一种用于检测鲫鱼肠道消化吸收率的基因分析方法技术

本发明专利技术公开了一种用于检测鲫鱼肠道消化吸收率的基因分析方法，以在鲫鱼肠道细胞中调控营养物质消化吸收的关键转录因子CDX2的表达作为分析鲫鱼消化吸收率的依据，根据其荧光定量PCR结果来进行分子水平的分析，既涵盖传统的消化吸收率评定方法，又提出了更为方便的基因分析来进行评定：选择鲫鱼肠道细胞中CDX2基因的定量表达结果与传统湿式灰化定量法测的鲫鱼表观消化率呈正相关作为评定依据。与传统方法相比，本发明专利技术可以从分子水平准确的对鲫鱼表观消化率和以后的肠道消化吸收潜能进行评定，方法简单、方便，能够为鲫鱼饲料配方优化提供技术支持。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于鲫鱼消化吸收率分析
，涉及ー种用于检测鲫鱼肠道消化吸收率的基因分析方法。
技术介绍
鱼类对饲料中营养物质的充分利用是鱼类快速生长的必要条件，因此其对营养物质的消化吸收直接影响鱼类生产性能的提高。在饲料配方中，把鲫鱼对饲料的消化吸收率进行准确评价以选择优良饲料是确保鲫鱼高效养殖的重要前提。消化吸收率是评价饲料营养价值的重要指标之一。而目前对其研究的方法主要有两种体外消化法和体内消化法。体外消化法虽简便但无法反映体内消化的真实情况，所以缺乏可靠性，已很少采用。体内试验法又分为直接法和间接法两种。直接法由于工作量太·大而没有间接法那样应用广泛。无论是直接法还是间接法，都存在粪便的收集问题，操作繁琐。相关研究发现，⑶X2作为ー种肠道上皮细胞特异性核转录因子，对肠道发育以及营养物质在肠道内消化吸收起着关键性作用。它调控了机体内糖代谢、脂肪代谢、蛋白质代谢和矿物元素代谢等相关功能基因的表达，并对肠道上皮细胞増殖、分化具有重要的调节作用。在实践中发现，CDX2基因的相对表达量随着鲫鱼消化吸收率的升高而升高，降低而降低。于是就产生了用⑶X2基因作为鲫鱼消化吸收率的ー个分子标志，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测鲫鱼肠道消化吸收率的基因分析方法，其特征在于包括以下步骤：（1）取待检测的鲫鱼，解剖并分离出肠道，将肠道投入保存液中，以用于基因表达的分析；（2）提取第（1）步中的肠道总RNA；（3）反转录合成cDNA；（4）以第（3）步中的cDNA为模板，用CDX2引物进行PCR克隆，其中，CDX2引物的上游核苷酸序列如SEQ?ID?No.3所示，下游核苷酸序列如SEQ?ID?No.4所示；（5）实时荧光定量PCR检测，其中，目的基因引物为所述的CDX2引物，荧光定量内参基因引物为管家基因β?Actin引物，该引物的上游核苷酸序列如SEQ?ID?No.1所示，下游核苷酸序列如SEQ?ID?No....

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘臻，鲁双庆，周毅，孙浪，
申请(专利权)人：长沙学院，
类型：发明
国别省市：