富硒高虫草素含量的虫草菌丝体的培养方法技术

本发明专利技术公开了一种富硒高虫草素含量的虫草菌丝体的培养方法，包括菌种的活化、液体一级菌种的制备、液体二级菌种的制备、小型菌种发酵罐、生产发酵罐、浓缩、喷粉干燥、成品菌粉等步骤。本发明专利技术用白海参研磨液作为培养蛹虫草培养基的添加剂，利用液体发酵的方法，可以培育出高硒、高虫草素含量的蛹虫草菌丝体，硒含量可达到98.5微克/克以上，虫草素含量可达到3.15毫克/克以上。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种虫草菌丝体的培养方法。
技术介绍
现有的虫草菌丝体的培养方法普遍存在虫草素含量低、硒含量低等问题，需要进一步加以改进。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种方法简便、虫草素含量高、硒含量高的富硒高虫草素含量的虫草菌丝体的培养方法。本专利技术的技术解决方案是：一种富硒高虫草素含量的虫草菌丝体的培养方法，其特征是：包括下列步骤：（1）菌种的活化：将蛹虫草菌种接在以下培养基中进行活化和优化：葡萄糖15-20克，硫酸镁1-2克，磷酸二氢钾1-2克，维生素B10.1-0.5毫克，白海参研磨液45-55克，酵母浸粉3-5克，琼脂粉15-20克，加水至1000毫升；将上述营养液在121℃，0.1MPa条件下灭菌30分钟，待冷却后倒入培养皿中；将蛹虫草菌种接入培养皿中，22℃黑暗条件下培养5-10天，选取生长速度快，菌丝致密，颜色纯正的菌落，再转接到斜面培养基上，22℃黑暗条件下培养5-10天，所得菌种即所需虫草菌种；（2）液体一级菌种的制备：按以下配方制备液体培养基首先按下列配方配制营养液I：葡萄糖15-20克，硫酸镁1-2克，磷酸二氢钾1-2克，维生素B10.1-0.5毫克，白海参研磨液45-55克，酵母浸粉3-5克，加水至1000毫升；将上述营养液I分装在500毫升的锥形瓶中，每瓶250毫升，封口膜封口，在121℃，0.1MPa条件下，灭菌30分钟，待冷却后在超净台上接入活化的虫草菌种，再在130转/分钟，22℃的摇床中震荡培养5-9天，待液体中出现均匀的菌球且较粘稠状可用；（3）液体二级菌种的制备首先按以下配方配置营养液Ⅱ：葡萄糖15-20克，硫酸镁1-2克，磷酸二氢钾1-2克，维生素B10.1-0.5毫克，白海参研磨液45-55克，酵母浸粉3-5克，加水至1000毫升；将营养液Ⅱ分装在500毫升的锥形瓶中，每瓶250毫升，封口膜封口，在121℃，0.1MPa条件下，灭菌30分钟，待冷却后在超净台上接入一级液体虫草菌种，每瓶5毫升，在130转/分钟，22℃的摇床中震荡培养5-9天，待液体中出现均匀的菌球且较粘稠状可用；（4）小型菌种发酵罐首先按下列配方配置发酵液I：去皮马铃薯8%，蔗糖2%，玉米淀粉2%，酵母浸粉0.5%，硫酸镁0.1%，磷酸二氢钾0.1%，白海参研磨液4-5%，维生素B10.01%，自然pH值；将上述发酵液I按70%的容量装入50升的液体发酵罐中，按10%的接种量接入二级液体菌种，22℃、通气量0.5-1.0m3/h，搅拌速度150-180r/min,培养72-96h，得到生产用液体菌种；（5）生产发酵罐按下列配方配置发酵液Ⅱ：去皮马铃薯8%，蔗糖2%，玉米淀粉2%，酵母浸粉0.5%，硫酸镁0.1%，磷酸二氢钾0.1%，白海参研磨液4-5%，维生素B 10.01%，自然PH值。将上述发酵液Ⅱ按70%的容量装入200升的液体发酵罐中，按10%的接种量接入生产用液体菌种，22℃，通气量0.5-1.0m3/h，搅拌速度150-180r/min，培养72-96h；（6）浓缩：将发酵液过滤，使菌丝体和营养液分离，用蒸馏水冲洗2次；（7）喷粉干燥将获得的菌丝体在70-80℃干燥箱中烘干至恒重；（8）成品菌粉将干燥后的菌粉在-20℃避光保存。白海参研磨液的制作：将新鲜的白海参去除内脏或泡发好的白海参放入料理机中打成匀浆。本专利技术用白海参研磨液作为培养蛹虫草培养基的添加剂，利用液体发酵的方法，可以培育出高硒、高虫草素含量的蛹虫草菌丝体，硒含量可达到98.5微克/克以上，虫草素含量可达到3.15毫克/克以上。本专利技术用高硒含量的白海参作为蛹虫草培养基的添加剂，本专利技术利用液体发酵的方法，可以培育出富硒蛹虫草菌丝体，高效安全。同时利用了海参营养成分极其丰富这一特点，可以培育出高虫草素含量的蛹虫草菌丝体。用该专利技术培育出的蛹虫草不仅富硒，而且虫草素含量也很高，使蛹虫草的药用价值成倍增加，达到了事半功倍的效果。本专利技术用白海参作为硒源，避免了加亚硒酸钠的不安全性，培养出的虫草子实体不仅硒元素的含量高，还能使海参中丰富的蛋白质、氨基酸及其它微量元素作为虫草的营养源，使培养出的虫草药用价值更高。富硒的白海参虽然珍贵稀有，但目前已经能够规模化人工养殖，生产成本并不高。本专利技术重新组合了有利于菌丝体生长的配方，不仅加快了菌丝体的生长速度，同时也提高了虫草素和硒的含量。本专利技术借助食品工业液体发酵技术培养菌种来实现工业化生产，具有方法先进，成本低廉，劳动效率高，减少污染等优点。白海参又名白玉参，是极为稀有的海参，是由刺参遗传变异而来，在自然界极为罕见。据检验其体内硒的含量高达630微克/100克以上，是普通海参的10多倍，并且90%以上为有机硒。目前硒普遍被科学家称为人体微量元素中的“防癌之王”，因此白海参对肿瘤的生长有很好的抑制作用，能有效抗癌。另外，海参中钙、锌等各种元素含量也很高，蛋白质、各种氨基酸含量丰富，尤其是可以补充人体内各种必需氨基酸。下面结合实施例对本专利技术作进一步说明。具体实施方式一种富硒高虫草素含量的虫草菌丝体的培养方法，包括下列步骤：（1）菌种的活化：将蛹虫草菌种接在以下培养基中进行活化和优化：葡萄糖15-20克，硫酸镁1-2克，磷酸二氢钾1-2克，维生素B10.1-0.5毫克，白海参研磨液45-55克，酵母浸粉3-5克，琼脂粉15-20克，加水至1000毫升；将上述营养液在121℃，0.1MPa条件下灭菌30分钟，待冷却后倒入培养皿中；将蛹虫草菌种接入培养皿中，22℃黑暗条件下培养5-10天，选取生长速度快，菌丝致密，颜色纯正的菌落，再转接到斜面培养基上，22℃黑暗条件下培养5-10天，所得菌种即所需虫草菌种；（2）液体一级菌种的制备：按以下配方制备液体培养基首先按下列配方配制营养液I：葡萄糖15-20克，硫酸镁1-2克，磷酸二氢钾1-2克，维生素B10.1-0.5毫克，白海参研磨液45-55克，酵母浸粉3-5克，加水至1000毫升；将上述营养液I分装在500毫升的锥形瓶中，每瓶250毫升，封口膜封口，在121℃，0.1MPa条件下，灭菌30分钟，待冷却后在超净台上接入活化的虫草菌种，再在130转/分钟，22℃的摇床中震荡培养5-9天，待液体中出现均匀的菌球且较粘稠状可用；（3）液体二级菌种的制备首先按以下配方配置营养液Ⅱ：葡萄糖15-20克，硫酸镁1-2克，磷酸二氢钾1-2克，维生素B10.1-0.5毫克，白海参研磨液45-55克，酵母浸粉3-5克，加水至1000毫升；将营养液Ⅱ分装在500毫升的锥形瓶中，每瓶250毫升，封口膜封口，在121℃，0.1MPa条件下，灭菌30分钟，待冷却后在超净台上接入一级液体虫草菌种，每瓶5毫升，在130转/分钟，22℃的摇床中震荡培养5-9天，待液体中出现均匀的菌球且较粘稠状可用；（4）小型菌种发酵罐首先按下列配方配置发酵液I：去皮马铃薯8%，蔗糖2%，玉米淀粉2%，酵母浸粉0.5%，硫酸镁0.1%，磷酸二氢钾0.1%，白海参研磨液4-5%，维生素B10.01%，自然pH值；将上述发酵液I按70%的容量装入50升的液体发酵罐中，按10%的接种量接入二级液体菌种，22℃、通气量0.5-1.0m3/h，搅拌速度150-180r/min本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种富硒高虫草素含量的虫草菌丝体的培养方法，其特征是：包括下列步骤：（1）菌种的活化：将蛹虫草菌种接在以下培养基中进行活化和优化：葡萄糖15‑20克，硫酸镁1‑2克，磷酸二氢钾1‑2克，维生素B10.1‑0.5毫克，白海参研磨液45‑55克，酵母浸粉3‑5克，琼脂粉15‑20克，加水至1000毫升；将上述营养液在121℃，0.1MPa条件下灭菌30分钟，待冷却后倒入培养皿中；将蛹虫草菌种接入培养皿中，22℃黑暗条件下培养5‑10天，选取生长速度快，菌丝致密，颜色纯正的菌落，再转接到斜面培养基上，22℃黑暗条件下培养5‑10天，所得菌种即所需虫草菌种；（2）液体一级菌种的制备：按以下配方制备液体培养基首先按下列配方配制营养液I：葡萄糖15‑20克，硫酸镁1‑2克，磷酸二氢钾1‑2克，维生素B10.1‑0.5毫克，白海参研磨液45‑55克，酵母浸粉3‑5克，加水至1000毫升；将上述营养液I分装在500毫升的锥形瓶中，每瓶250毫升，封口膜封口，在121℃，0.1MPa条件下，灭菌30分钟，待冷却后在超净台上接入活化的虫草菌种，再在130转/分钟，22℃的摇床中震荡培养5‑9天，待液体中出现均匀的菌球且较粘稠状可用；（3）液体二级菌种的制备首先按以下配方配置营养液Ⅱ：葡萄糖15‑20克，硫酸镁1‑2克，磷酸二氢钾1‑2克，维生素B10.1‑0.5毫克，白海参研磨液45‑55克，酵母浸粉3‑5克，加水至1000毫升；将营养液Ⅱ分装在500毫升的锥形瓶中，每瓶250毫升，封口膜封口，在121℃，0.1MPa条件下，灭菌30分钟，待冷却后在超净台上接入一级液体虫草菌种，每瓶5毫升，在130转/分钟，22℃的摇床中震荡培养5‑9天，待液体中出现均匀的菌球且较粘稠状可用；（4）小型菌种发酵罐首先按下列配方配置发酵液I：去皮马铃薯8%，蔗糖2%，玉米淀粉2%，酵母浸粉0.5%，硫酸镁0.1%，磷酸二氢钾0.1%，白海参研磨液4‑5%，维生素B10.01%，自然pH值；将上述发酵液I按70%的容量装入50升的液体发酵罐中，按10%的接种量接入二级液体菌种，22℃、通气量0.5‑1.0m3/h，搅拌速度150‑180r/min,培养72‑96h，得到生产用液体菌种；（5）生产发酵罐按下列配方配置发酵液Ⅱ：去皮马铃薯8%，蔗糖2%，玉米淀粉2%，酵母浸粉0.5%，硫酸镁0.1%，磷酸二氢钾0.1%，白海参研磨液4‑5%，维生素B 10.01%，自然PH值；将上述发酵液Ⅱ按70%的容量装入200升的液体发酵罐中，按10%的接种量接入生产用液体菌种，22℃，通气量0.5‑1.0m3/h，搅拌速度150‑180r/min，培养72‑96h；（6）浓缩：将发酵液过滤，使菌丝体和营养液分离，用蒸馏水冲洗2次；（7）喷粉干燥将获得的菌丝体在70‑80℃干燥箱中烘干至恒重；（8）成品菌粉将干燥后的菌粉在‑20℃避光保存。...

【技术特征摘要】
1.一种富硒高虫草素含量的虫草菌丝体的培养方法，其特征是：包括下列步骤：（1）菌种的活化：将蛹虫草菌种接在以下培养基中进行活化和优化：葡萄糖15-20克，硫酸镁1-2克，磷酸二氢钾1-2克，维生素B10.1-0.5毫克，白海参研磨液45-55克，酵母浸粉3-5克，琼脂粉15-20克，加水至1000毫升；将上述营养液在121℃，0.1MPa条件下灭菌30分钟，待冷却后倒入培养皿中；将蛹虫草菌种接入培养皿中，22℃黑暗条件下培养5-10天，选取生长速度快，菌丝致密，颜色纯正的菌落，再转接到斜面培养基上，22℃黑暗条件下培养5-10天，所得菌种即所需虫草菌种；（2）液体一级菌种的制备：按以下配方制备液体培养基首先按下列配方配制营养液I：葡萄糖15-20克，硫酸镁1-2克，磷酸二氢钾1-2克，维生素B10.1-0.5毫克，白海参研磨液45-55克，酵母浸粉3-5克，加水至1000毫升；将上述营养液I分装在500毫升的锥形瓶中，每瓶250毫升，封口膜封口，在121℃，0.1MPa条件下，灭菌30分钟，待冷却后在超净台上接入活化的虫草菌种，再在130转/分钟，22℃的摇床中震荡培养5-9天，待液体中出现均匀的菌球且较粘稠状可用；（3）液体二级菌种的制备首先按以下配方配置营养液Ⅱ：葡萄糖15-20克，硫酸镁1-2克，磷酸二氢钾1-2克，维生素B10.1-0.5毫克，白海参研磨液45-55克，酵母浸粉3-5克，加水至1000毫升；将营养液Ⅱ分装在500毫升的锥形瓶中，每瓶250毫升，封口膜封...

【专利技术属性】
技术研发人员：周美红，程显好，王仲礼，
申请(专利权)人：鲁东大学，
类型：发明
国别省市：山东;37