涉及鉴定参与疼痛的化合物的方法和用途以及诊断痛觉的方法技术

本发明专利技术涉及一种鉴定参与疼痛的化合物的方法、Lrrfip1核酸或Lrrfip1蛋白用于鉴定参与疼痛的化合物的用途以及涉及Lrrfip1核酸或Lrrfip1蛋白的诊断痛觉的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术涉及一种鉴定参与疼痛的化合物的方法、Lrrfipl核酸或Lrrfipl蛋白用于鉴定参与疼痛的化合物的用途以及涉及Lrrfipl核酸或Lrrfipl蛋白的诊断痛觉的方法。身体疼痛是一种典型的感觉经历，其可被描述为有害刺激或身体伤害的不愉快的意识。个体通过多种日常伤害和疼痛以及有时通过更严重的损伤或疾病来经历疼痛。为了科学和临床目的，疼痛由国际疼痛研究协会(IASP)定义为“与实际或潜在的组织损伤有关或者就这样的损伤描述的不愉快的感觉和情感经历”。任何类型的疼痛在美国都是医生会诊的最常见原因，每年促使半数美国人寻找医 疗护理。其在许多医学病况中是主要的症状，显著干扰人的生活质量和一般机能。诊断是基于以不同的方式表征疼痛，根据持续时间、强度、类型(钝痛、灼痛、跳痛或刺痛)、来源或身体中的位置。通常不需要处理或者响应于简单措施(例如休息或吃镇痛药)疼痛就停止，因此这称为“急性”疼痛。但其亦可变成难治的并发展为称为慢性疼痛的病况，其中疼痛不再被认为是症状而是疾病本身。近年来，疼痛的研究已吸引了许多不同的领域，例如药理学、神经生物学、护理学、牙科学、物理治疗和心理学。疼痛是身体防御系统的一部分，引起反射反应以从疼痛刺激中收缩，并帮助调节行为以在未来加大避免该特定有害情况。疼痛的医学管理在急性疼痛和慢性疼痛之间已引起区别。急性疼痛是“正常的”疼痛，当弄伤脚趾、骨折、患有牙痛或在大量外科手术后步行时会感受到。慢性疼痛是一种“疼痛病”，日复一日，月复一月，都会感受到，并似乎不可能痊愈。通常，医生更舒适地治疗急性疼痛，除其他原因外，其通常由软组织损伤、感染和/或炎症引起。通常用药物(一般是镇痛药)或用于移除原因和用于控制疼痛感觉的适当技术同时治疗。在一些情况下，急性疼痛治疗失败相当地可引起慢性疼痛。用于治疗疼痛的一系列药物是已知的。然而，副作用和抗性是与已知镇痛药相关的常见问题。因此，美国成人的调查发现疼痛是人们使用辅助和备选药物的最常见原因也就不足为奇了。这证明，仍需要用于疼痛治疗的新方法和靶标。出乎意料地，现已发现Lrrfipl参与疼痛。在用于鉴定参与疼痛的基因的筛查测定中，研究了疼痛敏感性不同的三种不同的近交小鼠品系。多种基因的表达与小鼠品系的疼痛敏感性相关。在这些基因中，在疼痛敏感性和表达之间显示最相关的是Lrrfipl (参见实施例)。因此，Lrrfipl是用于鉴定参与疼痛的化合物和用于诊断痛觉的引人关注的靶标。因此，本专利技术在第一和第二方面提供一种鉴定参与疼痛的化合物的方法，所述方法包括以下步骤a)提供包含Lrrfipl核酸或者Lrrfipl蛋白或其功能活性变体的测试系统， b)将测试系统与测试化合物接触，和c)测定测试化合物对测试系统的作用， 其中，当相对于对照检测到测试化合物对测试系统的显著作用时，所述测试化合物被鉴定为参与疼痛的化合物。本专利技术的第一方面涉及一种包含Lrrfipl核酸的测试系统，第二方面涉及一种包含Lrrfipl蛋白或其功能活性变体的测试系统。可使用本专利技术的测试系统以便阐明参与疼痛的机制。特别地，测试系统可用于开发、鉴定和/或表征参与疼痛的物质，其与Lrrfipl核酸或蛋白相互作用，特别地激活或灭活Lrrfipl核酸或蛋白。鉴定的物质可为引人关注的治疗药物，其可用于治疗疼痛，尤其是神经性疼痛。备选地，Lrrfipl可用于诊断痛觉。多种测试设计是本领域已知的，其可适合于本专利技术的测试系统。关于例示性测试 的进一步详述在本专利技术的方法中提供。可使用测试系统以便测定测试化合物对测试系统的作用。技术人员将能够设计适用于特定目的测试方法的测试系统，例如通过加入与通行方法有关的所需要的另外物质。除了 Lrrfipl核酸或者蛋白或其功能活性变体外，本专利技术的测试系统还可包含一种或多种另外的组分。取决于测试设计和检测方法，测试系统可包含，例如已知的Lrrfipl配体、Lrrfipl信号转导的组分、用于检测的工具等。技术人员将能够使测试系统适应于研究设计，即能够选择合适的缓冲剂、辅因子、底物、一种或多种不同的抗体、标记物、酶或任何其他必需物质。测试系统可呈细胞系统或无细胞系统内，视主要条件而定。在本专利技术方法的第一步中，提供包含Lrrfipl核酸(例如Lrrfipl基因或LrrfiplcDNA或Lrrfipl mRNA或Lrrfipl启动子)或蛋白的测试系统。Lrrfipl基因或同义的GCF2、TRIP或Flap基因编码转录阻遏蛋白Lrrfipl。Lrrfipl也称为富含亮氨酸重复无飞行能力相互作用蛋白1、LRR FLII相互作用蛋白1、TARRNA相互作用蛋白、GC结合因子2、富含GC序列DNA结合因子、FLI-LRR相关蛋白I或短的Flap-1、H186 FLAP、tcf_9、tcf9、转录因子 9 或 NEDD8 缀合酶。Lrrfipl蛋白属于LRRFIP家族。它是所知甚少的蛋白，与公认的转录因子家族几乎没有同源性。先前已将其鉴定为与黑腹果蝇的无飞行能力I的人直向同源物相互作用的蛋白。该蛋白作为转录阻遏蛋白起作用，其优先与富含GC的共有序列5’ -AGCCCCCGGCG-3’(SEQ ID NO: 7)结合。已表明其调节TNF、EGFR和PDGFA的表达。因此，已报道Lrrfipl是TNF-α阻遏蛋白，其占据不产生TNF-α的细胞中ΤΝΤ_α启动子的核苷酸308处的多态启动子位点。TNF-α 308启动子多态性是G —A转换，其与多种自身免疫病症统计上相关。一些研究已发现，其可在一些情况下直接介导TNF-α的转录增加。此外，Lrrfipl蛋白是NF- K B活性的正调节剂。已表明，其在动脉损伤后通过I3DGFA阻遏来控制平滑肌细胞增殖，并与双链RNA结合。它也可与FLII相互作用。在Lrrfipl与乳腺肿瘤和成胶质细胞瘤之间似乎存在关联。Lrrfipl遍在地表达,并位于胞质和细胞核中。人Lrrfipl 由洲8 个氨基酸组成(参见 UniProtKB/Swiss-Prot Q32MZ4 (LRRF1_人;SEQ ID NO: I)。氨基酸485-584构成DNA结合结构域，氨基酸128-250构成卷曲螺旋结构域，而氨基酸567-593代表富含Lys的结构域。权利要求1.一种鉴定参与疼痛的化合物的方法，所述方法包括以下步骤 a)提供包含Lrrfipl核酸的测试系统， b)将测试系统与测试化合物接触，和 c)测定测试化合物对测试系统的作用， 其中，当相对于对照检测到测试化合物对测试系统的显著作用时，所述测试化合物被鉴定为参与疼痛的化合物。2.一种鉴定参与疼痛的化合物的方法，所述方法包括以下步骤 a)提供包含Lrrfipl蛋白或其功能活性变体的测试系统， a)将测试系统与测试化合物接触，和 b)测定测试化合物对测试系统的作用， 其中，当相对于对照检测到测试化合物对测试系统的显著作用时，所述测试化合物被鉴定为参与疼痛的化合物。3.权利要求I或2中任一项的方法，其中参与疼痛的化合物是天然参与Lrrfipl基因和/或Lrrfipl蛋白的信号转导途径的细胞化合物。4.权利要求1-3中任一项的方法，其中参与疼痛的化合物改变Lrrfipl蛋白上游或下游的信号转导。5.权利要求1-4中任一项本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：M格鲍尔，M米夏利斯，D丁格普费宁多夫，AM舒尔特，D齐梅克，C梅茨魏德曼，
申请(专利权)人：赛诺菲，
类型：
国别省市：