抗牛乳房炎致病微生物特异性IgY的制备方法技术

技术编号:8267243 阅读:217 留言:0更新日期:2013-01-30 22:41
本发明专利技术涉及治疗牛乳房炎的产品,公开了一种抗牛乳房炎致病微生物特异性IgY的制备方法,包括以下步骤:(S1)、制取不同类的牛乳房炎致病微生物抗原;(S2)、制取免疫蛋;(S3)、制取抗牛乳房炎致病微生物特异性IgY粗提物干粉;(S4)、制取抗牛乳房炎致病微生物特异性IgY纯品;(S5)、制取抗牛乳房炎致病微生物特异性IgY。按本发明专利技术生产的产品具有对采用常规药物治疗无效的顽固性牛乳房炎的疗效特别明显;同时,还会明显增强奶牛体内白细胞的吞噬功能,提升其抗病原体感染的能力;可直接给奶牛补充抗体,抑灭奶牛体内的病原体,消除感染,迅速降低鲜奶体细胞数。

【技术实现步骤摘要】
抗牛乳房炎致病微生物特异性IgY的制备方法
本专利技术涉及治疗牛乳房炎的产品,尤其是涉及一种不产生耐药性的可有效预防和治疗各种细菌、真菌和霉形体以及病毒引发的牛乳房炎的抗牛乳房炎致病微生物特异性IgY。
技术介绍
奶牛乳房炎是世界范围内最常见而又最难防治的奶牛疾病之一。目前全世界约有2.2亿头奶牛,其中1/3患有各种类型的乳房炎。据统计,临床型乳房炎占奶牛总发病的2成多,一般造成产奶量下降,乳液废弃,严重时,患牛乳区肿胀硬化、化脓、坏疽甚至萎缩,失去泌乳能力,被迫淘汰,每年因乳房炎而最终淘汰的病牛约占总淘汰率的10%。在所有的牛乳房炎中,隐性乳房炎在奶牛群中最普遍,在一个牛群中,大多数乳房炎(大约90%)是隐性型。因此,造成经济损失的主要是隐性乳房炎,其损失占每头泌乳母牛每年总生产能力的10%~11%[。即使在饲养水平较高的发达国家,隐性乳房炎的发病率也在50%以上。因此,给世界各国以及我国的乳牛业造成相当大的经济损失。目前,全球对奶牛乳房炎普遍采用抗生素进行治疗。但是,使用抗生素治疗一方面会造成牛乳中抗生素残留,另一方面会诱发细菌产生耐药性,使抗生素失效,造成慢性乳房炎特别是隐性乳本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗牛乳房炎致病微生物特异性IgY的制备方法,其特征在于包括以下步骤:(S1)、制取不同类的牛乳房炎致病微生物抗原:分别按致病微生物的分类培养并纯化任意一种或任意几种同类不同种的致病微生物,按任意比例混合均匀,然后加以超声粉碎;最后按重量1?10∶10?1的重量比例加入福氏佐剂,置入高速匀浆机中,以8,000?30,000rpm高速粉碎匀化,形成油包水溶液,重复上述方法分别制得各类不同类的致病微生物抗原;(S2)、制取免疫蛋:采用淘汰法筛选具有高免疫应答能力的选择产蛋禽类,再分别采用上一步骤制备不同类的致病微生物抗原对高免疫应答能力的选择产蛋禽类进行免疫;每隔二周再强化注射一次,计免疫三次;...

【技术特征摘要】
1.一种抗牛乳房炎致病微生物特异性IgY的制备方法,其特征在于包括以下步(S1)、制取不同类的牛乳房炎致病微生物抗原:分别按致病微生物的分类培养并纯化任意一种或任意几种同类不同种的致病微生物,按任意比例混合均匀,然后加以超声粉碎;最后按重量1-10:10-1的重量比例加入福氏佐剂,置入高速匀浆机中,以8,000-30,000rpm高速粉碎匀化,形成油包水溶液,重复上述方法分别制得各类不同类的致病微生物抗原;(S2)、制取免疫蛋:采用淘汰法筛选具有高免疫应答能力的选择产蛋禽类,再分别采用上一步骤制备不同类的致病微生物抗原对高免疫应答能力的选择产蛋禽类进行免疫;每隔二周再强化注射一次,计免疫三次;第一次免疫20天后,检取免疫的母鸡所产免疫蛋,并进行编码标记;(S3)、制取抗牛乳房炎致病微生物特异性IgY粗提物干粉:根据免疫所用不同类的致病微生物抗原,将免疫蛋分类并标记编码,用流动水洗净免疫蛋,再用苏打水消毒,打蛋机打碎免疫蛋,筛滤去蛋清,留下蛋黄,搅拌均匀;按蛋黄液体积的4-6倍加入蒸馏水稀释并混合均匀,用1.0NHCI溶液调pH至5.5-6.0,将调整好pH值的稀释液进一步充分搅拌均匀,然后将其冷却至2-60℃,静置12小时—24小时;将稀释液于10,000rpm离心20分钟;取分离所得的上清液置超滤器中进行超滤浓缩10-20倍;继而加入2.0%海藻酸钠水溶液,稀释至0.1%的浓度,搅拌至出现浑浊;再加入2.0%CaCl2液,稀释至0.1%的浓度,搅拌均匀,40℃静置8-12小时;8,000rpm离心20分钟,取上清液;0.45μm膜串连0.22μm膜过滤除菌;使用除病毒过滤器除去病毒;冷冻干燥,即分别制得不同类的抗牛乳房炎致病微生物特异性IgY粗提物干粉;最后,将所制备的对应不同致病微生物抗原的特异性IgY粗提物进行编码标记;(S4)、制取抗牛乳房炎致病微生物特异性IgY纯品:将同类的抗牛乳房炎致病微生物特异性IgY粗提物干粉分别经过蛋白层析装置进行纯化处理,制得不同类的抗牛乳房炎致病微生物特异性IgY纯品;(S5)、制取抗牛乳房炎致病微生物特异性复合IgY:将所制备的不同类的抗牛乳房炎致病微生物特异性IgY纯品混合,充分搅拌均匀,即制得抗牛乳房炎致病微生物特异性复合IgY。2.根据权利要求1所述的抗牛乳房炎致病微生物特异性IgY的制备方法,其特征在于:所述步骤(S4)后为:步骤(S41)、制取纳米化抗牛乳房炎致病微生物特异性IgY纯品:对各类所述抗牛乳房炎致病微生物特异性IgY纯品进行纳米化处理,制得不同类的纳米化抗牛乳房炎致病微生物特异性...

【专利技术属性】
技术研发人员:包晟杨荣鉴包海威张善钧汪玲
申请(专利权)人:深圳雅臣生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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