一种检测甲胎蛋白的电化学免疫传感器及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种检测甲胎蛋白的电化学免疫传感器及其制备方法，该电化学免疫传感器包括工作电极、参比电极和对电极，其中所述工作电极为先在基底电极表面修饰纳米金/氮掺杂石墨烯/壳聚糖复合材料，再分别固定甲胎蛋白抗体和牛血清蛋白所得。该电化学免疫传感器的制备方法包括以下步骤：（1）四氯金酸/氮掺杂石墨烯/壳聚糖复合材料的制备；（2）纳米金/氮掺杂石墨烯/壳聚糖复合材料修饰电极的制备；（3）构建电化学免疫传感器。本发明专利技术提供的电化学免疫传感器用于甲胎蛋白的检测具有灵敏度高、选择范围宽、稳定性高等、简单快速等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物免疫技术、电化学免疫传感器
，尤其涉及一种检测甲胎蛋白的电化学免疫传感器的制备方法。
技术介绍
甲胎蛋白（AFP）是一种糖蛋白，主要来自胚胎的肝细胞，在正常人的血清中AFP的含量不到20μg/L，但在肝癌患者中AFP的含量会有明显的增高，因此，AFP的检测对于早期肝癌的诊断具有重要的意义。目前检测AFP的方法很多，包括酶联免疫法（ELISA）、荧光免疫分析法（FIA）、放射免疫测定法（RIA）等，间接血酶法和琼脂双扩散法。这些方法前处理过程耗时、分析时间长、对设备要求极高、并且需要配备专门的技术人员，最关键的是这些传统的电化学分析过程通常是使用酶作为信号探针，但是用酶作标记，制备过程复杂、价格昂贵，并且酶容易失活导致不稳定。因此研究一种无标记的电化学免疫法成为了亟待解决的技术问题，学者们提出了电化学免疫传感器，电化学免疫传感器是将免疫学方法与电化学方法相结合的一种生物传感器，利用抗原与抗体之间的特性相结合，使得它具有高灵敏性、高选择性、高重现性、分析快速、操作简便、耗费低等优点。随着近年来纳米技术的快速发展，各种无机纳米材料如碳纳米管、金属纳米粒子、金属氧化本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测甲胎蛋白的电化学免疫传感器，包括工作电极、参比电极和对电极，其特征在于：所述工作电极为先在基底电极表面修饰纳米金/氮掺杂石墨烯/壳聚糖复合材料，再分别固定甲胎蛋白抗体和牛血清蛋白所得。

【技术特征摘要】
1.一种检测甲胎蛋白的电化学免疫传感器，包括工作电极、参比电极和对电极，其特征在于：所述工作电极为先在基底电极表面修饰纳米金/氮掺杂石墨烯/壳聚糖复合材料，再分别固定甲胎蛋白抗体和牛血清蛋白所得。2.根据权利要求1所述的电化学免疫传感器，其特征在于：所述参比电极为饱和甘汞电极，所述对电极为铂片电极，所述基底电极为玻碳电极。3.根据权利要求1所述的电化学免疫传感器，其特征在于：所述的纳米金/氮掺杂石墨烯/壳聚糖复合材料，由壳聚糖、氮掺杂石墨烯和四氯金酸三者的混合溶液经电化学还原方法制备得到。4.一种检测甲胎蛋白的电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）四氯金酸/氮掺杂石墨烯/壳聚糖复合材料的制备：a、先将壳聚糖溶解在醋酸溶液中，加入碱溶液调节pH值至4.5～5.0，进行磁力搅拌制备得到壳聚糖溶液；b、再将氮掺杂石墨烯溶解到所述壳聚糖溶液中，采用超声方法制备得到氮掺杂石墨烯/壳聚糖溶液；c、最后将四氯金酸加入到所述的氮掺杂石墨烯/壳聚糖溶液中，进行磁力搅拌制备得到四氯金酸/氮掺杂石墨烯/壳聚糖复合材料混悬液；（2）纳米金/氮掺杂石墨烯/壳聚糖复合材料修饰电极的制备：将玻碳电极浸入到步骤（1）制备得到的四氯金酸/氮掺杂石墨烯/壳聚糖复合材料混悬液中，采用铂片电极作为对电极，饱和甘汞电极作为参比电极，进行沉积，最后用去离子水冲洗，晾干，得到纳米金/氮掺杂石墨烯/壳聚糖复合材料修饰电极；（3）构建电化学免疫传感器：a、先将甲胎蛋白抗体滴加到步骤（2）制备得到的所述工作电极上孵育，再用pH7.0的磷酸缓冲溶液洗掉与修饰电极结合不够稳定的甲胎蛋白抗体，制备得到有抗体的纳米金/氮掺杂石墨烯...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢丽敏，徐景坤，贾海燕，邱新兰，
申请(专利权)人：江西农业大学，
类型：发明
国别省市：江西;36