抗FGFR2抗体制造技术

披露了结合并且抑制人类FGFR2的生物活性的单克隆抗体。这些抗体可以用以治疗细胞增殖性疾病和紊乱，包括某些形式的与FGFR2的激活或者过表达相关的癌症。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术的领域涉及分子生物学、免疫学以及肿瘤学。更具体地，该领域是结合人类FGFR2的抗体。背景成纤维细胞生长因子受体2 (FGFR2),也称为 BEK、BFR_1、CD332、CEK3、CFD1、ECT1、FLJ98662、JWS、KGFR (还称为 FGFR2 (IIIb) )、K-SAM、TK14、以及 TK25，是四种高度保守的受 体酪氨酸激酶(FGFRl、FGFR2、FGFR3以及FGFR4)之一，通过结合FGF介导成纤维细胞生长因子(FGF)信号。该FGF受体的特征是具有两个或者三个胞外免疫球蛋白样结构域(IgDl、IgD2以及IgD3)、一个单跨膜结构域以及一个胞质酪氨酸激酶结构域。FGF配体结合诱导FGF受体二聚作用和酪氨酸自磷酸化作用，导致细胞增殖、分化并迁移(Turner (特纳)等人，(2010), Natuee Reviews Cancee (癌症自然评论)，10:116-129 ；Beenken (宾肯)等人，(2009)，Natuee Reviews Deug Discweky (自然评论药物发现)，8:235-254 ;Gomez (戈麦斯)-Roman (罗曼)等人，(2005), Clin. Cancee Res.(临床癌症研究)，11:459-65 ;Chang (常)等人，(2005)，Blood(血液)，106:353-6 ;Eswarakumar (埃斯瓦拉库马)等人，(2005), Cytokine GeowthFactoe Rev.(细胞因子和生长因子评论)，16:139-49 )。在IgD3结构域中的可变剪接产生FGFRl、FGFR2以及FGFR3的IIIb亦或IIIc同型物。该FGFR4基因仅表达为IIIc同型物。FGF受体的不同的同型物显示出组织特异性表达，并且它们响应于18哺乳动物FGF的不同的谱(Beenken (宾肯)等人，如以上)。在硫酸乙酰肝素肝素蛋白聚糖的存在下，结合FGF到FGFR上诱导在特异性的胞内酪氨酸残基上的FGFR的自磷酸化作用。这致使适配子分子，例如FGFR底物2 a (FRS2 α )的磷酸化作用，该磷酸化作用募集其他的蛋白，从而激活不同的信号级联放大，包括该丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路以及该磷酸肌醇-3-激酶(PI3K) /Akt通路(Beenken (宾肯)等人，如以上；Eswarakumar (埃斯瓦拉库马)等人,如以上；Turner (特纳)等人,如以上)。已经提出，失调的信号可以直接驱动癌症细胞的增殖，促进癌症干细胞的生存，并支持肿瘤血管生成(Turner (特纳)等人，如以上)。FGFR2信号在癌症中似乎发挥着作用。在FGFR2基因上的错义突变发生在不同的癌症中，包括子宫内膜癌(Pollock(波洛克)等人，2007, Oncogene (癌基因)，26:7158-7162 ；Dutt (杜特)等人，2008，Pkqc. Natl. Acad. Sci. USA (美国科学院院刊)，105:8713-8717)；、卵巢癌、乳癌、肺癌(Greenman (格林曼)等人，2007，Nature(自然)，446:153-158 ；Ding (丁)等人，2008，Natuke (自然)，455:1069-1075 ；Davies (戴维斯)等人，2005，Cancee Res.(癌症研究)，65:7591-7595)以及胃癌(Jang (蒋)等人，2001，CanceeRes.(癌症研究)，61:3541-3543)。这些激活突变中的一些在骨骼机能紊乱的患者中也有报道(Dutt (杜特)等人，如以上)。两项独立的全基因组关联研究已经将在该FGFR2基因中的特异性单核苷酸多态性(SNPs)与乳癌的易感性的增加结合起来(Easton(伊斯顿)等人，2007，Natuee(自然)，447:1087-1093 ;Hunter (亨特)等人，2007，Nat. Genet.(自然遗传学)，39:870-874)。这些癌症相关的SNPs显示出了提升的FGFR2基因表达(Meyer (迈耶)等人，2008，Plos Biol.(科学公共图书馆-生物)，6乂108)。位于人类染色体10q26上的FGFR2基因，在乳癌的一个亚群中被扩增(Adnane (阿达尼)等人，1991，Onkkene (癌基因)，6:659-663 ；Turner (特纳)等人，2010，Oncogene (癌基因)，29:2013-2023)以及胃癌(Hara (哈拉)等人，1998，Lab. Invest.(实验室研究)，78:1143-1153 ;Mor (摩尔)等人，1993，Cancee Genet. Cytogenet.(癌症遗传学和细胞遗传学)，65:111-114)。天然发生的抗体是包含四个多肽链的多亚基蛋白(图I)。多肽链的其中两条称作免疫球蛋白重链(H链)，并且多肽链的其中两条称作免疫球蛋白轻链(L链)。这些免疫球蛋白重和轻链是通过一个链间二硫键而被连接的。这些免疫球蛋白重链是通过链间二硫键而被连接的。轻链由一个可变区(图I中的')以及一个恒定区(图I中的CJ构成。重链由一个可变区(图I中的Vh)以及至少三个恒定区(图I中的CHp CH2以及CH3)构成。这些可变区决定该抗体的特异性。天然发生的抗体已经被用作用于工程抗体的起始材料，例如嵌合抗体与人源化抗体。··每一可变区包含三个高可变区，这些高可变区已知为互补决定区(⑶R)，两侧有四个已知为骨架区(FR)的相对保守区域。这三个⑶R (称作⑶凡、OTR2以及OTR3)构成抗体结合特异性。鼠因为小鼠与人类FGFR2之间的高度同源性，所以已经难于产生特异性针对人类FGFR2的抑制性抗体。具体地，鼠小鼠与人类FGFR2的配体结合结构域共享约98%的序列一致性(Wei (魏)等人，2006，HYBKIDQMA(杂交瘤)，25:115-124)。因此，对于可以用作治疗剂的改进de FGFR2抗体存在需要。专利技术概述本专利技术基于一个特异性结合人类FGFR2的抗体家族的发现。这些抗体包含基于特异性结合FGFR2的抗体的多个⑶R的FGFR2结合位点。当用作治疗剂时，这些抗体是经工程化的(例如，人源化的)以降低或消除给药于人类患者时的免疫反应。本专利技术的这些抗体阻止或抑制人类FGFR2的激活(S卩，中和)。本专利技术的这些抗体可以用以体外地或体内地抑制肿瘤细胞的增殖。当给药于人类癌症患者(或动物模型)时，这些抗体抑制或降低人类患者(或动物模型)中的肿瘤生长。本专利技术的这些和其他方面以及优势通过以下的图、详细描述以及权利要求来进行说明。如在此使用的，“包括”是指没有限制，并且引用的实例是非限制性的。附图说明参考以下附图可以更完全地理解本专利技术。图I (现有技术)是一个典型抗体的示意性图示。图2 是一个图表，总结了通过 FGF2( · )、FGF7(7)、FGF9( □)以及 FGFlO (x)，来自用来测量表达FGFR2-IIIb的FDCP-I细胞的增殖刺激的实验的结果。图3 是一个图表，总结了通过 FGF2( · )、FGF7(7)、FGF9( □)以及 FGF10(x)，来自用来测量表达FGFR2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：翁志刚，W·M·小威斯顿，A·拜，K·米特泽，S·威勒，陈挺，J·约里斯，
申请(专利权)人：AVEO制药公司，
类型：
国别省市：