本发明专利技术涉及一种培养基的灭菌系统，利用该灭菌系统对培养基进行灭菌的方法，以及蛹虫草的培养方法。所述培养基的灭菌系统，包括：用排气管道连接的蒸汽发生器和灭菌柜，所述灭菌柜末端连接的排气管道分为两条支路，一条直排，另一条安装依次连接的真空罐和水循环式真空泵。本发明专利技术的技术增加了培养基空隙度，扩大菌丝生长空间，培养基冷却速度快、干燥程度高，最终达到提高生物转化率的目的；并且降低了生产成本，有利于相应技术的推广和应用，具有很高的实用价值和应用价值。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及蛹虫草的栽培
，具体地，涉及一种培养基的灭菌系统，利用该灭菌系统对培养基进行灭菌的方法，以及蛹虫草的培养方法。
技术介绍
蛹虫草(Cordycepsmilitaris(L. Fr)Link),属子囊菌门(Ascomycota)、核菌纲(Pyrenomycetes)、球壳目(Sphaeriales)、麦角菌科(Clavicipitaceae)、虫草属(Cordyceps (Fr. ) Link)真菌。蛹虫草是虫草属真菌的模式种,在自然界多寄生在多种鳞翅日昆虫的幼虫和蛹上。近年来，研究表明，人工栽培的蛹虫草化学成分及药理作用与冬虫夏草相似。因 此，蛹虫草的开发应用具有极大的潜在市场，人工培养蛹虫草是解决野生虫草来源不足的良好途径。目前的规模化蛹虫草生产中均采用半人工合成培养基进行规模化栽培，主要的原因是原料(大米、小米、高粱、玉米、奶粉、黄豆等)的来源广泛且容易保存不受季节的限制。无论大米、小米、小麦、高粱等培养基原料在高温高压灭菌过程中都会发生淀粉糊化的现象，培养基中的原料相互粘连，最终导致培养基原料中菌丝生长空间小或者菌丝无法生长的现象发生，最终导致培养基原料生物转化率很低。通过降低水分的办法虽然能在一定程度上增加培养基中的孔隙度，但由于培养基含水量低，会导致子实体提早停止发育，最终还是无法提高培养基的生物转化率。
技术实现思路
为了解决现有技术中存在的问题，本专利技术的目的之一在于，提供一种培养基的灭囷系统。本专利技术的另一目的在于，提供一种利用所述灭菌系统对培养基进行灭菌的方法。本专利技术的又一目的在于，提供一种利用所述灭菌系统对蛹虫草进行培养的方法。本专利技术提供的培养基的灭菌系统，包括用排气管道连接的蒸汽发生器和灭菌柜，所述灭菌柜末端连接的排气管道分为两条支路，一条直排，另一条安装依次连接的真空罐和水循环式真空泵。其中，所述水循环式真空泵还配有真空度表。本专利技术在另一条排气管道上加装水循环式真空泵，并配有真空度表，目的是 第一，负压使培养基颗粒物之间间隙度加大；第二，负压使培养基颗粒物之间的游离水分抽出，从而在接种阶段液体菌种能均匀进入培养基的底部。其中，所述灭菌柜具有内胆和外胆的结构，内胆和外胆之间用排气管道相连通。其中，所述真空罐的体积为灭菌柜内胆体积的f 10倍，优选5倍。进一步地，将真空罐浸泡在冷却循环水槽内。目的是急速的降温使蒸汽冷凝，同时也加速了灭菌柜的排空。进一步地，连通所述灭菌柜内胆和外胆的排气管道上又引出一条排气管道，安装有空气过滤器。更进一步地,空气过滤器的粒径为O. 2 μ m。其中，两条支路，即直排管道和安装有水循环式真空泵的管道上都装有排气开关。其中，所述空气过滤器与灭菌柜连接的前端安装有开关。加装的空气过滤器的作用是当保持一定的真空度强制排蒸汽结束后，打开空气过滤器前的开关，从空气过滤器中导入无菌空气进入灭菌柜，平衡灭菌柜内外压力，使灭菌柜可以打开，培养基出柜；当然也·可采用打开蒸汽直排管道开关的方式，导入外界空气，使灭菌柜内外压力平衡，但这种处理方式可能会向灭菌柜内弓I入外界污染。在培养基灭菌系统的改造中，在真空泵的前方添加了一个真空罐，其目的就是为了加强培养基的干燥程度加了真空罐后，在抽真空的过程中，灭菌柜内胆的蒸汽就能更好的扩散在真空罐中，而不加真空罐的方法，蒸汽没有扩散的空间，因此干燥程度差，而加了真空罐的干燥程度好；进一步地，加了真空罐后，当抽真空过程结束后，若打开空气过滤器向灭菌柜内胆进入无菌空气时，由于真空罐的存在，能够将灭菌柜内胆的蒸汽吸入真空罐中，也加强了培养基的干燥程度。本专利技术提供的利用所述灭菌系统对培养基进行灭菌的方法，包括以下步骤(I)将培养基放入灭菌柜，并由蒸汽发生器向灭菌柜供入蒸汽进行灭菌；(2)打开两条支路的排气管道排蒸汽，当蒸汽压力下降到一半时，关闭直排管道，开启水循环式真空泵强制排蒸汽；(3)当水循环式真空泵的压力指示为-O. 05至-O. IMPa时，同时关闭装有水循环式真空泵支路的排气管道和水循环式真空泵，让灭菌柜保持当前的压力(-0. 05至-O. IMPa)5 IOmin ；(4)当灭菌柜内外压力平衡后，灭菌过程结束。其中，可以打开所述空气过滤器，向灭菌柜导入无菌空气。这样可以平衡灭菌柜内外的压力，使灭菌柜可以打开，培养基出柜；这样也可以使灭菌柜里导入的是经过过滤的无菌空气，保证灭菌柜不被污染。当然也可采用打开蒸汽直排管道开关的方式，导入外界空气，使灭菌柜内外压力平衡，但这种处理方式可能会向灭菌柜内引入外界污染。其中，步骤(I)中，在温度121 °C下进行灭菌，保持20分钟。其中，步骤(I)中，蒸汽压力为O. llMPa。进一步地，步骤(3)中，水循环式真空泵的压力指示优选为-O. 05MPa。进一步地,步骤(3)中,保持灭菌柜的压力优选8min。本专利技术提供的一种蛹虫草的培养方法，包括以下步骤I)培养基制备将谷物原料用食用油浸润后，与营养液进行复配，得到蛹虫草子实体生长用的培养基；2)灭菌按上述利用所述灭菌系统对培养基进行灭菌的方法对步骤I)得到的培养基进行灭菌处理；3)接种将蛹虫草菌种接种至步骤2)灭菌后的培养基上；4)对接种好的蛹虫草菌种进行暗培养和光照培养；5)采收蛹虫草子实体。对蛹虫草子实体生长用的培养基灭菌不但加速了培养基的冷却(抽蒸汽和水，尤其是游离水，并带出热量)，更重要的是可以提高培养基上菌种的生物转化率。并且，在灭菌系统的改造中，在真空泵的前方添加了一个真空罐，加强了培养基的干燥程度。其中，步骤I)中，所述谷物原料选自大米、小米、小麦和高粱等主要谷物原料中的一种或几种，包含但不限于这几种谷物原料。 其中，步骤I)中，将谷物原料用其重量O. f 5.0%的食用油进行浸润，食用油优选谷物原料重量的2. 0%。其中，步骤I)中，所述食用油选自豆油、花生油和菜籽油等中的一种或几种，包含但不限于这几种食用油。浸润之后，立即使用，不要长时间放置。其中，步骤I)中，谷物原料与营养液进行复配，两者的质量体积比为1:1. 2^1. 8，优选1:1. 5。这里的质量体积比指的是g:mL (谷物原料营养液)。其中，步骤I)中，所述营养液的配方为黄豆2. 2%、葡萄糖I. 5%、奶粉4. 5%、磷酸二氢钾O. 8%、硫酸镁O. 06%和维生素B 115mg / IOOOmL,加水定容至IOOOmL ;调整pH为5. 6 7. 2。这里的百分号“％”指的是质量百分含量。本专利技术所述蛹虫草的培养方法，在步骤3)将蛹虫草液体菌种接种至步骤2)经过灭菌处理的培养基前，先将蛹虫草菌株保存在固体PDA培养基斜面上；然后在液体种子培养基上接入保存在PDA培养基斜面上的蛹虫草菌株，成为蛹虫草液体菌种；之后再将所述蛹虫草液体菌种接入步骤2)经过灭菌处理的培养基上进行后续的培养。其中，所述蛹虫草菌株为编号为HX-64的蛹虫草菌株。其中，所述液体种子培养基的配方为土豆250克、葡萄糖8克、蛋白胨2. 5克、磷酸二氢钾O. 6克、硫酸镁I. 2克，加水1000毫升。进一步地，所述固体PDA培养基和液体种子培养基可以采用本领域的常规方式进行灭菌，也可以采用本专利技术所述的灭菌方法进行灭菌；利用本专利技术的灭菌方法，可以加速培养基的冷却。其中，步骤4)中，本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种培养基的灭菌系统，包括：用排气管道连接的蒸汽发生器和灭菌柜，所述灭菌柜末端连接的排气管道分为两条支路，一条直排，其特征在于，另一条安装依次连接的真空罐和水循环式真空泵。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：胡健，
申请(专利权)人：北京中怡远大机电设备有限公司，
类型：发明
国别省市：
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