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一种鱼类致病菌香鱼假单胞菌的LAMP检测试剂盒及检测方法技术

技术编号:8384240 阅读:731 留言:0更新日期:2013-03-07 01:59
本发明专利技术公开了一种鱼类致病菌香鱼假单胞菌的LAMP检测试剂盒及其检测方法,特点是包括10×ThermoPol反应缓冲液、浓度为100mM的MgSO4溶液、浓度为10mM的dNTP液、浓度为5M的甜菜碱溶液、浓度为8U/μL的BstDNA聚合酶液、FIP/BIP引物溶液、F3/B3引物溶液和双蒸水,FIP引物序列如SEQIDNO.1所示,BIP引物序列如SEQIDNO.2所示,F3引物如SEQIDNO.3所示,B3引物序列如SEQIDNO.4所示,优点是具有高灵敏度、高特异性,适用于海水养殖场中大黄鱼香鱼假单胞菌病的快速检测。?

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及香鱼假单胞菌的检测技术,具体涉及一种鱼类致病菌香鱼假单胞菌的LAMP检测试剂盒及检测方法
技术介绍
香鱼假单胞菌最初由患出血症香鱼内脏分离,近年发现在浙江、福建能引起大黄鱼内脏肉芽肿疾病。该致病菌可引起大黄鱼活动异常、内脏肉芽肿,组织坏死等症状。如2010年3月和11月宁波象山爆发了大规模的大黄鱼香鱼假单胞菌病,疫情涵盖各种规格大黄鱼,同时致病菌可通过亲鱼传递至下一代幼鱼中潜伏,大黄鱼的死亡率达60%以上,给当地养殖业带来巨大经济损失。因此预先分析、检测确定发病菌种就显得尤为重要。目前检测香鱼假单胞菌感染的方法主要包括生理生化检测、组织病理学观察、显微镜检以及PCR等生物技术诊断方法。但是这些传统检测方法不能够区分香鱼假单胞菌与假单胞菌属中的其他细菌,如恶臭假单胞菌等,缺乏灵敏度和特异性。聚合酶链式反应(PCR)具有极高的灵敏度和特异性,已被广泛应用于致病菌的诊断实践,但其需要PCR仪等诸多精密仪器的配套使用,使其无法满足现场和基层检验的需要。为有效控制大黄鱼香鱼假单胞菌病,需建立灵敏、特异、高效和简便的检测技术。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种鱼本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鱼类致病菌香鱼假单胞菌的LAMP检测试剂盒,其特征在于:该试剂盒包括10×ThermoPol?反应缓冲液、浓度为100mM的MgSO4溶液、浓度为10?mM的dNTP液、浓度为5M的甜菜碱溶液、浓度为8?U?/μL?的Bst?DNA?聚合酶液、FIP?/?BIP引物溶液、F3?/?B3引物溶液和双蒸水,所述FIP?/?BIP引物溶液含有FIP引物和BIP引物,所述FIP引物的核苷酸序列为:GCGTTCTTGCTGGCGCAGGTCGATGTACTGGTCGAGCGT,?所述BIP引物的核苷酸序列为:TGCCGCGTGCCGACTTTTGGCCAGGTCACCGG,?所述FIP引物和所述BI...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:王国良张继挺周涛
申请(专利权)人:宁波大学
类型:发明
国别省市:

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