甘蔗黑穗病病原菌多克隆抗体的制备制造技术

本发明专利技术公开了甘蔗黑穗病病原菌多克隆抗体的制备，本发明专利技术采用的抗原为从甘蔗大田采集的成熟黑穗病病原菌孢子，经处理后在PDA培养基上培养获得，其步骤包括：（1）黑穗病病原菌孢子的采集处理，制备抗原；（2）取等量抗原（真菌孢子、菌丝体胞外多糖或上清液）分别与福氏完全佐剂和福氏不完全佐剂混合，乳化，颈背部皮下多点注射免疫新西兰白兔；（3）每两个星期免疫一次，共免疫四次，第八个星期后，颈动脉采血；（4）分离抗血清并纯化，获得目标多克隆抗体。本发明专利技术制备的多克隆抗体具有纯度高，特异性好，效价高，保存长久等优点，对甘蔗科研中通过免疫学方法检测甘蔗黑穗病具有重要意义，结合人工接种技术能提高甘蔗抗黑穗病育种效率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及植物抗病性鉴定领域，具体是一种甘蔗黑穗病病原菌多克隆抗体的制备。
技术介绍
甘鹿黑穗病是由黑粉菌(Ustilago scitaminea syd)引起的一种真菌性病害，自1877年在南非的纳塔尔地区首次被发现至今在全国的各个植蔗区均有此病发生的报道。此病是一种气传性病害，能够导致蔗茎产量和蔗糖分的严重损失，随着宿根年限的增加发病越来越严重，发病严重的品种和地块发病率达到60%，因此病而淘汰了一批丰产高糖的甘蔗优良品种。防治此病最有效最经济的方法是培育优良的甘蔗新品种，而抗病性的鉴定是抗病育种的基础和关键，鉴定的准确性和效率直接影响到抗病育种的进程和效果。 目前，国内外还主要是通过鉴别寄主法对甘蔗进行抗黑穗病性鉴定，此法周期长，工作量大，耗资高，通常由实生苗育成新甘蔗品种的概率为1/100000，因此此法与甘蔗育种的大群体要求不相适用。随着免疫学技术的发展成熟及其在动植物病原菌检测上的成功应用，使得应用此方法检测甘蔗黑穗病成为可能。该方法具有操作简单，可同时检测多个样品等优点，符合甘蔗育种过程中大群体筛选的需求。但是，目前还未见有甘蔗黑穗病抗体制备的报道。因此，制备甘蔗本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种甘蔗黑穗病病原菌多克隆抗体的制备，其特征在于：采集甘蔗大田的甘蔗黑穗病病原菌，制备抗原，将抗原在PDA培养基上培养获得到多克隆抗体，主要包括以下步骤：（1）抗原采集和制备：在甘蔗大田采集黑穗病病原菌，制备抗原（真菌孢子，菌丝体胞外多糖或上清液）备用；（2）抗原免疫培养：将获得的抗原与等量的福氏完全佐剂混合，乳化，在颈背部皮下多点注射，免疫新西兰白兔；第15天，取1？ml抗原加入等量福氏不完全佐剂，乳化，在颈背部皮下多点（8？10点）注射，免疫新西兰白兔；每隔2周，按照所述的剂量和方法多次免疫白兔，在第八周测定效价达到要求后，颈动脉取血备用；（2）分离纯化：将步骤（2）获得的抗血清进行分离纯...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨丽涛，宋修鹏，李杨瑞，
申请(专利权)人：广西大学，
类型：发明
国别省市：