重组人长效白介素1受体拮抗剂融合蛋白的纯化方法技术

本发明专利技术提供了一种重组人长效白介素1受体拮抗剂融合蛋白的纯化方法，包括发酵表达获得含有目的蛋白的发酵液、预处理、强阴离子交换层析、蓝胶亲和层析、弱阴离子交换层析。本发明专利技术得到较高纯度的目的蛋白，有效解决了在大规模发酵生产中无法得到足够纯度的目的蛋白的难题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及蛋白质纯化领域，更具体地，本专利技术提供了一种重组人长效白介素I受体拮抗剂融合蛋白的纯化方法。
技术介绍
作为一个主要的免疫调节因子，白介素-l(Interleukin-l，IL-1)在机体的免疫及能量代谢调节中起到重要的作用。研究发现，IL-I在自身免疫性疾病如类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis, RA)、多发性硬皮病(Systemic sclerosis)、II 型糖尿病(Type2diabetes)、肥胖症(Obesity)的发病过程中起到非常重要的作用，最近的研究表明，IL-I还与某些种类的心血管疾病的发生相关。白介素 I 受体拮抗剂(Interleukin-1 receptor antagonist, IL-1 Ra)是人体内 天然存在的一种蛋白质分子，其在体内可以与IL-I的受体特异性地结合，灭活相应的信号传导途径，从而对IL-I引起的机体损伤有保护作用。通过GenBank查询可以得到人白介素I受体拮抗剂的全基因序列，本专利中IL-IRa的基因序列对应GenBank号为M63099. I。美国食品和药品管理局(FDA)在2001年11月本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种重组人长效白介素1受体拮抗剂融合蛋白的纯化方法，该方法包括：（1）将能够表达重组人长效白介素1受体拮抗剂融合蛋白的基因工程菌株进行发酵表达，获得含有目的蛋白的发酵液，经预处理制得含目的蛋白的浓缩液，所述目的蛋白为HSA?IL?1Ra、HSA?（G）n?IL?1Ra、IL?1Ra?HSA或IL?1Ra?（G）n?HSA，其中（G）n为肽接头，G的序列为GlyGlyGlyGlySer，n为1?4的整数；?（2）将上步所得的浓缩液进行强阴离子交换层析，获得含目的蛋白的洗脱液，所用层析介质含有季铵基或季铵乙基配基且所用介质的基质为琼脂糖或葡聚糖；（3）将上步所得洗脱液进行蓝胶亲和层析，获得含目的蛋...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：徐岩，李征，王海彬，陈枢青，沈其，聂磊，白骅，
申请(专利权)人：浙江海正药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：