神经调节蛋白拮抗剂及其在治疗癌症中的用途制造技术

本发明专利技术提供了神经调节蛋白拮抗剂和在延迟肿瘤复发前时间或预防癌细胞对用治疗剂治疗的抗性中使用神经调节蛋白拮抗剂的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】神经调节蛋白拮抗剂及其在治疗癌症中的用途对相关申请的交叉引用本申请要求2010年2月18日提交的美国临时申请No.61/305878的权益，通过提及而将其公开内容完整收入本文。专利
本专利技术涉及用神经调节蛋白拮抗剂治疗癌症。专利技术背景癌症干细胞(CSC)的身份和特性在最近数年中已经是强烈研究的一个领域。肿瘤是具有不同生物学特性的细胞的异质混合物的证据在积累。已经对许多血液学恶性肿瘤和实体瘤报告了具有启动肿瘤生长的独特能力的截然不同的细胞群体的分离。然而，已经在使用特定细胞表面标志物预期地鉴定CSC中出现不一致性。例如，已经对白血病、胰腺、结肠直肠、脑和乳腺癌报告了关于干细胞表型的根本不同的发现（综述见Brennan和Matsui2009）。此外，CSC频率的估算在肿瘤类型和患者中显著变化。CSC在维持已建立肿瘤的生长中或在化学疗法后在原发性或远距离部位再启动肿瘤中的作用仍然有待确定。对于大多数癌症患者，化学疗法后的疾病复发是死亡的一个主要原因。因而，需要更好地了解造成复发的肿瘤再启动细胞(TRIC)以更好地治疗在最初响应化学治疗处理后经历癌症复发的患者。这对于非小细胞肺癌(NSCLC)是特别相关的，因为大于三分之二的NSCLC患者不是手术切除的候选者。大多数患者以晚期疾病呈现，并且用化学疗法、放射或两种的组合治疗(LungCancerPrinciplesandPractice)。然而，尽管对治疗的初始响应良好，局部晚期疾病的5年存活率仍然为23.7%，而对于晚期疾病为3.5%(Horner等SEER)。已经显示了经由过表达或激活突变的EGFR信号传导的脱调节(deregulation)是NSCLC中的一个频繁事件（综述见Dahabreh等,2010）。EGFR是HER酪氨酸激酶家族的原型成员，该家族包括EGFR(Her1)、Her2、Her3和Her4。Her2缺乏功能性配体结合域(Graus-Porta1997)，而Her3缺乏酪氨酸激酶活性(Guy1994)，因此这些受体必须以异二聚体起作用。最近的证据显示了其它Her家族成员也可以在NSCLC中发挥作用。然而，它们对疾病的贡献是不太充分表征的，并且研究经常聚焦于其与EGFR激活的相互作用(Kuyama等2008,Hirsch2009,Zhou2006,Johnson2006,Ding2008)。神经调节蛋白是Her3和Her4受体酪氨酸激酶的一种配体。神经调节蛋白家族有4种已知的成员，即NRG1、NRG2、NRG3、和NRG4(Falls2003)。NRG1转录物经历广泛的可变剪接，生成至少15种不同同等型。所有活性同等型共享对于活性必需且足够的EGF样域(Holmes1992,Yarden1991)。已经显示了NRG1自分泌信号传导调节肺上皮细胞增殖(Jinbo2002)，并且在人肺发育中发挥作用(Patel2000)，而且牵涉NSCLC对EGFR抑制剂的不敏感性(Zhou2006)。需要提供在治疗抗性癌症和已经经历癌症复发的患者中有效的治疗剂。专利技术概述本专利技术的一个方面提供了一种延长癌症患者中的肿瘤复发前时间的方法，包括对所述患者施用有效量的神经调节蛋白拮抗剂。在一个实施方案中，该方法进一步包括对所述患者施用治疗剂。在一个实施方案中，治疗剂是化学治疗剂或抗体。在某些实施方案中，化学治疗剂是帕利他塞(paclitaxal)或顺铂或帕利他塞和顺铂的组合。在某些实施方案中，抗体是EGFR、HER2、HER3、或HER4抗体。在某些实施方案中，患者患有的癌症是非小细胞肺癌、乳腺癌、卵巢癌、头和颈癌、宫颈癌、膀胱癌、食管癌、前列腺癌、或结肠直肠癌。在一个实施方案中，肿瘤复发前时间的延长比在没有所述神经调节蛋白拮抗剂的情况中的复发前时间大至少1.25倍。在一个实施方案中，肿瘤复发前时间的延长比在没有所述神经调节蛋白拮抗剂的情况中的复发前时间大至少1.50倍。在某些实施方案中，神经调节蛋白拮抗剂是抗体、小分子、免疫粘附素、或RNA。在一个实施方案中，神经调节蛋白拮抗剂是NRG1拮抗剂。在一个实施方案中，NRG拮抗剂是抗NRG1抗体。附图简述图1：用于研究肿瘤再启动细胞(TRIC)的体内模型的图示。图2A：无胸腺裸鼠中的Calu3人NSCLC异种移植物模型，其中化学疗法由帕利他塞和顺铂组成。数据以均值肿瘤体积±SEM呈现，n=12只小鼠/组。图2B：无胸腺裸鼠中的H441人NSCLC异种移植物模型，其中化学疗法由帕利他塞和顺铂组成。数据以均值肿瘤体积±SEM呈现，n=12只小鼠/组。图2C：具有肿瘤细胞对SCID/beiz小鼠乳房脂肪垫的正位移植的KPL4人乳房模型，其中化学疗法由帕利他塞组成。数据以均值肿瘤体积±SEM呈现，n=12只小鼠/组。图2D：用顺铂处理K-rasLSLG12D，CAG-LSL-GFP遗传工程小鼠NSCLC模型。数据以每个肺的GFP阳性细胞的平均数±SEM呈现，n=6只小鼠/组。图3A：通过微阵列分析中的两种独立的探针证明NRG1mRNA在Calu3异种移植物模型的TRIC中富集。使用自独立的肿瘤样品分离的RNA通过针对NRG1a和NRG1b的定量实时PCR(qPCR)验证富集。图3B：通过两种不同微阵列探针显示的NRG1mRNA在H441异种移植物模型的TRIC中的富集。这使用来自用于微阵列分析的相同肿瘤样品的RNA通过针对NRG1a和NRG1b的qPCR验证。图3C：通过两种不同微阵列探针显示的NRG1mRNA在KPL4乳腺癌异种移植物模型的TRIC中的富集。图3D：通过一种微阵列探针显示并通过qPCR验证的NRG1mRNA在K-rasLSLG12D小鼠NSCLC模型的TRIC中的富集。图4：NRG1富集对于残留细胞是特异的，如通过对化学疗法后各个大小和时间的肿瘤中的肿瘤细胞NRG1mRNA水平的qPCR分析证明的。图5A：图显示了在其随意的饮用水中施用媒介物（蔗糖）或dox(2gm/L)的具有已建立的Calu3-shNRG1异种移植物肿瘤的小鼠的肿瘤生长曲线。对肿瘤体积一周测量两次，持续整个研究。数据以线性混合效应(LinearMixedEffect，LME)模型对肿瘤体积产生的拟合呈现，作为具有自动确定纽结(auto-determinedknot)的三次样条(cubicsplines)绘图。图5B：图显示了用化疗+蔗糖或化疗+dox处理的具有已建立的Calu3-shNRG1异种移植物肿瘤的小鼠的肿瘤生长曲线。数据以LME模型对肿瘤体积产生的拟合呈现，作为具有自动确定纽结的三次样条绘图。图6A：图显示了用蔗糖或dox处理的具有已建立的H441-shNRG1异种移植物肿瘤的小鼠的肿瘤生长曲线（n=12只/组）。数据以肿瘤体积的LME拟合分析呈现，作为具有自动确定纽结的三次样条绘图。图6B：图显示了用化疗+蔗糖或化疗+dox处理的具有已建立的H441-shNRG1异种移植物肿瘤的小鼠的肿瘤生长曲线（n=12只/组）。数据以肿瘤体积的LME拟合分析呈现，作为具有自动确定纽结的三次样条绘图。图7A：图显示了用蔗糖或dox处理的具有已建立的H1299-shNRG1异种移植物肿瘤的小鼠的肿瘤生长曲线（n=12只小鼠/组）。数据本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.02.18 US 61/305,8781.神经调节蛋白1(NRG1)拮抗剂和化学治疗剂在制备用于延长癌症患者中的肿瘤复发前时间的药物中的用途，所述延长包括对所述患者施用有效量的神经调节蛋白1拮抗剂和化学治疗剂，其中所述化学治疗剂是帕利他...

【专利技术属性】
技术研发人员：E杰克森，EA斯维特柯德罗，
申请(专利权)人：基因泰克公司，里兰斯坦福初级大学理事会，
类型：
国别省市：