【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物学领域中的标记免疫分析方法,具体涉及一种采用光激发化学发光(Light initiatd Chemiluminescence Assay, LiCA)免疫分析对血清中的祀物质进行定性与定量检测的方法。
技术介绍
均相免疫指全部的反应与结果的观察均在均一的液相界面进行的免疫学检测方法,操作简洁是均相免疫的主要特征。光激发化学发光(LiCA)免疫分析是这类方法的主要代表,亦是目前已经商品化的主要均相免疫技术之一,与酶联免疫分析(ELISA)、电化学发光免疫分析等固相免疫分析相比,LiCA免疫分析涉及时间分辨荧光,纳米微球研究,受体(生物素与亲和素)固定,特殊的能量转递方式及均相免疫反应等多种前沿科学成果,其技·术含量最高,实验操作最简洁,但因Hooks效应的影响妨碍了其市场推广。Hooks效应即钩状效应,其表现为当反应体系中待测物质(包括抗原或抗体)的浓度升高到一定程度后,检测信号反而下降或显著下降,甚至出现假阴性结果,由此造成的后果首先是个别靶物质含量极高的强阳性标本表现出假阴性,其次为阳性标本中大约10 30%左右强阳性标本,被误判为弱阳或低浓 ...
【技术保护点】
一种采用光激发化学发光免疫分析对血清中的待测靶物质进行定性或定量检测的方法,包括如下步骤:向血清中依次加入包被靶物质抗体的发光微球、生物素标记的靶物质抗体、链亲和素包被的感光微球,混匀后温育以发生免疫反应;然后用激发光激发上述免疫反应后的反应体系,并第一次检测反应体系所发出的发射光的光子信号强度,检测出的光子信号强度依据靶物质浓度与发光信号强度的标准曲线关系,第一次确定靶物质含量;其特征在于:在第一次检测反应体系所发出的发射光的光子信号强度后,向免疫反应后的反应体系中加入抗He试剂,混匀后温育发生免疫叠加反应;然后用激发光激发上述免疫叠加反应后的反应体系,并第二次检测反应体 ...
【技术特征摘要】
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