毛膜分离，蜕膜细胞碎片漏到宫颈黏液中。IGFBP-1在羊水中的体积分数比母亲血液中高100倍～1000倍，其他体液较少，宫颈黏液、精液和尿液对实验均无影响。宫颈阴道分泌物中的IGFBP-1可作为诊断胎膜早破的客观指标。目前已知的IGFBP-1检测方法还存在较多缺陷，如操作较为繁琐，耗时较长，不适宜临床上使用。前我国市场上的IGFBP-1检测试剂盒准确度、灵敏度、重复性仍然较差。
技术实现思路
鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种快速测定胰岛素样生长因子结合蛋白-1含量的试剂盒，用于解决现有技术中的问题。为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术提供一种快速测定胰岛素样生长因子结合蛋白-1含量的试剂盒，包括试纸卡，所述试纸卡包括底板、及位于底板表面的从加样端开始依次排列的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述金标垫上包含胰岛素样生长因子结合蛋白-1单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜上包被有检测线和质控线，所述金标垫上的胰岛素样生长因子结合蛋白-1单克隆抗体采用荧光微球标记。优选的，所述金标垫上的胰岛素样生长因子结合蛋白-1单克隆抗体采用180nm荧光微球标记，EX(nm)＝650/Em(nm)＝670，具有信号受背景干扰小，检测灵敏度高，结果重复性好的优点。优选的，所述底板为PVC底板。优选的，所述硝酸纤维素膜上，检测线位于离加样端较近一侧，质控线位于离加样端较远一侧。优选的，所述检测线上包被有胰岛素样生长因子结合蛋白-1单克隆抗体。所述金标垫上的胰岛素样生长因子结合蛋白-1单克隆抗体与检测线上的胰岛素样生长因子结合蛋白-1单克隆抗体可以是相同的抗体，也可以是不同的抗体。优选的，质控线上包被羊抗鼠抗体。优选的，所述样品垫采用缓冲液处理，所述缓冲液选自PBS缓冲液、Tris-HCl缓冲液、甘氨酸缓冲液、硼酸盐缓冲液和柠檬酸-磷酸盐缓冲液中的一种或多种的组合，缓冲液的浓度为20-200mM。优选的，本专利技术所述的金标垫还经过预处理，预处理时所使用的预处理缓冲液选自甘氨酸缓冲液、Tris-HCl缓冲液、硼酸盐缓冲液的一种或多种的组合，缓冲液的浓度为5-50mM。优选的，所述缓冲液还包括反应增强剂，所述反应增强剂选自PEG4000、PEG6000、PEG8000和PEG20000中的任意一种，所述反应增强剂的浓度为10～50g/L。优选的，所述缓冲溶液还包括表面活性剂，所述表面活性剂选自S-19TWEEN 20、S-20TWEEN 80、S-13TRITON X-45、S-14TRITON X-100、S-15TRITON X305中的任意一种或多种的组合，所述表面活性剂的浓度为10～50g/L。优选的，为了使得试剂盒具有更佳的灵敏度和显色效果，本专利技术所述的金标垫在预处理时所使用的预处理缓冲液包括下列组分：水苏糖、明矾、果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠和甘氨酸，且水苏糖、明矾、果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠、甘氨酸的总浓度为3.5－7.5g/L，缓冲液的pH值为7.2－7.6。优选的，各组分在缓冲液中的浓度为：所述预处理缓冲液的溶剂为水。所述预处理的具体步骤为：将金标垫在预处理液中浸泡1.5～2h，取出放于36～38℃烘干。所述预处理缓冲液可使用本领域各种常用的pH调节剂进行pH值的调节。优选的，所述试剂盒还包括卡壳，所述卡壳包括背卡和上盖，所述背卡设有试纸卡卡槽，所述试纸卡嵌于所述试纸卡卡槽内，所述上盖设有测试窗和加样孔，所述测试窗的位置与所述检测线和质控线的位置相配合，所述加样孔的位置与所述样品垫的位置相配合。更优选的，所述卡壳为塑料卡壳。优选的，所述检测试剂盒用于定量检测胰岛素样生长因子结合蛋白-1的含量。本专利技术所提供的定量检测胰岛素样生长因子结合蛋白-1的检测试剂盒，可配套免疫定量分析仪器使用。免疫分析仪器通过采集检测线(T)和质控线(C)条带荧光信号，计算T/C信号值。使用前先将不同标准品滴加到试纸卡上，分析处理建立定标曲线(T/C信号值与标准品真实值的关系)，再将检测样品时获得的T/C值与标准曲线比较，即可获得检测样品中的胰岛素样生长因子结合蛋白-1含量。本专利技术第二方面提供所述定量检测脂蛋白胰岛素样生长因子结合蛋白-1的检测试剂盒的制备方法，包括如下步骤：1)用荧光微球标记的胰岛素样生长因子结合蛋白-1抗体溶液喷涂金标垫，制得包含胰岛素样生长因子结合蛋白-1抗体的金标垫；2)在硝酸纤维素膜的检测线和质控线上分别喷涂胰岛素样生长因子结合蛋白-1抗体及羊抗鼠抗体，制得包被后的硝酸纤维素膜；3)将样品垫、步骤1)制备的金标垫、步骤2)制备的硝酸纤维素膜、吸水垫依次粘贴在底板上，切裁制得检测试纸卡；最后将检测试纸卡装入卡壳制得检测试剂盒。优选的，本专利技术所述的金标垫还经过预处理，预处理时所使用的预处理缓冲液选自甘氨酸缓冲液、Tris-HCl缓冲液、硼酸盐缓冲液的一种或多种的组合，缓冲液的浓度为5-50mM。优选的，为了使得试剂盒具有更佳的灵敏度和显色效果，本专利技术所述的金标垫在预处理时所使用的预处理缓冲液包括下列组分：水苏糖、明矾、果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠和甘氨酸，且水苏糖、明矾、果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠、甘氨酸的总浓度为3.5－7.5g/L，缓冲液的pH值为7.2－7.6。优选的，各组分在缓冲液中的浓度为：所述预处理缓冲液的溶剂为水。所述预处理的具体步骤为：将金标垫在预处理液中浸泡1.5～2h，取出放于36～38℃烘干。所述预处理缓冲液可使用本领域各种常用的pH调节剂进行pH值的调节。本专利技术第三方面提供了所述定量检测脂蛋白胰岛素样生长因子结合蛋白-1的检测试剂盒在胰岛素样生长因子结合蛋白-1检测领域的用途。本专利技术的有益效果为：本专利技术所提供的定量检测胰岛素样生长因子结合蛋白-1的检本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种定量检测胰岛素样生长因子结合蛋白‑1的检测试剂盒，包括试纸卡，试纸卡包括底板、及位于底板表面的从加样端开始依次排列的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述金标垫上包含胰岛素样生长因子结合蛋白‑1抗体，所述硝酸纤维素膜上包被有检测线和质控线，所述金标垫上的胰岛素样生长因子结合蛋白‑1抗体采用荧光微球标记。
【技术特征摘要】
1.一种定量检测胰岛素样生长因子结合蛋白-1的检测试剂盒，包括试纸卡，试纸卡包括底板、
及位于底板表面的从加样端开始依次排列的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所
述金标垫上包含胰岛素样生长因子结合蛋白-1抗体，所述硝酸纤维素膜上包被有检测线和
质控线，所述金标垫上的胰岛素样生长因子结合蛋白-1抗体采用荧光微球标记。
2.如权利要求1所述的定量检测胰岛素样生长因子结合蛋白-1的检测试剂盒，其特征在于，
所述硝酸纤维素膜上，检测线位于离加样端较近一侧，质控线位于离加样端较远一侧。
3.如权利要求1所述的定量检测胰岛素样生长因子结合蛋白-1的检测试剂盒，其特征在于，
所述检测线上包被有胰岛素样生长因子结合蛋白-1抗体。
4.如权利要求1所述的定量检测胰岛素样生长因子结合蛋白-1的检测试剂盒，其特征在于，
质控线上包被羊抗鼠抗体。
5.如权利要求1所述的定量检测胰岛素样生长因子结合蛋白-1的检测试剂盒，其特征在于，
所述样品垫采用缓冲液处理，所述缓冲液选自PBS缓冲液、Tris-HCl缓冲液、甘氨酸缓冲
液、硼酸盐缓冲液和柠檬酸-磷酸盐缓冲液中的一种或多种的组合，缓冲液的浓度为
20-200mM。
6.如权利要求1所述的定量检测胰岛素样生长因子结合蛋白-1的检测试剂盒，其特征在于，
所述金标垫采用缓冲液处理，所述缓冲液选自甘氨酸缓冲液、Tris-HCl缓冲液、硼酸盐缓
冲液的一种或多种的组合，缓冲液的浓度为5-50mM。
【专利技术属性】
技术研发人员：吉权，
申请(专利权)人：重庆乾德生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆;85
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。